同型半胱氨酸诱导大鼠主动脉平滑肌细胞依赖正常T细胞激活和分泌的因子、趋化因子受体1的表达和机制探讨

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)是否通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路诱导大鼠主动脉平滑肌细胞表达依赖正常T细胞激活和分泌的因子(RANTES)和其趋化因子受体1(CCR1)及辛伐他汀的治疗作用。方法将26只健康8周龄SD雄性大鼠随机分为正常对照组、高蛋氨酸饮食组和辛伐他汀治疗组。正常对照组给予普通饲料喂养;高蛋氨酸饮食组以普通饲料中添加质量分数2%的蛋氨酸喂养;辛伐他汀治疗组以高蛋氨酸饮食组饲料喂养4周后,每天以5 mg.kg-1的辛伐他汀灌胃,并继续给予高蛋氨酸饮食组饲料。12周后采用高效液相色谱法检测血浆Hcy浓度,苏木素-伊红(HE)和油红"O"染色观察胸主动脉形态学变化,采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠胸主动脉平滑肌细胞中RANTES、CCR1蛋白和mRNA的表达;采用Western blotting检测大鼠胸主脉平滑肌细胞中p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白的表达。结果蛋氨酸饮食组血浆Hcy浓度(80.79±23.86)mmol.L-1高于正常对照组(9.47±4.55)mmol.L-1和辛伐他汀治疗组(53.94±12.24)mmol.L-1(P<0.01)。HE染色显示高蛋氨酸饮食组局部内皮细胞坏死脱落,内膜下可见泡沫细胞。油红"O"染色显示高蛋氨酸饮食组胸主动脉内膜下局部呈红色。高蛋氨酸饮食组RANTES蛋白表达的平均灰度值(100.54±15.31)低于正常对照组(114.25±10.73)(P<0.01)和辛伐他汀治疗组(113.12±10.86)(P<0.05)。高蛋氨酸饮食组CCR1蛋白表达的平均灰度值(120.12±7.71)低于正常对照组(124.31±9.44)(P<0.01)和辛伐他汀治疗组(123.62±8.32)(P<0.05)。高蛋氨酸饮食组大鼠胸主动脉平滑肌细胞中RANTES和CCR1 mRNA的表达分别为0.93±0.02、1.77±0.40,均高于其在正常对照组的表达(0.45±0.00、1.02±0.04)(P<0.01),并高于在辛伐他汀治疗组中的表达(0.69±0.01、1.22±0.53)(P<0.05)。p38 MAPK在各组大鼠动脉平滑肌细胞均有表达但差别无统计学意义(P>0.05);p-p38 MAPK在高蛋氨酸饮食组的平均灰度值为95.74±0.02,低于正常对照组(160.60±3.54)(P<0.01)和辛伐他汀治疗组(155.94±0.07)(P<0.05)。结论高蛋氨酸饮食能引起大鼠高同型半胱氨酸血症(HHcy),促进大鼠主动脉平滑肌细胞中RANTES及CCR1的表达,诱导动脉粥样硬化(AS)的形成,p38 MAPK通路可能参与了此过程。辛伐他汀可以抑制这一过程,减缓AS的发生发展。     

叶酸和辛伐他汀对高同型半胱氨酸血症引起的大鼠动脉粥样硬化疗效对比

目的探讨叶酸及辛伐他汀对高同型半胱氨酸血症(HHcy)引起的大鼠动脉粥样硬化(AS)治疗效果的差异。方法将36只健康8周龄SD雄性大鼠随机分为健康对照组、高蛋氨酸饮食组、叶酸治疗组和辛伐他汀治疗组。12周后,采用高效液相色谱法检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度;采用酶法检测血脂浓度;通过光镜和电镜观察胸主动脉形态学变化;采用免疫组织化学方法检测胸主动脉平滑肌细胞中依赖正常T细胞激活表达和分泌的因子(RANTES)、趋化因子受体-1(CCR-1)蛋白的表达;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测胸主动脉平滑肌细胞RANTES、CCR1 mRNA的表达。结果高蛋氨酸饮食组血浆Hcy浓度明显高于其余3组;叶酸治疗组血浆Hcy浓度明显低于辛伐他汀治疗组(P<0.05)。各组大鼠血浆总胆固醇与甘油三酯浓度差异无统计学意义(P>0.05)。光镜和电镜下可见健康对照组大鼠胸主动脉壁基本结构正常,高蛋氨酸饮食组大鼠胸主动脉呈AS早期改变,治疗组大鼠动脉病变较轻。免疫组织化学结果显示,RANTES和CCR-1蛋白在高蛋氨酸饮食组主动脉平滑肌细胞中表达的平均灰度值显著低于其余3组。且在叶酸治疗组表达的平均灰度显著低于辛伐他汀治疗组(P<0.05)。RT-PCR结果亦表明RANTES和CCR-1 mRNA均在高蛋氨酸饮食组主动脉平滑肌细胞中的表达最高。且在叶酸治疗组的表达均显著高于辛伐他汀治疗组(P<0.05)。结论高蛋氨酸饮食能引起大鼠HHcy形成,促进主动脉平滑肌细胞中RANTES及受体CCR-1的表达,进而诱导AS发生,此过程与血脂无关。辛伐他汀及叶酸均可降低血浆Hcy浓度、抑制动脉壁平滑肌细胞中RANTES及CCR-1的表达,减轻Hcy对动脉壁的损伤,防止AS的发生,但以叶酸降低血浆Hcy的作用更强,辛伐他汀对RANTES和CCR-1表达的抑制作用更明显。     

