重组凋亡素腺病毒基因诱导人类乳腺癌细胞MCF-7凋亡的作用

目的 构建重组vp3基因腺病毒pAD-vp3,观察其体内外对人乳腺癌细胞MCF-7的诱导凋亡作用.方法 克隆vp3基因,loxP法同源重组构建重组腺病毒载体pLP-AD-vp3(pAD-vp3),转染293A细胞进行病毒包装,然后NIH3T3细胞测定病毒滴度;将腺病毒感染人乳腺癌细胞MCF-7,蛋白免疫印迹(Western blot)检测Apoptin蛋白表达,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制,48 h后流式细胞仪(FCM)法检测肿瘤细胞的凋亡,并应用表面增强激光解析电离-蛋白质飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测乳腺癌细胞MCF-7标志蛋白变化.建立乳腺癌细胞MCF-7裸鼠模型,分组给予vp3病毒治疗后测定抑瘤率,实时定量聚合酶链反应技术(real-time PCR)检测vp3基因表达,原位凋亡(TUNEL法)检测肿瘤细胞的凋亡情况,并检测肿瘤组织vp3基因表达.结果 重组腺病毒载体pAD-vp3经鉴定连接正确,转染293A后上清液中病毒滴度可达到3×108 pfu;MTT检测48 h细胞抑制率(62.3%),明显高于正常对照组(P＜0.05),转染48 h后Western blot可见Apoptin蛋白高表达.FCM检测出现凋亡峰,其凋亡百分率高达31.87%.SELDI检测可见2个蛋白质峰M_5480.8+H和M_4967.4+H在两组之间表达量差异有统计学意义(P＜0.05).裸鼠实验可见pAD-vp3组抑瘤率分别为56.82%和69.53%,明显高于空白对照组(t=4.82,P＜0.01),且vp3基因高表达,TUNEL检测可见pAD-vp3组和5-氟脲嘧啶(5-Fu)组细胞核呈棕黄色,低剂量和高剂量组凋亡指数与5-Fu组比较差异无统计学意义(t1=1.25,t2=0.86,均为P＞0.05).结论 成功构建了pAD-vp3腺病毒,vp3基因在体内外均能有效地诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡.     

自发性脾破裂一例误诊

1病例资料女,65岁。因阵发性意识不清5小时入院。患者打麻将过程中突然出现胸闷、气短、意识不清约10分钟,伴大汗、尿失禁,以后又出现意识不清1次。否认肝炎及外伤史。查体:体温35.7℃,血压90/50 mmHg。皮肤、巩膜无黄染,腹部较膨隆,全腹软,无压痛、反跳痛及肌紧张,肝脾未触及,肠鸣音弱。查血白细胞10.8×109/L,血红蛋白124 g/L。行头颅CT扫描示多发腔隙性脑梗死。诊断:短暂性脑缺血发作,多发腔隙性脑梗死。予活血、扩张脑血管等药物治疗。21小时后血压降至80/50 mmHg,查体移动性浊音阳性,急诊行腹部B超检查示肝回声不均,腹腔内有大量积…     

葛根素预处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的通过建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型,探讨葛根素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法在langendǒrff离体心脏体外灌注模型复制基础上,采用随机对照方法将50只雄性SD大鼠平均分为5组:对照组、缺血再灌注组、缺血预处理组、小剂量葛根素预处理组、大剂量葛根素预处理组,记录每只大鼠平衡灌注15 min、再灌注153、0 min的心功能变化,包括心率(HR)、左室最高压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力升高速率(+dp/dtmax)、左室压力降低速率(-dp/dtmax)。并于平衡灌注15 min、复灌1、3、5、10、15、30 min测定冠脉流出液中肌酸激酶(CK)的含量。测定心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的含量,并作电镜检查。结果缺血再灌注组可引起HR、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax下降,LVEDP升高以及CK释放增加,心肌MDA产生增多、SOD及NO含量降低,与对照组相比有显著性差异。缺血预处理组及葛根素预处理组均能显著改善缺血再灌注引起的心功能损伤,降低CK的释放,减少心肌组织MDA的生成,并增加心肌组织中SOD和NO含量,减轻心肌细胞超微结构的病理改变。大剂量葛根素预处理组比小剂量葛根素预处理组对上述指标的改善更为显著。结论葛根素预处理能减少脂质过氧化,明显改善心功能,提高心肌组织对后续缺血的耐受性。这种保护作用存在量效关系,其产生与心肌中SOD增高减轻了氧自由基损伤和NO增高扩张冠脉有关。     

队列训练喊口令致第1肋骨骨折1例

1病例报告患者男,19岁。因队列训练喊＂向后转＂口令时,患者突感左肩疼痛,同时听到异响,伴呼吸疼痛,挺胸受限,休息后症状不缓解且进行性加重,遂来我部急诊。既往体健,无外伤史。     

