二代测序技术在脓毒症病原学诊断中的应用价值

目的 探讨二代测序技术(NGS)在脓毒症病原体检测中的运用价值。方法 采用回顾性分析研究,收集2018年1月至2022年1月某三级甲等教学医院收治的82例疑似脓毒症患者的临床资料,采集血标本进行血培养、NGS和聚合酶链反应(PCR)检测,比较3种方法的临床应用价值。结果 血培养、NGS和PCR所需检测时间分别为(5.61±1.22)、(1.32±0.26)和(1.52±0.31)d。82例患者中,诊断为脓毒症62例,非脓毒症患者20例;脓毒症组中有35例未治愈,明显高于非脓毒症组4例(P<0.05)。61例NGS阳性标本中,检测出病原体主要包括鲍曼不动杆菌10例、肺炎克雷伯杆菌14例、金黄色葡萄球菌4例、巨细胞病毒(CMV)22例、人类疱疹病毒(EBV)13例、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)13例、耶氏肺孢子菌8例和烟曲霉5例。12例患者血培养阳性,共计检出13种病原体,包括肺炎克雷伯杆菌3例、铜绿假单胞菌杆菌2例,大肠杆菌2例、鲍曼不动杆菌、伯克霍尔德菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、溶血葡萄球菌和白色念珠菌各1例。NGS检测阳性率为74.39%,明显高于血培养的14.63%,差异...     

改良喷射雾化装置在慢性阻塞性肺气肿雾化吸入病人中的应用

目的:探讨改良喷射雾化装置在慢性阻塞性肺气肿雾化吸入病人中的应用效果。方法:2020年8月—2021年8月选取慢性阻塞性肺气肿行雾化吸入治疗的病人96例,采用随机数字表法将病人分为观察组与对照组各48例。对照组应用传统喷射雾化器行雾化治疗,观察组应用改良喷射雾化装置行雾化治疗,比较两组病人干预前后动脉血气指标、治疗第3天痰液黏稠度情况、每日排痰次数、并发症发生率、住院时间及满意度。结果:干预后观察组病人血氧分压(PaO₂)、第1秒用力呼气容积(FEV₁)、最大呼气流量(PEF)明显高于对照组(P<0.05),二氧化碳分压(PaCO₂)明显低于对照组(P<0.05)。干预后观察组病人Ⅲ度痰液比例、并发症发生率明显低于对照组(P<0.05),每日排痰次数明显少于对照组(P<0.05),住院时间明显短于对照组(P<0.05),满意率明显高于对照组(P<0.05)。结论:改良喷射雾化装置能有效稀释慢性阻塞性肺气肿雾化吸入病人痰液浓度,改善病人血气指标及肺功能,降低病人并发症发生率,提升病人治疗...     

基于德尔菲法的哺乳期乳腺炎病人出院准备度评估量表的构建

目的:应用德尔菲法研制哺乳期乳腺炎病人出院准备度评估量表,为哺乳期乳腺炎病人出院准备度的评估提供工具。方法:通过文献回顾、半结构式访谈及研究组讨论初步制订哺乳期乳腺炎病人出院准备度评估量表,应用德尔菲法选择15名疾病相关医疗、护理及量表编制、心理学领域的专家进行2轮函询。结果:2轮专家函询问卷回收率分别为83.33%及100.00%,权威系数分别为0.93及0.93,肯德尔和谐系数(W值)分别为0.128及0.228(均P<0.05)。最终形成4个维度(生理状况、心理状况、宣教质量及社会支持)共20个条目的哺乳期乳腺炎病人出院准备度评估量表。结论:基于德尔菲法构建的哺乳期乳腺炎病人出院准备度评估量表具有较高的科学性和可靠性,可为该类病人的出院准备度评估及康复护理提供参考。     

怀菊花化学成分的研究

目的 研究菊科植物怀菊花 Chrysanthemum morifolium Ramat. ‘huaiju’ cv. nov. 的化学成分。方法 采用各种色谱技术进行分离,根据波谱数据鉴定结构。结果 从怀菊花中分离得到10个黄酮类化合物,分别鉴定为木犀草素 (1)、芹菜素 (2)、金合欢素 (3)、香叶木素 (4)、香叶木素 7-O-β-D-葡萄糖苷 (5)、木犀草素 7-O-β-D-葡萄糖苷 (6)、金合欢素 7-O-β-D-葡萄糖苷 (7)、金合欢素 7-O-(6’’-O-乙酰基)-β-D-葡萄糖苷 (8)、蒙花苷 (9)、芹菜素 7-O-β-D-葡萄糖苷 (10)。结论 本研究首次对怀菊花化学成分进行系统研究,化合物1~10均为首次从该植物中分离得到。     

棘白菌素对真菌生物被膜作用的文献计量分析

目的分析棘白菌素类药物对真菌生物被膜作用的相关文献,了解其研究现状。方法在中外文献数据库(Em Base,Pub Med,SCI,CNKI及Sino Med)检索2001年至2013年相关文献,用End Note X7软件进行分类整理,对纳入文献的发表年份、文献类型、国家、第一作者、期刊、被引频次及研究内容等进行计量分析。结果共纳入外文148篇,中文5篇,以论著为主。文献最高被引157次,研究最多的菌株是白色念珠菌,共62篇;棘白菌素类单用对念珠菌生物被膜研究最多,且以卡泊芬净对白色念珠菌研究最为深入,共24篇;棘白菌素联合用药研究共14篇,临床研究相对较少(3篇)。结论棘白菌素单用对真菌生物被膜有很好的抑制作用,尚未发现理想的联合治疗方案,未来研究重点是生物被膜相关体内感染模型和研究从基础向临床转化。     

