乙型肝炎的药物治疗

乙型病毒性肝炎(hepatitisbvirus,HBV),简称乙肝,在甲、乙、丙、丁、戊型肝炎中最为严重的一种.他一直是我国“八五”、“九五”、“十五”重点医疗科研攻关项目.众所周知,乙肝危害已成为一种严重的世界性疾病,全球大约有20多亿人感染过HBV,其中约有4亿人为慢性感染.WHO已将HBV感染列为世界第九死亡原因,每年全世界死亡人数约30万.我国是HBV感染高发区,有50-70%的人感染过HBV,约有1.7亿人(占全国人口的十分之一还要多)是HBsAg携带者.我国现患乙肝者约3000万,其中60%以上为慢性乙肝患者.可见乙肝患病者之多,对人类危害之大.为了让人们了解乙肝,本文从HBV的感染,发病、转归(慢性乙肝,肝硬化、肝癌)和药物治疗进行系统的介绍和讨论.     

罗布麻叶提取物对两肾一夹高糖高脂饮食大鼠脂肪性肝病的保护作用

目的: 探讨罗布麻叶提取物对两肾一夹加高糖高脂饮食大鼠脂肪性肝病的影响.方法: 采用两肾一夹术和喂高糖高脂饲料12wk复制代谢综合征大鼠脂肪性肝病模型, 第5周测定大鼠收缩压, 取收缩压达160 mmHg以上的大鼠42只, 随机分为罗布麻叶提取物高、中、低剂量组[200、100、50 mg/(kg·d), n= 8]、卡托普利组[30 mg/(kg·d), n = 8]和模型组[0.5%羧甲基纤维素5 mg/(kg·d), n = 10], 另设假手术组[0.5%羧甲基纤维素5 mg/(kg·d), n= 10], 按上述设定剂量每天9:00-10:00灌胃一次连续8 wk. 第13周, 称体质量和肝湿质量, 测收缩压、血清胰岛素和FFA水平、肝功能、肝组织氧化和抗氧化指标, HE染色观察肝组织形态学改变.结果:模型组大鼠血清胰岛素、FFA、GOT和GPT水平明显升高,肝组织中T-SOD和GSHPx活力和ISI明显下降,脂质过氧化物MDA含量显著增加, HE染色示肝小叶中大部分肝细胞肿胀, 胞质中出现大小不等的脂滴空泡, 以大泡性脂肪滴为主, 核居边, 细胞界限不清,肝窦狭窄, 且存在小叶内及门管区炎症细胞浸润. 与模型组比较, 罗布麻叶提取物高中剂量能明显降低代谢综合征大鼠血清胰岛素、FFA、GOT和GPT水平(41.31±14.46, 48.03±10.19 vs 62.56±19.48; 468.52±205.36, 584.14±185.89 vs 830.51±355.17; 192.63±67.41,325.18±96.47 vs 466.16±95.63; 49.06±21.52, 108.32±38.63 vs 178.37±66.55, P<0.05或0.01), 提高肝组织中T-SOD和GSH-Px活力以及ISI, 减少脂质过氧化物MDA含量(83.80±7.10, 70.86±11.68 vs 47.33±12.53; 681.85±173.99, 481.27±70.05 vs 250.50±102.97;-5.19±0.44, -5.45±0.31 vs -5.79±0.42; 17.36±3.45, 25.69±5.46 vs 37.69±4.13, P<0.05或0.01), 改善肝细胞的脂质沉积和小叶内及汇管区炎症细胞浸润.结论: 罗布麻叶提取物具有抗氧化应激和改善代谢综合征大鼠脂肪性肝病的作用.     

