FCY1/HSV-TK双自杀基因体系对前列腺癌杀伤作用的研究

目的构建前列腺特异性膜抗原启动子调控表达的FCYl/TK双自杀基因表达载体,观察其对前列腺癌细胞LNCaP、PC-3的杀伤作用及在荷瘤裸鼠体内的抑瘤作用。方法 PCR扩增基因组DNA中PSMA启动子,利用基因重组的方法,替换真核表达载体plRES中的CMV启动子,再将自杀基因FCYl和HSV-TK分别克隆于载体plRES的两个多克隆位点,构建真核表达载体pPSMA-IRES-FCYl-TK。将该载体转染LNCaP、PC-3细胞,用RT-PCR的方法检测其转录,用MTT法检测前体药物5-氟胞嘧啶、丙氧鸟苷单一或联合使用对转染后的LNCaP、PC-3细胞的杀伤作用。将稳定转染双自杀基因表达载体的前列腺癌细胞注射入荷瘤裸鼠皮下,同时设立对照,计算肿瘤体积,观察生存状态。结果成功构建pPSMA-IRES-FCYl-TK双自杀基因表达载体,经脂质体转染LNCaP、PC-3细胞后,RT-PCR检测到FCYl和TK基因均有转录。MTT法检测表明5-FC与GCV联合使用,其细胞生长抑制率明显高于单独使用5-FC、GCV（P〈0.05）组。荷瘤裸鼠体内抑瘤试验显示：去势与双自杀基因联合治疗组治疗后瘤体体积略有下降,双自杀基因联合治疗组死亡率下降明显。结论 pPSMA-IRES-FCYl-TK的双自杀基因体系对前列腺癌细胞及荷瘤裸鼠肿瘤的杀伤作用,明显优于单自杀基因体系。     

雌激素对乳腺癌细胞的生长及p185蛋白和表皮生长因子受体表达的影响

为了研究乳腺癌的发展过程中雌二醇（Ｅ＿２）的作用机制及参与因素，作者使用流式细胞仪观察了人乳腺癌细胞株ＳＫ－ＢＲ－３在Ｅ＿２作用下的生长特征及ｐ１８５蛋白和表皮生长因子（ＥＧＦ）受体的表达．结果表明，乳腺癌细胞生长加快，ＤＮＡ合成增加，Ｓ期百分率升高（Ｅ＿２组２６．７±２．５，对照组２１．２±２．１，Ｐ＜０．０５）．在Ｅ＿２的作用下，乳腺癌细胞的ｐ１８５蛋白表达降低（Ｅ＿２３５±５．６，对照组６１±１３．１，Ｐ＜０．０５）而ＥＧＦ受体表达升高（Ｅ＿２３９±６．９，对照组２１±５．４，Ｐ＜０．０５），提示ＥＧＦ在乳腺癌的早期发展中可能发挥更主要的作用．     

肿瘤患者红细胞免疫功能和sIL-2R检测的意义

目的 :探讨肿瘤患者红细胞 (RBC)免疫功能与白细胞介素 2受体 (sIL 2R)变化的意义。方法 :采用免疫黏附酵母菌花环法 ,检测 116例恶性肿瘤患者的RBCC3b受体花环率 (RBC C3bRR)、RBC免疫复合物花环率 (RBC ICR) ,用双抗体夹心ELISA法测患者血清sIL 2R ,并与 5 0例健康对照相比较。结果 :消化道肿瘤组、胸腺瘤组RBC C3bRR与正常对照组相比较 ,显著降低 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;肺癌组、淋巴瘤组RBC C3bRR与对照组相比 ,显著降低 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;而各肿瘤组RBC ICR与正常对照组相比 ,显著增多 ,差异有极显著性 (P <0 0 1)。各肿瘤组间RBC C3bRR、RBC ICR差异均无显著性 (P >0 0 5 )。各肿瘤组与正常对照组相比 ,sIL 2R水平明显增高 (P <0 0 1) ,各肿瘤组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :测定RBC免疫功能和sIL 2R ,可了解肿瘤患者的免疫状态 ,在一定程度上对疾病的严重程度、肿瘤分期、疗效及预后作出正确的评估     

流式细胞仪检测人淋巴细胞抗原CD3,CD4和CD8保存条件的探讨

该研究旨在寻找一种简便可行的保存细胞的方法，以和早于作流式细胞仪分析。通过检测人外周血淋巴细胞表面抗原ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８的实验，证明采用两步法固定细胞，无论对国产单克隆抗体还是进口试剂地匀有较好效果。其方法分两步：第一步用１％多聚甲醛混合液固定；洗涤后第二步，用５０％ 乙醇溶液保存在４℃暗处，该方法不会地改变淋巴细胞抗原荧光标记的阳性率，经统计学处理Ｐ〉０．０５。     

