羧基荧光素琥珀酰亚胺酯标记肿瘤细胞及其在细胞毒检测中的价值

目的探讨化学染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯（CFDA-SE）标记肿瘤细胞的最佳条件及其在细胞毒检测中的价值。方法用不同浓度的CFDA-SE标记K562（人红白血病细胞）、YAC-1（小鼠淋巴瘤细胞）、A375（人乳腺癌细胞）、MCF-7（人黑色素瘤细胞）不同肿瘤细胞系，并检测其0—24h的荧光强度，观察荧光强度变化的时间动力学，选择CFDA-SE标记细胞的最佳浓度；CFDA-SE标记细胞后孵育时间为1—6h，再用DNA染料碘化丙啶（PI）标记，流式细胞仪分析CFDA-SE和PI双标记细胞，并计算细胞死亡率，研究CFDA-SE对细胞的毒性。CFDA-SE标记时间分别为5、6、7、8、10、15min，测定标记不同时间的荧光强度和细胞的死亡率，选择最佳标记时间；用CFSE在最佳条件下标记靶细胞进行细胞毒检测实验。结果对于不同肿瘤细胞系，CFDA-SE标记的最佳浓度不同；CFDA-SE对细胞没有毒性，死亡率低于5％；最佳标记时间为8min。人外周血单个核细胞和BALB／c鼠脾淋巴细胞对肿瘤细胞K562、YAC-1均表现出杀伤活性，杀伤百分率随效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为50：1—25：1，共孵育时间为2—4h。结论CFDA-SE具有标记细胞稳定，能用于细胞培养时间较长的研究，不影响细胞功能，适用于流式细胞仪检测细胞毒实验的优点，是一种很好的标记细胞的荧光素染料。     

ＷＡＦ１基因检查在胃癌诊断中的意义

目的 探讨ＷＡＦ１基因与胃癌的关系。方法 对４１例胃癌组织和２６例癌旁非病变粘膜分别作冰冻切片并提取组织总ＲＮＡ,应用细胞原 杂交技术及ＲＴ－ＰＣＲ结合ＳＳＣＰ方法,联合检测ＷＡＦ１与p５３基因异常及表达情况。结果 胃癌组织ＷＡＦ１基因缺失率和mＲＮＡ不表达率分别为３４.４％和４０.６％。明显高于癌旁非病变粘膜（Ｐ＜０.０５）;胃癌组织p53基因突变率和mＲＮＡ过表达率也明显高于癌旁非病变粘膜（Ｐ＜０.０５）。WAF1基因缺失和mＲＮＡ不表达与胃癌的分化程度和浸润深度有关。结论 胃癌的发生和发展与p53基因突变以及ＷＡＦ１mＲＮＡ不表达有关,胃癌组织中p５３失活与ＷＡＦ１mＲＮＡ不表达关系密切。检测癌组织中ＷＡＦ１变化可为胃癌的诊断、病理分期、预后评估和基因治疗提供可靠依据。     

老龄男性人群外周血T淋巴细胞丝裂原反应性和血浆睾酮、皮质醇含量的相关分析

为揭示老龄人群细胞免疫功能与激素含量变化的内在关系,以一汽集团离退休及在岗５０ 岁以上男性职工为研究对象。应用生物测定法检测外周血 Ｔ 淋巴细胞丝裂原反应性和 Ｉ Ｌ２ 活性,放射免疫技术测定血浆睾酮、皮质醇的含量。结果表明：１ ．外周血 Ｔ 淋巴细胞丝裂原反应性随增龄而下降,与年龄呈明显的负相关关系（ｒ ＝－ ０ ．５９４ , Ｐ＜ ０ ．０００１） ; Ｉ Ｌ２ 活性也随增龄而下降（ｒ ＝ － ０ ．５３２ , Ｐ＜ ０ ．００１） 。２ ．血浆睾酮含量随增龄下降,与年龄呈明显负相关（ｒ ＝ － ０ ．４５ , Ｐ＜ ０ ．０００１） ;而血浆皮质醇含量随增龄升高,与年龄呈明显正相关关系（ｒ ＝ ０ ．３２ , Ｐ＜０ ．０００１） 。３ ． Ｔ 淋巴细胞丝裂原反应性与血浆睾酮和皮质醇含量均有相关关系（ｒ ＝ ０ ．３６ , Ｐ＜ ０ ．０００１ ;ｒ ＝ － ０ ．５０８ , Ｐ＜ ０ ．０００１） 。提示：老龄人群 Ｔ 细胞功能的增龄变化与体内睾酮和皮质酮含量的变化有关,为进一步揭示衰老时机体免疫功能下降的机理提供了实验依据。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群和Th1／Th2类细胞因子的表达及临床意义

