应用压电石英晶体生物传感器研究赤芍801与ET-1间的相互作用

目的 采用体外实验的方法,直接检测活血化瘀中药赤芍有效成分赤芍801与细胞因子内皮素-1(ET-1)间的相互作用,探讨其作用的可能的靶点和分子机理。方法 应用压电石英晶体生物传感器——石英晶体微天平(QCM)检测赤芍801与ET-1之间的特异性结合。在QCM金基片表面经活化后接合上亲和素,继而将生物素衍生化的ET-1固定于基片表面,加入赤芍801,检测赤芍801与ET-1之间的相互作用。每-步结合反应后,均用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗以去除非特异性吸附。结果 赤芍801与ET-1发生特异性结合。结论 ET-1可能是赤芍801体内作用靶点之-,即赤芍801通过与ET-1结合,阻碍ET-1与其受体间的结合,从而拮抗ET-1的作用,扩张血管,抑制血小板聚集。     

亲和型生物传感器及其在中药作用机理研究中的应用展望

传感器是一种能感受规定的被测量,并按一定规律转换成可测信号的器件。主要有物理和化学传感器两大类,生物传感器是近年来发展起来的化学传感器中的一个分支,是利用固定化的生物体或其成分作为敏感元件的传感器。生物传感器是生物技术产业的有机组成部分之一,也是我国国家生物技术重点攻关计划项目之一。根据分子识别元件与待测物结合的性质可将生物传感器分为两类：催化型(代谢型)生物传感器和亲和型(受体型)生物传感器。前者利用生物催化剂的专一性和催化性或底物对它的抑制作用,对其作用的底物进行检测,如酶传感器、微生物传感器、组织传感器等,它检测的是整个反应动力学过程的总效应;后者则利用分子间的特异的亲和性,即生物活性物质对底物的亲和或键合作用,如免疫传感器、受体传感器、DNA传感器等,它检测的是热力学平衡的结果。     

益气养阴复方对病毒性心肌炎小鼠T淋巴细胞影响的实验研究

应用ＣｏｘＢ３ｍ所致的病毒性心肌炎小鼠模型,研究了益气养阴复方对模型鼠脾脏Ｔｈｙ－１细胞、Ｌ３Ｔ４细胞、ｌｙｔ２细胞的影响。结果表明：益气养阴复方能明显提高Ｔ细胞亚群数,其中以中剂量效果明显,提示益气养阴复方具有较好的免疫调节作用。     

Effect of Chinese herbal medicine for activating blood circulation and detoxifying on expression of inflammatory reaction and tissue damage related factors in experimental carotid artery thrombosis rats

Objective：To observe the pharmaceutical effect of Chinese drugs for activating blood circulation （Xiongshao Capsule,XSC,芎芍胶囊）and for activating blood circulation and detoxification（Xiongshao Capsule and Huanglian Capsule,XSHLC,黄连胶囊）in terms of the indices of thrombosis,inflammatory reaction and tissue damage related factors in experimental carotid artery thrombosis rats.Methods：Fifty Wistar rats were randomly divided into the sham operation group,the model group,the Simvastatin group（SG）,the activating blood circulation（ABC）group,and the activating blood circulation and detoxifying（ABCD）group,with 10 rats in each group.Simvastatin（1.8 mg/kg）,XSC（0.135 g/kg）and XSHLC（0.135 g/kg）were administered to Simvastatin,ABC and ABCD group by gastrogavage,and an equal volume of normal saline was given to the sham operation group and the model group.After 2 weeks of successive medication,the rats in the model and all drug therapy groups were made into experimental carotid artery thrombosis model.The serum levels of matrix metalloproteinases（MMP-9）,tissue inhibitors to metalloproteinase（TIMP-1）,granule membrane protein-140（GMP-140）,tissue-type plasminogen activator（t-PA）,high-sensitivity C-reactive protein（hs-CRP） and interleukin-6（IL-6）were detected with enzyme-linked immunoassay 24 h later.Results：Compared with the model group,the levels of serum GMP-140,hs-CRP,IL-6 and MMP-9 were significantly decreased,and the level of t-PA was significantly increased in the ABC and ABCD group（P〈0.05）,while the level of serum hs-CRP in ABCD group decreased significantly compared with that in the ABC group（P〈0.05）.Conclusions：Chinese drugs both for activating blood circulation and for activating blood circulation and detoxifying have good effects on regulating indices of thrombosis,inflammatory reaction and tissue damage in experimental carotid artery thrombosis rats.The effect of activating blood circulation and detoxifying drugs on regulating the level of serum hs-CRP is superior to that of activating blood circulation drug alone.     

