层粘连蛋白酶联免疫分析方法的建立及初步应用

目的　建立酶联免疫吸附试验 ,对层粘连蛋白进行定量检测。方法　将鼠抗人层粘连蛋白单克隆抗体包被于聚苯乙烯微孔板 ,兔抗人层粘连蛋白抗体作第一抗体 ,酶标羊抗兔抗体作为第二抗体 ,在对有关试验条件进行优化后 ,检测 73份献血员标本。结果　本法的标准曲线为 2 5～ 16 0 0ng/ml,但在 5 0～ 80 0ng/ml范围内线性理想 ,其线性回归系数大于 0 .95。批内和批间变异系数分别为 8.6 %和 9.3% ,灵敏度为 2 5ng/ml,平均回收率为 98.1%。 17份样品用本方法与放射免疫法同时检测 ,其相关系数为 0 92 96。 73例献血员血清层粘连蛋白水平为 (115 .7± 17.3)ng/ml。结论　本方法可替代放射免疫法 ,用于人血清和组织液中层粘连蛋白的定量检测     

肝病诊断新标志—血清Ⅳ型胶原

肝病诊断新标志──血清Ⅳ型胶原海军医学研究所（上海２００４３３）柴明胜肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段。以往主要依靠肝活检来研究和诊断，但它有创伤性，而且又难以动态观察。近年来对肝纤维化的血清标志物有了新的进展。肝脏中含有Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和...     

血清Ⅳ型胶原诊断肝纤维化的临床评价

本文采用放免法测定了１７０名各种肝病患者血清Ⅳ型胶原（Ⅳ·Ｃ）和透明质酸（ＨＡ）含量。并对其中的６９例同时采用酶免法进行了Ⅳ·Ｃ含量测量。经比较，放免和酶免二法明显相关（ｒ＝０．７０）。在肝硬化和慢肝各组Ⅳ·Ｃ与ＨＡ也有相似的变化，随着肝纤维化程度变化，血清Ⅳ·Ｃ含量步步升高，它是反映肝病时基底膜胶原变化的可靠指标。     

ELISA法检测血清透明质酸在肝病诊断中的应用

透明质酸 (hyaluronicacid ,HA)系多糖大分子 ,为细胞外基质及结缔组织的主要成分。正常成人每日HA降解量为10～ 10 0mg[1] ,经肝内皮细胞摄取降解 ,肾小球滤过排除后 ,血清正常HA含量仅 <10 0ng/ml[2 ] 。然而 ,当HA“来源”增加(如类风湿性关节炎、硬皮病 )或“去路”受损 (肝肾疾病 )时 ,血清HA浓度显著升高。国内外临床研究证实 ,HA的定量检测具有极大的临床价值 ,与肝穿活检结果有很好的相关性 ,动态观察血清HA变化有助于 :(1)早期诊断肝纤维化 ;(2 )监测药物对慢性肝炎及肝纤维化的诊疗效应。综观国内文献就近几年有关HA临床应…     

一种Ⅲ型前胶原放射免疫分析方法的建立

目的 :从山羊胎皮中纯化Ⅲ型前胶原 (gPCⅢ ) ,建立血清PCⅢ放免测定法 ,并与用人胎皮提取的Ⅲ型前胶原(hPCⅢ )建立的方法进行比较。方法 :采用分级盐析沉淀和DEAE层析纯化制备 gPCⅢ纯品 ,采用氯胺T法标记纯化的 gPCⅢ ,用完全福氏佐剂在新西兰大白兔皮下注射取得抗gPCⅢ兔血清 ,用双抗体平衡加样法建立放射免疫测定法。并用本法和用hPCⅢ建立的放免法分别测定正常人 10 0例和各型肝病患者 2 0 0例。结果 :两法测定结果完全吻合 ,都显示出肝纤维化组PCⅢ升高最显著 ,慢性肝炎组也有显著升高 ,慢性迁延性肝炎组与其它肝病组无明显升高。结论 :gPCⅢ与hPCⅢ具有斜率近似的曲线 ,两者的基本结构也完全相似。两法测定的临床数据表明 ,用gPCⅢ建立的方法可初步代替hPCⅢ用以测定人血清中PCⅢ含量     

抗人层粘连蛋白Fab＇的制备

用ＤＥＡＥ纤维素ＤＥ－５２反相吸附纯化抗人层粘连蛋白（ＬＮ）ＩｇＧ，ＩｇＧ回收率达１１．６ｍｇ／ｍｌ血清。胃蛋白酶消化ＩｇＧ成Ｆ（ａｂ＇）２，再用１０ｍｍｏｌ／Ｌ２－巯基乙醇３７℃反应９０ｍｉｎ还原成Ｆａｂ＇，回收率约８１％，放免效价为１：３５００．测得纯化的ＩｇＧ、Ｆ（ａｂ＇）２及Ｆａｂ＇分子量分别为１５００００、９００００、４５０００，与理论值相近。放免检测中用Ｆａｂ＇取代抗血清可纠正对血清ＬＮ测定的误差，从而建立检测ＬＮ的准确、灵敏方法。     

低剂量中子照射对大鼠细胞外基质成分的影响

目的　探讨低剂量中子辐射对大鼠肺组织细胞外基质的影响。方法　 12 0只雄性Wistar大鼠随机分为 4组 ,分别接受 0 ,0 .2 9,0 .6 2和 1.2 0Gy的2 52 Cf中子源照射 ,分别在照后 3d ,1和 2个月时处死动物 ,取肺组织样品 - 30℃贮存。采用放射免疫方法测定其透明质酸、层连蛋白、Ⅳ型胶原和Ⅲ型前胶原的含量。结果　照射后各组肺组织透明质酸水平均无明显变化 ;层连蛋白水平在照后 3d ,与对照组相比低、中、高 3个剂量组均出现显著降低 ,直到照后 2个月仍未完全恢复到对照组水平 ;Ⅳ型胶原水平在照射后均出现升高趋势 ,但无显著性差异 ;Ⅲ型前胶原在照后早期出现升高趋势 ,但随后降低。结论　中子低剂量照射可引起肺组织某些细胞外基质成分的改变 ,但效应的形式和程度均随照射剂量及照后时间而不同。     

肝纤维化血清标志物联合分析与病理诊断的关系

探讨肝纤维化血清标志物水平与病理纤维化分期的关系。方法：病毒性肝炎患者８３例,测定其血清透明质酸,层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原和Ⅳ型胶原含量,其中６２例同时作肝组织病理检查。结论血清纤维化标志与病分显著相关,联合测定对肝纤维化,肝硬化有较好的诊断价值。     

胃癌患者血清层粘连蛋白及Ⅳ型胶原的检测及意义

层粘连蛋白(ｌａｍｉｎｉｎ,ＬＮ)和Ⅳ型胶原(ⅣＣ)等构成的基底膜(ＢＭ)是体内的细胞外间质,它把多种器官的实质细胞与间质成份分隔开。近年研究表明,ＢＭ在肿瘤生长过程中,具有“限制性屏障作用”,肿瘤细胞对ＢＭ的粘附、降解和破坏是浸润、转移的重要环节[1,2]。本文观察了20例胃癌患者血清ＬＮ、ⅣＣ含量变化及其与肿瘤生物学行为的关系,并对其临床意义进行了探讨。资料和方法一、病例选择自1996年6月至10月在第二军医大学长征医院住院胃癌患者20例,年龄31～77岁,平均57岁,男性11例,女性9例。均经手术及病理证实。其中,ＴＮＭ分期、组织…