经皮冠状动脉介入治疗术中无复流现象防治研究进展

随着经皮冠状动脉介入治疗方法在临床上得到广泛应用,急性ST段抬高性心肌梗死直接经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的比例越来越高。但急诊PCI过程中,常常发生无复流现象,严重影响患者的预后。本文就无复流的可能机制和处理作一简要介绍。     

Chinese 1基因型弓形虫棒状体蛋白 ROP16的基因克隆表达及生物信息学分析

目的：构建弓形虫Chinese 1基因型TgCtWh3（以后均简称Wh3）株棒状体蛋白（ rhoptry protein ,ROPs）16的原核和真核重组表达质粒及其3D结构。方法参照ROP16序列分别设计引物,采用PCR从弓形虫Chinese 1基因型Wh3株基因组DNA中扩增出编码ROP16的基因片段,克隆至pMD18-T载体;经PCR及测序分析鉴定;阳性克隆的质粒分别亚克隆至原核表达载体pET-28a和真核表达载体pEGFP-C2,分别转化大肠杆菌BL21和DH5α,PCR和酶切鉴定转化菌落插入的序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析融合蛋白的表达;将构建的真核重组质粒经脂质体转染293T细胞,观察其在细胞中表达;采用生物信息学方法分析构建了蛋白的3 D结构。结果各组均PCR扩增出约2．1 kb ROP16基因的特异片段,序列检测结果均正确;分别亚克隆到原核表达载体pET-28a和真核表达载体pEGFP-C2中,成功构建了Chinese 1基因型弓形虫棒状体蛋白ROP16的原核表达质粒和真核表达质粒;原核表达质粒在大肠杆菌中表达了ROP16的融合蛋白;真核表达质粒在293T细胞中成功表达,成功构建出ROP16基因的3D结构图。结论以pET-28a和pEGFP-C2为载体,分别成功构建并表达了ROP16的原核和真核重组质粒,并构建出其3D结构图。     

纳洛酮治疗小鼠柯萨奇病毒诱发病毒性心肌炎的实验研究

目的:研究纳洛酮治疗病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠的作用机制.方法:120只BALB/c 小鼠以柯萨奇病毒(coxsackievirus B3,CVB_3)诱导制作VMC模型,在隔离实验室饲养.分别在接种病毒后72 h各组给药至21 d,CVB_3组i.p.2500 mg/kg生理盐水(n=60);纳络酮组i.p.2 mg/kg(n=60);另取40只BALB/c,小鼠作为对照组,同法接种100μL不含病毒的Eagle液,72 h后i.p.给予2500 mg/kg生理盐水.在病毒感染第5、7、14、21、28天,各组随机取8只小鼠,处死,留取心肌组织.观察小鼠死亡率与心肌组织病理改变,并采用RT-PCR和Western blot技术检测CVB_3感染后各时间点小鼠心肌组织中K-阿片受体(K-opioid receptor,kOR)mRNA和蛋白质的表达水平.结果:CVB_3感染后第5、7、14、21天,CVB_3组KOR mRNA表达量显著高于对照组(P<0.01);kOR蛋白质的表达量在CVB_3感染后第7、14、21天明显高于对照组(P<0.05).CVB_3感染后第7、14、21天纳洛酮组小鼠死亡率和病理组织改变低于CVB_3组,kCOR mRNA和蛋白质的表达量低于CVB_3组(P<0.05).结论:CVB_3诱导性VMC小鼠心肌细胞的KOR基因和蛋白质水平明显上调,纳洛酮对VMC小鼠保护作用与抑制KOR基因和蛋白质水平有关.     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中布洛芬对映体的浓度

目的建立简便、快速、灵敏的LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中手性药物布洛芬浓度的分析方法,进行系统的方法学验证,并用于布洛芬在Beagle犬体内的药代动力学研究。方法以酮洛芬为内标,血浆样品经正己烷(含5%异丙醇)液萃取后,以甲醇:1 mmol·L-1甲酸铵(含0.2%甲酸,10%甲醇)(82∶18,V/V)为流动相,采用Lux 5u Cellulose-3(250 mm·4.6 mm,5μm)柱分离,流速为0.8 m L·min-1。通过电喷雾电离源以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 205.2/161.2(布洛芬)和m/z 253.1/209.2(内标,酮洛芬)。方法验证包括基质效应、提取回收率、线性、定量下限、批内与批间精密度、稳定性、稀释效应等。结果犬血浆中左/右旋布洛芬的线性范围为0.2~50 mg·L-1,最低定量限为0.2 mg·L-1,批内、批间精密度(RSD)介于1.01%~13.1%之间。Beagle犬单次口服给予右旋布洛芬后的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC(0-t)分别为:(82.98±14.83)mg·L-1、(3.217±0.7298)h、(362.0±58.67)h·mg·L-1。单次口服给予消旋布洛芬后,其左/右旋布洛芬的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC(0-t)分别为:(70.62±14.81)/(74.48±20.08)mg·L-1、(1.520±0.9286)/(5.432±1.234)h、(177.8±34.18)/(649.6±200.2)h·mg·L-1。结论该方法简便、快速、灵敏度高、重复性好,能够同时测量血浆中左/右旋布洛芬的药物浓度,可用于布洛芬在Beagle犬体内的药代动力学研究。     

MicroRNA在肿瘤发生发展、诊断、耐药性方面的研究进展

microRNA是近几年发现的一段长度约为19²4nt非编码性的内源性小分子RNA,调控细胞的增殖、生长、凋亡等过程,尤其在肿瘤方面,起着类似癌基因和抑癌基因的作用。在肿瘤早期可以测得特异性的microRNA,有望成为新的诊断标准。此外,microRNA影响着肿瘤多药耐药性,可成为肿瘤药物的新靶点。