汉族人血小板GPⅡb HPA-3基因多态性与冠心病的相关性研究

目的： 观察血小板膜糖蛋白（GP）Ⅱb人类血小板抗原-3（HPA-3）基因多态性,在北京河北地区汉族人中各基因型的分布频率,分析该多态性与冠心病易感性的相关性。方法: 本研究采用病例对照设计,筛选符合冠心病、健康人入选标准的212例冠心病患者及106例健康对照人群为研究对象,记录冠脉造影病变支数,采用TaqMan探针技术检测HPA-3基因多态性。结果: 大于45岁的人群中,至少含有1个HPA-3b等位基因者较HPA-3a/3a原生型纯合子,冠心病人(72.4%/27.6%)多于健康人(57.1%/42.9%),不同基因型在冠心病组和健康对照组两组间的分布具有显著差异(P<0.05);冠心病患者不同病变支数基因型构成无显著差异(P＞0.05)。以是否患冠心病为因变量的二分类Binary Logistic回归分析,校正年龄、性别、体重指数对冠心病的影响后,结果显示HPA-3多态位点基因型与冠心病发病密切相关,含有至少1个HPA-3b等位基因者较HPA-3a/HPA-3a纯合型发生冠心病的危险性是2.105倍。结论: GPⅡb的HPA-3多态位点是汉族人冠心病发病的独立危险因素,尤其在年龄＞45岁的人群中表现明显。     

解毒活血中药配伍对载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉NF-κB与MMP-9表达的调控作用

目的 观察解毒活血中药配伍对栽脂蛋白E基因敲除小鼠[apolipoprotein E knocked-outmice,ApoE（-／-）mice]主动脉核因子-κB（NF-κB）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达水平的调控作用。方法 13周龄ApoE（-／-）小鼠分为高脂组（给予高脂饲料）和普通饲料组（给予普通饲料）,同时设13周龄C57BL／6J小鼠对照组（给予普通饲料）。19周后进行干预,普通饲料模型组、C57BL／6J小鼠对照组灌服生理盐水,高脂组随机分为解毒组[灌服虎杖苷26．6mg／（kg·d）],活血组[灌服芎芍胶囊110mg／（kg·d）],解毒活血配伍高剂量组（灌服虎杖提取物53．2mg／（kg·d）,芎芍胶囊220mg／（kg·d）];解毒活血配伍中剂量组[灌服虎杖提取物26．6mg／（kg·d）,芎芍胶囊110mg／（kg·d）];解毒活血配伍低剂量组（灌服虎杖提取物13．3mg／（kg·d）,芎芍胶囊55rag／（kg·d）],洛伐他汀组[灌服洛伐他汀3．3mg／（kg·d）],高脂饲料模型组（灌服生理盐水）。17周后,取主动脉做常规石蜡切片,免疫组化观察其NF-κB和MMP-9表达的程度。结果 模型组ApoE（-／-）小鼠主动脉及粥样斑块NF-κB和MMP-9表达明显增加,虎杖苷、芎芍胶囊、洛伐他汀及解毒活血配伍治则的虎杖苷与芎芍胶囊配伍均可降低其主动脉NF-κB和MMP-9表达（P〈0．01）,且以解毒活血配伍高剂量组疗效最好（P〈0．01）。结论 解毒活血配伍可降低ApoE（-／-）小鼠主动脉NF-κB和MMP-9表达,且优于单纯解毒和活血组。     