阴道镜诊断子宫颈疾病的临床价值

目的评价阴道镜对子宫颈疾病的诊断价值。方法对我院120例阴道镜检查宫颈病变患者行宫颈细胞学检查及阴道镜检查,阴道镜下可疑部位取活检,最后送病理检查。结果异常细胞学结果与病理诊断结果符合率21.9%(21/96),异常阴道镜图像与病理诊断结果符合率74.2%(72/97),两组对比差异有统计学意义(χ2=52.97,P<0.01)。结论阴道镜检查可弥补宫颈细胞学检查的不足而避免漏诊,但也存在个人判断误差,初学者更易出现,应注意鉴别,积累经验,提高诊断准确率。     

HPLC法测定血浆中头孢丙烯浓度及其人体药动学研究

目的:建立测定人血浆中头孢丙烯(CFPZ)浓度的高效液相色谱法,并应用于人体药动学研究。方法:10名男性健康受试者单次空腹口服CFPZ片500mg,采用高效液相色谱法测定CFPZ的血药浓度,色谱柱为KromasilKR100-5C18,流动相为0·01mol·L-1KH2PO4水溶液-乙腈(100:9·5),检测波长为254nm,柱温为室温,流速为1·0mL·min-1,进样量为20μL。结果:CFPZ血药浓度在0·25～15μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0·9999),最低检测浓度为0·25μg·mL-1;低、中、高(0·25、0·5、2·5μg·mL-1)3种浓度(n=5)的日内RSD分别为4·8%、3·5%、1·3%,日间RSD分别为12·6%、6·7%、1·6%,相对回收率分别为97·7%、102·5%、103·6%,绝对回收率分别为88·5%、87·8%、85·3%。受试者单次空腹口服CFPZ片500mg后的Cmax为(8·66±1·57)mg·L-1,tmax为(1·85±0·8)h,t1/2为(1·4±0·18)h,AUC0～10为(28·28±3·28)mg·h·L-1,AUC0～∞为(29·43±3·54)mg·h·L-1。结论:CFPZ片体内过程符合血管外二室模型,口服后吸收迅速。本方法准确、灵敏、简便、特异性强、重现性好,适合于临床药动学研究。     

HIF—1α、Caspase-3、Survivin蛋白在食管鳞癌组织中的表达及相关性分析

目的研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、Caspase-3、Survivin在食管癌的发生、发展、浸润、转移过程中的作用及有无相互关系，为进一步寻找抑制食管鳞癌发牛、发展的途径提供理论依据。方法应用免疫组化S-P法检测49例食管鳞癌组织中HIF-1α、Caspase-3、Survivin蛋白的表达并进行相关性分析。结果HIF-1α蛋白在食管鳞癌组织中的阳性率为51．0％（25／49），显著高于正常食管黏膜0％（0／32）（P〈0．05）；HIF-1α蛋白的阳性表达与Caspase-3蛋白表达呈负相关关系，与Survivin蛋白表达呈正相关关系，提示HIF-1α蛋白的阳性表达下调了Caspase-3蛋白的表达，使Survivin蛋白的表达率增加，食管癌细胞凋亡受阻。结论HIF-1α蛋白在食管鳞癌组织中的表达显著增高，联合检测HIF-1α、Caspase-3与Survivin可作为判断食管癌生物学行为的客观指标，对判断食管癌的预后具有重要意义。     

广西全州县1997～2005年输入性疟疾调查

目的 分析全州县1997—2005年疟疾发病特点，为疟疾控制后期防治、监测提供科学依据。方法 收集1997-2005年疫情报告。疟疾病人个案调查表，发热病人血检登记，流行病学分析总结等资料作回顾性研究。结果 9年间发现输入性疟疾病例167例，其中海南回归占51．50％（86／167），贵州回归占30．54％（51／167），广东回归占6．59％（11／167），外国回归占2．99％（5／167）；在外滞留一个月以上的占94．41％（161／167）；从事挖煤（矿）的占42．51％（71／167），种植的占26．95％（45／167）；发病后1周内就诊的占88．62％（148／167）。结论 全州县9年闻共检出输入性疟疾病例167倒，以男性为主，大多数病人在疫区野外作业1个月以上，发病后能及时就诊和得到及时治疗，未发生输入继发病例。应继续加强对从高疲区回归人员的疟疾管理和监测，加强疟防知识宣传教育，巩固疟疾防治成果。     

共轭亚油酸构效关系及其分子药理研究进展

共轭亚油酸是一系列异构体的总称，其中具有多种生物功能的异构体主要是c9，t11-共轭亚油酸和t10，c12-共轭亚油酸。本文简要阐述了共轭亚油酸活性异构体的分布和来源，并重点综述了c9，t11-共轭亚油酸和t10，c12-共轭亚油酸这两种异构体对动物体内脂肪、脂类代谢和癌症的影响差异，从构效关系上分析了它们的药理作用机制。