抗肾小球基底膜病患者血清自身抗体的异质性及其临床病例的相关性分析

目曲:研究抗肾小球基底膜(glomemlar basement membrane,GBM)病患者血清自身抗体的异质性及其临床病理的相关性.方珐:选取北京大学第一医院肾内科1991年1月至2009年5月收治的有完整临床及肾活检资料的108例抗GBM病患者为研究对象.收集就诊时的血清或血浆置换液用于孵育正常人肾组织冰冻切片行间接免疫荧光检查.隐匿性抗原表位的暴露采用6 mol/L尿素对组织切片进行预处理.天然抗原表位的检测则以未经处理的组织切片作为底物.抗体滴度的检测由1:2至1:512.根据间接免疫荧光的结果决定抗体是否识别不同抗原表位,并进一步分析识别不同抗原表位与临床表现的相关性.结果:108例患者血清或血浆置换液均识别隐匿性抗原表位(尿素处理后肾组织),问接荧光显示抗体沿GBM呈线条样沉积,其中56/108例(A组)也识别天然暴露的抗原表位(非处理肾组织),其余52/108例(B组)则不识别天然暴露的抗原表位.虽然A组血清可识别天然露的抗原表位,但是该组血清识别隐匿性表位的平均滴度明显高于B组(P＜0.01);A组患者合并抗中性粒细雕胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)的比例则明显低于B组(P＜0.01).两组患者就诊时的其他临床指标(包括血肌酐水平)和肾病理指标差异则无统计学意义.结论:所有患者血清抗GBM抗体识别GBM上隐匿的抗原表位,但近一半患者的抗体同时识别天然暴露的抗原表位.识别天然暴露抗原表位者其血清识别隐匿性抗原的滴度更高,血清ANCA阳性的几率显著减少.     

甲泼尼龙对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织中p53、caspase-3 mRNA表达的影响

目的:研究甲泼尼龙干预对缺血再灌注损伤(IRI)心肌组织中p53、caspase-3 mBNA表达的影响.方法:成年SD大鼠70只,随机分为3组.药物组(n=30)制备心肌IRI模型,然后右股静脉注入甲泼尼龙30 mg·kg-1.IRI组(n=30)和假手术组(n=10)于右股静脉注入灭菌生理盐水0.75 mg·kg-1.IRI组和药物组分别于缺血0.5h、缺血再灌注(IR)2、4、8、12和24 h时各取5只大鼠处死,假手术组于缺血再灌注12 h时处死动物,取出心脏,采用TUNEL法检测凋亡细胞.原位杂交法检测p53、caspase-3 mRNA.结果:IRI组与药物组p53 mRNA和caspase-3mRNA均于心肌缺血0.5 h后即出现表达,p53 mRNA在IR 8 h达高峰,而caspase-3 mRNA的峰值出现在IR 12 h,凋亡细胞计数在IR 12 h达高峰(P<0.05).与IRI组同时相点比较,药物组p53、caspase-3 mRNA表达及凋亡细胞百分比均降低(P<0.05).结论:p53和caspase-3在缺血诱导的心肌细胞凋亡中发挥重要作用;甲泼尼龙可抑制细、胞凋亡,对心肌IRI具有一定的保护作用.     