恶性肿瘤患者巨噬细胞淋巴细胞及红细胞免疫功能的研究

目的:通过对巨噬细胞、T淋巴细胞和红细胞免疫功能的检测,探讨恶性肿瘤患者三类细胞免疫检查的临床意义。方法:应用流式细胞仪检测荧光阳性的巨噬细胞数来测定巨噬细胞吞噬率;应用针对CD系列的单克隆抗体作流式细胞仪分析,检测T细胞亚群CD4和CD8的百分率及其比值;应用免疫粘附酵母菌花环法检测红细胞免疫功能。结果:肿瘤组的巨噬细胞吞噬率、T淋巴细胞和红细胞免疫功能均显著低于健康对照组,两组间有显蓍性差异(P<0.05)。巨噬细胞吞噬率与CD4/CD8比值、红细胞免疫RBC-C3bRR及RBC-ICR均有显著正相关性,P=0.01。结论:恶性肿瘤患者巨噬细胞、T淋巴细胞和红细胞免疫功能均有显著降低,对于肿瘤患者的诊治有一定的意义。     

胃癌患者红细胞免疫功能及T淋巴细胞亚群的变化

目的：探讨胃癌患者红细胞免疫功能状态和T淋巴细胞亚群的改变。方法：测定60例胃癌患者的红细胞Ⅰ型补体受体花环率(C3dRR)、免疫复合物花环率(ICR)，同时用流式细胞仪(FCM)检测T细胞亚群，与40例健康献血员的红细胞免疫指标及T淋巴细胞亚群的变化作对照。结果：胃癌患者C3bRR降低，ICR增高，T淋巴细胞亚群CD^ 4及CD^ 4／CD^ 8比值都低于对照组，不同病理分期之间差异有显著意义，胃癌组C3bRR与CD^ 4／CD^ 8比值呈正相关。结论：胃癌患者红细胞免疫功能低下、T淋巴细胞亚群比例失调，两者关系密切，并与临床分期相关。     

流式细胞术在胸腔积液及腹水细胞诊断中的价值

目的 :探讨DNA异倍体对于伴有胸腔积液及腹水肿瘤的诊断价值。方法 :将临床上出现中等量以上胸腔积液或腹水的 5 5例患者 ,抽取胸腔积液或腹水 ,分离其中的细胞 ,制备单细胞悬液 ,用流式细胞仪分析DNA异倍体 ,并探讨其与病理诊断及临床诊断的关系。结果 :DNA异倍体在肿瘤细胞中出现率显著高于非肿瘤细胞 ,统计学检验表明两者差异有显著性。结论 :流式细胞术分析胸腔积液及腹水细胞的DNA异倍体 ,对于恶性肿瘤的细胞学诊断有较大的意义 ,可在临床推广应用     

子宫内膜癌患者T细胞亚群、红细胞免疫与Ag-NORs定量分析的临床意义

目的 探讨子宫内膜癌患者的免疫功能变化及临床意义,方法 采用单隆抗体直接免疫荧光染色法,红细胞花环试验及KL型肿免疫图象分析仪,对21例子宫内膜癌患者和20名正常对照组分别测定其外周血T细胞亚群,红细胞免疫C3b受体花环率（E－C3bRR%)与红细胞循环免疫复合物花环率（ICR％）,核仁银染区面积／细胞核面积比值（I．S％）,结果 子宫内膜癌患者CD3^ T细胞,CD4 ^ T细胞,CD4^ ./CD8^ 比值,E－C3 bRR%,I.S%值明显降低;CD8^ T细胞,T－ICR％明显升高,与对照组相比较差异显著（P＜0．01）,结论 子宫内膜癌患者免疫功能低下,联合检测T细胞亚群,红细胞免疫与Ag-NORs可较全面反映子宫内膜癌患者的免疫功能状态,并可指导临床治疗。     

软组织肉瘤患者Th1/Th2亚群漂移研究

目的：观察软组织肉瘤患者Ｔ淋巴细胞亚群中Ｔｈ１／Ｔｈ２的变化,为细胞因子免疫治疗提供依据。方法：应用放射免疫分析法以及酶联免疫分析法检测１０例软组织肉瘤患者及１０例健康志愿者血甭中ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１２的含量,检测外周血单个核细胞２上清中ＩＬ－２、ＩＬ－４含量。结果：软组织肉瘤患者血清及培养上清中ＩＬ－２、ＩＬ－１２减少,而ＩＬ－１０、ＩＬ－４、ＩＬ－６含量增加。经过植物血凝素刺     

恶性骨肿瘤患者T细胞亚群、红细胞免疫功能与Ag-NORs定量分析的关系及临床意义

目的 定量分析恶性骨肿瘤患者T细胞亚群、红细胞免疫功能及核仁组成区相关嗜银蛋白（Ag-NORs)的关系及其临床意义。方法 采用单克隆抗体直接免疫荧光法、红细胞花环试验及肿瘤免疫图像分析方法,分别对23例骨肿瘤患者和20例正常人（对照组）的外周血T细胞亚群、红细胞免疫功能及核仁银染区面积／细胞核面积比值（I．S％）进行分析。 结果 患者CD3^ `CD4^ ,T细胞及CD4^ `/CD8^ 比值以及E－C3bRR和I．S%值均明显降低,CD8^ 及E－ICR明显升高,与对照组相比较差异显著（P＜0．01）。结论 上述结果显示,恶性骨肿瘤患者免疫功能低下;Ag-NORs的检测与T细胞亚群、红细胞免疫功能的检测,能较全面地反映肿瘤患者的免疫功能状态,并可指导临床治疗。