芹灵冲剂在2215细胞培养内对HBsAg,HBeAg的抑制作用

目的在乙型肝炎病毒(HBV)基因转染的人肝癌细胞系(HepG2)的2215细胞培养中,观察芹灵冲剂(Qinling Chongji,QL)对细胞的毒性和对乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的抑制效果.方法①2215细胞培养:将配制成细胞(1×105个/mL)接种细胞培养板,96孔板每孔0.2 mL,24孔板每孔1 mL,37℃50 mL/L CO2培养24 h,细胞长成单层后进行实验.②药物对细胞毒性试验:QL 12 g/L用培养液2倍稀释成6个浓度:8,4,2,1,0.5 g/L,加入96孔细胞培养板,每浓度4孔,每4 d换同浓度药液,培养12 d,观察药物对细胞的毒性,设无药物细胞对照.③药物对HBsAg,HBeAg抑制试验:在无毒浓度以下2倍稀释试验药液,3个稀释度分别为4,2,1,0.5 g/L,每浓度3孔,37℃50mL/LCO2培养,每4 d收取培养液,换原浓度药液培养,将d8,d12收集的培养液同时测定HBsAg和HBeAg.④HBsAg和HBeAg测定:用固相放射免疫测定盒测定,方法见说明书,用γ-计数器测定每孔药液cpm值.结果 QL4 g/L加入细胞培养8 d和12 d,三批实验对细胞的半数中毒浓度(TC50)平均为8.7 g/L±0.3 g/L,最大无毒浓度(TC0)为4 g/L在最大无毒浓度(4 g/L)时对细胞分泌HBeAg平均抑制率(8 d)为51.1%±2%和(12 d)为65.0%±1.9%,半数有效剂量(IC50)平均(8 d)为3.1 g/L±0.8 g/L和(12 d)为9.1 g/L±0.9 g/L,与细胞对照比较有显著和非常显著性意义,P＜0.05和P＜0.01;对细胞分泌HBsAg的平均抑制率(8 d)为55.0%±3.9%和(12 d)为61.4%±0.98%,半数有效剂量(IC50)平均(8 d)为3.0 g/L±0.8 g/L和(12 d)为1.7 g/L±0.2 g/L,与细胞对照比较,P值分别为＜0.05和＜0.01,差别有显著性.结论实验表明QL在2215细胞中培养12 d,最大无毒浓度可明显抑制HBeAg和HBsAg的分泌.     

驻喀喇昆仑山和西藏阿里高原部队慢性高原病流行病学调查

目的调查驻喀喇昆仑山和西藏阿里高原部队慢性高原病(CMS)患病情况。方法采用国际CMS诊断记分系统进行CMS流行病学调查。结果驻喀喇昆仑山海拔4 300,5 100和5 380 m 1年的某部队CMS的患病率依次为37.0%,67.9%和92.9%;驻西藏阿里高原海拔4 300 m某部军官和士官的CMS患病率为38.3%,义务兵为20.7%,13名藏族官兵未发现CMS患者。总患病人数中,轻度CMS占85.5%,中度占13.0%,重度占1.5%。结论随海拔升高,CMS患病率增高,军官和士官较义务兵患病率高。国际CMS诊断标准是否适用于长期在高原执行特殊任务的移居人群值得商榷。     

聚合酶链反应技术检测后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA表达

目的:聚合酶链反应方法检测后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA的表达。方法:实验于2006-06/2007-01在解放军总医院老年医学研究所完成。1日龄北京雏鸭6只经腿静脉注射上海麻鸭DHBV阳性血清(中国医学科学院提供)0.2mL/只,感染7d后处死动物取血分离血清并取肝组织,同时取同日龄正常鸭6只肝组织作为对照。聚合酶链反应技术检测肝脏、血清中鸭乙型肝炎病毒DNA及共价闭环状DNA的表达。结果:①血清斑点杂交显示模型制备成功,平均病毒吸光度值为0.62±0.12。②琼脂糖凝胶电泳显示,模型肝脏、血清中DHBVDNA均高表达,而共价闭环状DNA仅在模型肝脏表达,正常鸭DNA与共价闭环状DNA均不表达。结论:后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA高表达,可作为临床乙肝药物筛选模型。     

高效液相色谱法测定水芹中金丝桃苷的含量

目的测定水芹中金丝桃苷的含量。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为DiamonsilC18柱(150mm×4.6mm,5μm);乙腈甲醇(10∶1)0.4%磷酸梯度洗脱为流动相;检测波长360nm;流速1.0ml/min。结果金丝桃苷在0.0419～0.2094μg范围内呈良好线性关系,r=0.9993。平均回收率为99.2%,RSD为1.35%。结论本法简便、准确、重现性好,为水芹药材和提取物提供质量控制依据。     

