PIP mRNA在乳腺癌组织中的表达

目的:本研究探讨乳腺组织特异性基因PIP(prolactin-inducible protein)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其作为检测乳腺癌微小转移指标的可能性.方法:利用RT-PCR检测PIP mRNA乳腺癌患者癌组织和相应癌旁正常乳腺组织44例,以及胃癌、大肠癌、食管癌、肺癌、卵巢癌标本各5例中的表达.分析PIP mRNA表达与乳腺癌临床病理特点之间的关系.结果:44例乳腺癌组织和相应癌旁组织中43例表达PIP mRNA,其中有69.8%(30/43)的癌组织相对正常组织低表达;而胃癌、大肠癌、食管癌均未表达.肺癌、卵巢癌各1例PIP阳性.在乳腺癌组织和其它癌组织中表达有显著性差异(P＜0.01).PIP表达与乳腺癌病理类型、临床分期、ER、PR状态不相关(P＞0.05).结论:PIP mRNA作为乳腺组织特异性标志物可能成为检测乳腺癌微小转移的指标.     

BRM释介素抗肿瘤作用研究

 目的　研究中药复方胶囊BRM释介素的抗癌活性及诱导人神经胶质瘤细胞SHG 4 4凋亡。方法　运用MTT法检测BRM对体外人癌细胞株的抑制作用 ;运用小鼠移植瘤模型观察BRM体内抑瘤活性 ;应用电镜、流式细胞仪分析、琼脂糖凝胶电泳观察BRM诱导SHG 4 4。结果　BRM释介素体外对SHG 4 4、MCF 7具有明显的抑制作用 ;体内对小鼠移植性肿瘤表现出较显著的抗癌活性 ;SHG 4 4在BRM水提液作用下发生细胞凋亡。结论　BRM释介素的抗肿瘤活性与诱导细胞凋亡有关     

人乳头瘤病毒16型L1蛋白表达及其单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

目的表达并纯化重组人乳头瘤病毒16型（HPV16）L1蛋白，建立分泌抗HPV16 L1单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。方法以基因工程表达HPV16L1蛋白。用Ni—NTA技术进行纯化后免疫BALB／c小鼠，取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，经含次黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶（HAT）的选择培养基及有限稀释法进行克隆化，用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞，对获得的杂交瘤细胞株染色体进行计数．同时测定细胞培养上清mAb的效价。结果筛选出2株可分泌抗HPV16 L1 mAb的杂交瘤细胞，命名为AE3和AG7，染色体数分别为130条和98条。2株杂交瘤细胞AE3和AG7培养上清的效价分别为1：5120和1：80。结论成功建立了2株可分泌抗HPV 16 L1 mAb的杂交瘤细胞，为进一步研制HPV感染检测试剂盒提供实验基础。     

血清巨噬细胞抑制因子-1在肝癌患者中的临床诊断价值

目的：初步探讨血清中巨噬细胞抑制因子-1（MIC-1）的浓度在肝癌患者中的临床应用价值。方法分别采用双抗体夹心ELISA法和电化学发光免疫分析仪检测271例未经治疗的肝癌患者,48例肝脏良性疾病患者,30例乙肝携带者及104例健康对照者的血清MIC-1浓度和血清甲胎蛋白（AFP）浓度。结果在肝癌患者中血清MIC-1浓度比较,男性患者高于女性患者,差异无统计学意义（P=0.255）;有病毒性肝炎史患者高于无病毒性肝炎史患者,差异有统计学意义（P=0.038）;MIC-1浓度随肝癌患者临床巴塞罗那分期（BCLC）进展而升高,差异有统计学意义（P﹤0.05）;不同分化程度组差异无统计学意义（P=0.146）;不同病理类型,肝细胞癌组高于胆管细胞癌组,差异有统计学意义（P=0.044）;MIC-1在早期肝癌患者（0期和A期）中显示出良好的诊断敏感度,优于AFP。肝癌患者组血清MIC-1浓度高于肝脏良性疾病组、乙肝携带者组及健康对照者;根据肝癌患者及健康对照者的受试者操作特性曲线（ROC）设定1.8 ng/ml作为MIC-1诊断肝癌的界值时,特异度和敏感度分别为96.2%和97.4%,高于AFP的96.2%和73.1%。结论本研究结果显示MIC-1可成为理想的癌筛查及诊断血清肿瘤标志物,在肝癌诊断特别是早期诊断方面显示出良好应用前景。     