西洋参茎叶总皂苷对急性心肌梗死大鼠心肌能量代谢的影响

目的探讨西洋参茎叶总皂苷是否能改善缺血心肌细胞的能量代谢。方法选用急性心肌梗死模型大鼠,随机分为心悦胶囊大、中、小剂量组,倍他乐克组,模型组,同时设假手术及正常组(每组各8只)。药物治疗组于术后第2天开始灌胃给药,每日1次,术后第15天取心肌组织制成匀桨,采用高效液相色谱(HPLC)法测定心肌组织中ATP、ADP、AMP的含量,并计算总腺苷酸(TAN)含量及能荷(EC)值。结果心悦胶囊治疗组ATP的含量及EC水平均高于模型组,其中心悦胶囊大剂量组ATP的含量及心悦胶囊大、中、小剂量组的EC水平升高显著(P<0.05)。结论西洋参茎叶总皂苷能提高缺血心肌组织中ATP含量及EC的贮备水平。     

蒺藜总皂苷对高脂血症大鼠血小板活化及血栓形成影响的研究

目的观察蒺藜总皂苷对高脂血症大鼠颈总动脉血栓模型血栓形成时间、血浆GMP-140、TXB2/6-Keto-PGF1α及t-PA/PAI的影响.方法在喂饲高脂饲料造成大鼠高脂血症模型的基础上,电刺激颈总动脉诱导动脉血栓形成模型,观察蒺藜总皂苷对高脂血症大鼠动脉血栓形成时间的影响.并采用放免法测定血浆GMP-140、TXB2、6-Keto-PGF1α、t-PA/PAI水平,ELISA法测定血浆t-PA/PAI水平,观察蒺藜总皂苷对高脂血症大鼠动脉血栓模型血小板活化的影响.结果蒺藜总皂苷大剂量(60 mg/kg)组与空白对照组比较有统计学意义(P＜0.05),大鼠血浆GM-PL-140含量、TXB2及PAI含量下降;6-Keto-PGF1α、t-PA/PAI含量增高.结论蒺藜总皂苷有抑制血小板聚集及血栓形成的作用.     

肾精、端粒酶与血管老化

在人生、长、壮、老、死过程中,中医的肾精起着决定性作用,而中医对肾精描述与性激素作用很相似.随着现代医学发展,老龄化是医学领域重要的研究课题,衰老尤其是血管老化备受医学研究者重视.为此,中国老年学学会衰老与抗衰老科学委员会发布了2013年的《中国衰老与抗衰老专家共识》,呼吁国家加大对衰老与抗衰老研究的基金投入.近年来抗衰老的研究主要集中在增加端粒酶活性方面,力求通过延缓端粒缩短,从而实现抗机体衰老的目的.本文就肾精、性激素、端粒酶三者的关系进行阐述,对衰老的防治具有重要的理论意义.     

硝酸异山梨酯对大鼠缺血心肌血管新生的影响

目的观察硝酸异山梨酯对急性心肌梗死(AMI)大鼠缺血心肌组织形态、梗死面积及毛细血管新生的影响。方法Wistar大鼠90只建立AMI模型后,随机分为5组,分别为正常组,假手术组,模型组,硝酸异山梨酯低剂量组(IDL组)和硝酸异山梨酯高剂量组(IDH组),每组18只。大鼠饲养7、14天后各随机处死9只,截取心肌组织,进行光镜、电镜观察,利用NBT染色法测定心肌梗死面积,应用免疫组织化学法测定Ⅷ因子,进而计算缺血心肌微血管密度(MVD),通过RT-PCR技术检测血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达情况。结果光镜下观察,缺血区可见炎细胞浸润、心肌肿胀、梗死区纤维化。与模型组比较,IDL组和IDH组7、14天心肌梗死面积明显缩小,MVD明显增加(P<0.05);正常组、假手术组VEGF mRNA、bFGF mRNA表达有所减少,而IDH组则有所增加。结论硝酸异山梨酯可明显缩小AMI大鼠梗死面积,促进缺血心肌的毛细血管新生,对心肌缺血损伤具有保护作用。