健康教育对慢性阻塞性肺疾病疗效影响的Meta分析

目的:从循证护理角度探讨健康教育对慢性阻塞性肺疾病的疗效影响?方法:检索主要医学数据库,按一定标准筛选文献并进行质量评价,采用Review Manager软件从遵医行为?圣·乔治呼级系统问卷(SGRQ)评分?肺功能检查?知识掌握?住院天数?住院次数?就诊次数?6分钟步行测试等8个方面进行Meta分析?结果:在遵医行为?SGRQ评分?肺功能检查(FEV1/FVC%)?住院天数方面健康教育组与对照组之间存在显著性差异,而在肺功能检查(FEV1?FEV1%)?知识掌握?住院次数?就诊次数?6分钟步行测试方面两组     

疏肝利胆和胃汤治疗胆汁返流性胃炎及远期疗效观察

目的:观察疏肝利胆和胃汤治疗胆汁返流性胃炎的临床疗效。方法:将96例胆汁返流性胃炎患者随机分为治疗组48例和对照组(西沙比利组)48例,各治疗2疗程,停药1周观察疗效。结果:治疗组总效率97.9%,对照组总有效率85.4%,远期疗效观察:治疗组复发率14.81%,对照组复发率61.1%,两组总有效率及远期疗效比较,均存在显著性差异(P<0.05)。结论:疏肝利胆和胃汤治疗胆汁返流性胃炎具有较好的临床疗效,且远期效果亦较满意。     

牛磺胆酸作用下副溶血弧菌全基因组比较转录谱的表达分析

目的 利用DNA芯片技术研究副溶血弧菌对牛磺胆酸刺激反应的全局性基因转录变化概况,找出其中的表达调控变化规律,为副溶血弧菌基因转录调控网络的构建提供实验和理论依据.方法 副溶血弧菌分别在正常和添加了50 mmol/L 牛磺胆酸的培养基中孵育至对数中期,收集菌体,提取RNA,利用全基因组DNA芯片分析比较两者基因转录变化.并应用聚类分析比较其中的变化规律.结果 比较转录谱分析证实一共有255个基因的转录表达发生显著性变化,和对照组相比,上调的基因明显占主导优势.而在这些变化的基因中,关于蛋白合成和硫代谢以及谷氨酸合成相关的基因均呈现明显的转录上调变化.结论 我们利用DNA芯片技术描绘出了副溶血弧菌在添加牛磺胆酸后全部基因转录水平变化的概图,并发现了蛋白合成,硫代谢和谷氨酸合成相关的基因的变化规律,这给我们下一步的转录调控网络研究提供了良好的靶标.     

细胞色素P450CYP2D6＊10B缺陷等位基因与利培酮治疗效应的关系

目的探讨CYP2D6＋10B缺陷等位基因与利培酮治疗效应的关系。方法采用等位基因的特异性扩增法，根据是否含有突变型CYP2D6＋10B缺陷等位基因将70例精神分裂症患者分为野生型等位基因的纯合型（w／w）组（16例），突变型等位基因的纯合型（m／m）组（16例）以及野生型和突变型等位基因的杂合型（m／w）组（38例），观察3组患者利培酮4—6mg／d治疗6周后疗效与不良反应。采用阳性和阴性症状量表（PANSS）评价疗效，副反应量表（TESS）和锥体外系不良反应量表（RSESE）评定药物不良反应。PANSS减分率≥30％为有效。结果治疗6周后，有效者58例。有效组W等位基因频率（0．43）明显低于无效组（0．83），有效组的in等位频率（0．57）明显高于无效组（0．17）。自第4周起，m／w，m／m型PANSS减分值明显多于w／w型。3种基因型患者组间不良反应差异无统计学意义。结论利培酮治疗携带CYP2D6＊10B缺陷等位基因患者的疗效优于治疗野生型等位基因患者的疗效。CYP2D6t10B缺陷等位基因与利培酮不良反应无关联。     

199名护理本科生专业选择调查分析

护理专业学生中普遍存在的专业思想不稳定现象, 一直是护理教育者关注的问题,专业思想教育已成为护理教育的一项重要问题.为掌握我校护理本科生的专业认知现状,评估专业教育结果,为进一步树立学生正确的专业思想提供依据.于2008年1月在某大学进行了学生价值观念与社会行为问卷调查.现将专业选择情况报告如下.     

对实验动物行创面细菌定量检测的经验体会

感染是影响创伤修复的重要因素,是现代战争创伤救治中迫切需要解决的重大问题之一[1] 。感染的发生发展取决于两个方面,一是机体防御功能;二是致病菌的毒力、侵袭力和细菌量。创面组织细菌定量检测可准确地反映创面组织内的细菌含量,是判断不同抗菌药物和不同防治方法对创伤感染防治效果的重要而基本的方法,对于早期诊断和预防侵袭性感染也是有效而实用的[2 ] 。通过细菌定量检测,可为创伤机体的清创时机、方法及抗生素的应用提供科学的依据。然而在细菌定量检测过程中,每一步骤均需要有高度的主观判断能力,这与个人的技术经验及细菌学基础…