巨噬细胞抑制因子-1联合多种标志物在结直肠癌诊断中的价值研究

目的研究巨噬细胞抑制因子1（MIC-1）在结直肠癌诊断和早期诊断中的价值,并探讨多种标志物联合应用于检测结直肠癌的可行性。方法应用自主研制的MIC-1定量检测试剂盒及Roche Cobas 601电化学发光免疫分析仪分别检测429例不同临床分期的结直肠癌患者和129例健康人血清样本中的MIC-1、CA19—9、CEA和TPS水平,比较MIC-1水平与其他肿瘤标志物的关系、与患者TNM分期的关系,以及在结直肠癌诊断和早期诊断中的价值。结果结直肠癌患者血清中的MIC-1水平显著高于正常对照人群（1045．88±892．67 vs 398．04±263．19,P〈0．001）;肿瘤患者血清MIC-1水平随肿瘤浸润深度（T分期）增加而升高（P=0．001）,并与淋巴结转移（N分期,P=0．007）和远端转移显著正相关（P〈0．001）;MIC-1、CEA和TPS三种标志物联合检测早期结直肠癌检测敏感性可达61．3％,显著高于CEA的检出率（25．6％）。结论MIC-1是结直肠癌尤其是早期结直肠癌有价值的血清肿瘤标志物,MIC-1、CEA和TPS联合检测对于提高结直肠癌的早期诊断率具有重要的临床意义和价值。     

胰腺癌患者血清中巨噬细胞抑制因子-1的大样本临床研究

目的 探讨巨噬细胞抑制因子1(MIC-1)在胰腺癌诊断、早期诊断及治疗监测中的临床价值.方法 应用自主研制的MIC-1检测试剂盒检测552例不同临床分期的胰腺癌患者、115例胰腺良性肿瘤患者、21例慢性胰腺炎及200例健康人血清样本中MIC-1水平,并对部分早期肿瘤患者的病程进行随访监测;应用罗氏Cobas 601电化...     

清洗式血液回收低温液体清洗对回收血液质量的影响

目的 观察清洗式血液回收低温液体清洗对回收血液质量的影响。方法 选择24例符合血液回收适应证的择期颅脑手术患者,随机均分为两组。血液回收中,分别常温（25℃）复方乳酸钠组（Ⅰ组）及低温（4℃）复方乳酸钠组（Ⅱ组）清洗。分别测定两组术中动脉血以及回收清洗前（收集的血液充满离心杯后）、清洗后红细胞悬液的血液学指标[红细胞压积（Hct）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白浓度（Hb）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、平均红细胞血红蛋白量（MCH）、平均红细胞体积（WCV）、血小板计数（Plt）、平均血小板体积（MPV）、白细胞计数（WBC）、血清K^＋、Na^＋、Cl^-浓度以及游离血红蛋白（FHb）浓度]。另测10份库存2周的浓红细胞悬液中FHb的浓度。结果 （1）血清K^＋及FHb浓度：清洗前,Ⅰ、Ⅱ组均明显高于正常生理水平。清洗后较清洗前明显下降（P〈0．05）。其中FHb高于正常值,但在FDA推荐的可以接受范围内,并低于库存2周的浓红细胞悬液（P〈0．05）。两组回收血液中清洗前后Hct、RBC、Hb均明显高于术中动脉血。（2）两组在清洗前后动脉血中各指标差异无统计学意义。清洗后,Ⅱ组的Hct、RBC、Hb均明显高于Ⅰ组（P〈0．05）。而Ⅱ组血清K^＋及FHb浓度均低于Ⅰ组（P〈0．05）。结论 颅脑手术中清洗式回收血液中红细胞质量令人满意,利用低温复方乳酸钠清洗有利于提高回收血液质量。     

5'-RACE法扩增抗人乳头瘤病毒16型L1蛋白单克隆抗体轻链可变区基因及序列分析

目的 获得抗人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白单克隆抗体的轻链可变区(VL)基因并分析序列.方法 从分泌抗HPV16L1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,逆转录形成cDNA,用5'-RACE策略扩增抗体轻链可变区基因,经琼脂糖凝胶电泳鉴定,并测序及进行序列分析.结果 VL基因全长336bp,编码112个氨基酸,基因测序结果符合小鼠抗体轻链可变区特征.结论 5'-RACE法成功获得了抗HPV16L1蛋白的单克隆抗体轻链可变区基因的真实序列,为基因工程抗体研究奠定了良好基础.     

HPV16Z-Hsp65-E6／E7无佐剂重组蛋白疫苗的研究

目的：研究治疗性HPV16Z-Hsp65-E6／E7无佐剂重组蛋白疫苗的抗肿瘤活性。方法：通过淋巴细胞增殖实验和细胞毒性杀伤实验研究该疫苗激发的细胞免疫反应及反应强度；观察该疫苗对小鼠TC-1肿瘤细胞移植瘤的体内治疗作用和对小鼠生存期的影响。结果：重组蛋白疫苗免疫小鼠后，小鼠脾淋巴细胞与该疫苗体外混合培养增殖明显，并可特异性地在体外杀伤TC-1细胞；体内抑瘤试验显示该疫苗对HPV16病毒转化的TC-1细胞小鼠移植瘤的生长有显著的抑制作用。结论：该疫苗能激发特异性细胞免疫反应；显著抑制HPV16转化的TC-1肿瘤细胞生长。