目的 研究乙肝感染患者外周血T淋巴细胞亚群和Th1/Th2类细胞因子的表迭及临床意义.方法 通过流式细胞检测技术,对乙型肝炎患者和正常人外周血T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+)及细胞因子Th1(IFN-γ),Th2(IL-4)进行检测,并进行比较.结果 与正常对照组比较.慢性乙型肝炎组CD4+细胞数下降,CD8+细胞数增加,但结果之间差异无统计学意义(P>0.05); 肝硬化组CD3+,CD3+CD4+细胞减少,CD3+CD8+细胞增加,CD3+CD4+/CD3+CD8+比值下降,结果之间的差异有统计学意义(P<0.05).慢性乙型肝炎组和肝硬化组IFN-γ表达百分率高于正常对照组(P<0.05),而IL-4表达百分率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 乙型肝炎患者免疫功能紊乱,在疾病的发生发展中Th1类细胞因子可能起了一定作用.     

联合应用MAGE-1与IL-18基因疫苗体外抗肝癌作用的实验研究

目的该研究构建重组基因疫苗pcDNA-MAGE-1和pcDNA-hIL-18;探讨联合应用基因疫苗体外抗肝癌免疫治疗的作用。方法基因疫苗分组免疫实验小鼠,在体外验证疫苗免疫后的小鼠脾细胞对MAGE-1阳性和阴性肝癌细胞株的杀伤作用;分别以不同剂量的pcDNA-hIL-18与pcDNA-MAGE-1组合测定免疫鼠脾细胞杀伤率,验证产生高杀伤效应的最佳的pcDNA-hIL-18浓度。结果重组基因疫苗免疫组小鼠脾细胞对两种MAGE-1阳性肿瘤细胞(SMMC-7721、BEL-7402)均有明显的杀伤作用,其杀伤效应与生理盐水组(空白对照),空质粒pcDNA3组(阴性对照)相比差异具有显著性(P<0.01);重组基因疫苗免疫后的小鼠脾细胞对MAGE-1阴性肿瘤细胞(QQY-7701)有一定的杀伤作用,与空白对照及阴性对照免疫组相比差异有显著性(P<0.05);pcDNA-hIL-18+pcDNA-MAGE-1组以(50+100)μg剂量免疫小鼠的脾细胞杀伤效应最高,与pcDNA-MAGE-1和pcDNA-hIL-18组相比差异有显著性(P<0.01)。结论联合应用MAGE-1与IL-18基因疫苗对MAGE-1阳性肿瘤...     

恩度联合FOLFOX方案治疗老年晚期胃癌的疗效

晚期胃癌的治疗以铂类和氟脲嘧啶为基础化疗方案,奥沙利铂(OXP)/氟脲嘧啶(5FU)/亚叶酸钙(CF)治疗晚期胃癌有效率为45%左右,mTTP 6个月,中位生存期(MS)10个月左右,1年生存率40%,但是对老年胃癌的临床研究不多。本文应用ED联合FOLFOX方案治疗老年晚期胃癌患者,取得了较好     

幼儿核磁检查中水合氯醛不同给药方法镇静的护理

目的 探讨水合氯醛不同用药方式的护理.方法 选取行核磁扫描需镇静的患儿180例,随机分为口服用药组(A组)、不同深度灌肠用药组(B组、C组、D组)、肌注安定组(E组),每组30例.A组口服10%的水合氯醛溶液;B组、C组、D组应用用稀释的10%的水合氯醛0.5 ml/kg灌肠,灌肠深度分别为6～10 cm、10～15 cm、15～20 cm;E组应用安定注射液,剂量100 μg/kg.对比观察各给药方式的镇静效果.结果 A组和D组镇静有效率均达93%;B组、C组、D组镇静有效率分别为90%、100%、100%.结论 婴幼儿水合氯醛深部灌肠镇静效果显著.     