乙型肝炎病毒模型的方法学研究

目的在现有树鼩和雏鸭动物模型的基础上,对有关试验内容和方法加以改进,为研发抗乙肝病毒（HBV）新药提供比较理想的试验模型.方法采用乙肝病毒（HBV）分别感染树鼩和雏鸭造成肝细胞炎症,以血液生化、肝功能、血液及肝脏HBV-DNA水平、肝组织学的病理改变为观察指标,综合判断造模的程度.结果乙肝病毒（HBV）感染的树鼩和雏鸭动物模型,其检测指标灵敏,肝组织学改变明显.结论改进后的乙肝实验动物模型稳定,重复性好,适用于防治乙肝药物的应用研究.     

水芹总酚酸对鸭乙肝病毒DNA的抑制作用

目的观察水芹总酚酸对鸭乙肝病毒（DHBV）DNA的抑制作用,验证其体内抗乙肝病毒作用。方法取造模成功雏鸭随机分成模型组、拉米夫定（50mg·kg^-1·d^-1）阳性药对照组、水芹总酚酸（125、250、500mg·kg^-1·d^-1）3个剂量组。自感染第7天灌胃给药,2次/d,共10d。分别留取感染第7天（0d）、给药5d、给药10d及停药3d的血清,斑点杂交、放射自显影测定血清中DHBV-DNA的OD值进行自身和组间比较;另取肝组织适量,10%甲醛固定,常规石蜡切片、HE染色,镜下观察肝组织病理变化。结果水芹总酚酸用药组在5d、10d和停药3d均对DHBV-DNA具有明显的抑制作用。病理学观察用药组鸭肝小叶结构基本完整,肝细胞变性改变明显较轻,点、灶状坏死散在分布;而模型组鸭肝实质细胞明显嗜酸性变、水肿、脂肪变等改变和弥漫分布的点、灶性坏死,表现为小叶周边肝细胞坏死广泛,界板参差不齐,浸润的炎细胞向小叶内延伸,两组肝组织比较差异显著。结论水芹总酚酸对乙肝病毒DNA具有显著的抑制作用,且具有较强的肝细胞保护作用。     

金丝桃苷对大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤的影响

目的 探讨金丝桃苷（Hyperin,Hyp）对大鼠局灶性脑缺血再灌注氧化应激损伤的影响。方法 （1）模型制备：采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型,缺血2h再灌注。（2）抗氧化实验：40只大鼠随机分成假手术组、模型组、Hyp低剂量组和高剂量组,每组10只。给药组术前连续ig5d,于末次给药30min后行手术。造模24h后检测大鼠脑组织的超氧化物岐化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。（3）病理组织学实验：另取40只大鼠分组和治疗同上,造模24h后,进行神经行为学评分,光镜下观察脑梗死部位病理学改变。结果与模型组比较,神经行为学评分明显降低（P〈0．01）;Hyp—L、Hyp—S剂量组SOD活性均明显提高（P〈0．01）,且两组的MDA含量也显著降低（P〈0．05）;镜下观察给药组多数神经元结构较完整,形态相对正常,细胞及间质水肿减轻。结论 Hyp对大鼠局灶性脑缺血再灌注氧化应激损伤有明显保护作用。     

芹龙颗粒抗急性肝损伤的实验研究

目的观察芹龙颗粒（QL）对小鼠急性肝损伤的防治作用。方法将60只小鼠随机分为联苯双酯阳性药物组,正常动物组,CCl4模型对照组和QL大、中、小（10、5、2.5.gkg^-1）3个剂量组。药物组动物先分别灌胃给药3d,第4d,按体重腹腔注射0.5%浓度CCl4橄榄油溶液（10ml.kg^-1）,复制急性肝损伤动物模型。24h后取血测定血清中ALT,AST含量;并取肝脏,称重,10%甲醛固定,HE染色,于光镜下观察肝脏组织学变化。结果模型组小鼠肝功能明显异常,肝组织变性、坏死严重;QL组能明显改善CCl4中毒小鼠肝功能,其降酶率（ALT）以大、中、小剂量分别为54.3%、49.1%、41.2%。肝组织学改变较轻,体重减少较模型组轻。结论QL对CCl4致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其改善肝功能具有良好的量效关系。