D-二聚体和血乳酸联合检测对脑梗死患者的临床应用及价值分析

目的研究对脑梗死患者进行D-二聚体和血乳酸检测的实用价值。方法选取2018年7月-2019年9月期间我院收治的50例脑梗死患者进行研究,将其视为讨论组,将同期到我院体检的50例健康者视为对照组,利用免疫比浊法对两组研究对象D-二聚体以及血乳酸(LAC)水平进行分析。结果讨论组患者D-二聚体和血乳酸水平与对照组相比较,统计分析P<0.05,具有统计学意义。结论对脑梗死患者进行D-二聚体和血乳酸检测对指导临床诊疗及判断预后有着重要意义,其检测结果可作为患出现代谢性酸中毒的重要指标,同时可以判断患者脑血管堵塞状态、脑梗死进展及预后,进而进行相关临床干预抢救生命、改善生活质量。     

弓形虫SAG1、GRA2单基因疫苗及SAG1-GRA2复合基因疫苗的免疫效果观察

目的 检测SAG1和GRA2基因编码的单基因及复合基因疫苗诱导小鼠的免疫应答,评价其抗弓形虫感染的保护性免疫效果.方法 大量制备pcDNA3.1-SAG1、pcDNA3.1-GRA2、pcDNA3.1-SAG1-GRA2真核表达重组质粒,肌内注射BALB/c小鼠,分别于2周、4周后加强免疫一次.另设立pcDNA3.1及PBS对照组.于3次免疫后4周作免疫指标测定(包括ELISA法测定小鼠血清IgG抗体及细胞因子IFN-γ、IL-4,MTT法测定小鼠淋巴细胞增殖能力及NK细胞杀伤活性),并观察弓形虫速殖子攻击感染后小鼠的生存时间.结果 SAG1-GRA2组小鼠血清IgG抗体、IFN-γ、淋巴细胞增殖能力及NK细胞杀伤活性均高于SAG1及GRA2组(P＜0.05);各组均未检测到IL-4;复合基因组小鼠生存时间较单基因疫苗组延长(P＜0.01).结论 弓形虫SAG1-GRA2复合基因疫苗较SAG1、GRA2单基因疫苗具有更好的免疫保护性.     

慢性乙型肝炎患者血清α1微球蛋白水平与HBV-DNA载量的相关性研究

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清α1微球蛋白(α1-MG)与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量的相关性。方法收集233例CHB患者血清。将CHB患者根据乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)分为HBsAg阳性患者(190例)和HBeAg阳性患者(43例)。分别测定其α1-MG和HBV-DNA载量,采用免疫比浊法检测血清α1-MG;采用荧光定量PCR法检测血清HBV-DNA载量,分析血清α1-MG水平与血清HBV-DNA载量的相关性。结果HBsAg阳性患者中HBV-DNA高载量患者88例(高载量A组),HBV-DNA低载量患者102例(低载量A组)。高载量A组α1-MG水平为(26.5±8.5)mg/L,低载量A组α1-MG水平为(20.5±5.5)mg/L,两组比较,差异无统计学意义(t=1.1057,P>0.05)。HBeAg阳性患者HBV-DNA载量分析结果显示,HBV-DNA高载量患者15例(高载量B组),HBV-DNA低载量患者28例(低载量B组)。高载量B组α1-MG水平为(19.2±7.2)mg/L,低载量B组α1-MG水平为(18.5±6.3)mg/L,差异无统计学意义(t=1.3251,P>0.05)。结论血清α1-MG水平与HBV-DNA载量无明显的相关性,不能用于判断CHB患者病毒复制情况,对病变的严重程度、观察疗效及评估预后无指导作用。