犬骨髓间充质干细胞定向分化为内皮细胞的研究

应用密度梯度离心法分离狗骨髓间充质干细胞,建立诱导分化内皮细胞的方法及条件。密度梯度离心法分离狗骨髓间充质干细胞后,在体外经血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、内皮细胞生长因子(Endothelial growth factor,EGF)等诱导后,分化形成内皮样细胞。结果表明:光镜下细胞单层融合生长,呈铺路石样形态,单个核位于中央。电镜下可见到Weibel-Palade小体,在细胞胞浆vWF染色阳性。骨髓间质干细胞,在体外可诱导分化成内皮细胞。     

IL-12对狼疮肾炎PBMC中信号传递分子STAT_3、STAT_4的作用

目的 :为了探讨IL 12对狼疮肾炎PBMC发挥生物学作用的细胞内信号传递机制。方法 :采用MTT、免疫沉淀、免疫印迹等方法 ,检测IL 12对PBMC增殖及STAT3、STAT4的作用 ,并比较在狼疮肾炎活动期、静止期的差别。结果 :发现与正常人对照及静止期相比 ,IL 12对活动期PBMC不需要IL 2的预诱导 ,可促进PBMC增殖并在短时间内激活STAT3、STAT4,而IL 2对STAT4无作用。结论 :表明IL 12对PBMC的作用可通过STAT3、STAT4途径发挥 ,活动期PBMC存在异常活化 ,这可能是IL 12促进狼疮肾炎PBMC参与发病的细胞内机制之一     

Lck在狼疮肾炎肾小管上皮细胞中表达的研究

目的 观察狼疮肾炎病理过程中淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶（Lck）在肾小管上皮细胞内的表达及白细胞介素-2（IL-2）对其表达的影响。方法 体外培养6周龄BXSB狼疮小鼠的近端肾小管上皮细胞，给予IL-2刺激，采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法及免疫印迹法检测肾小管上皮细胞中Lck mRNA和蛋白的表达，观察IL-2对Lck表达水平的影响。同时用免疫组织化学方法观察Lck蛋白在狼疮肾炎小鼠和人类肾脏组织标本肾小管上皮细胞内的表达情况。结果 体外培养的6周龄BXSB狼疮小鼠近端肾小管上皮细胞中仅有微量LckmRNA及蛋白的表达，IL-2刺激后表达水平显著增加（P〈0．05）。免疫组织化学方法显示：正常BALB／C小鼠、未发病的狼疮小鼠和人类微小病变性肾病肾脏组织的肾小管上皮细胞内均未发现明显的Lck蛋白表达，而已发病的16周龄狼疮肾炎小鼠和人类Ⅳ型狼疮肾炎肾脏组织标本的肾小管上皮细胞内则有明显的Lck蛋白表达。结论 IL-2可活化肾小管上皮细胞并诱导Lck表达，Lck可能作为细胞因子或炎症因子的重要信号分子，在小管-间质性炎症及狼疮肾炎病理过程中发挥着重要作用。     

IL—12,LPS对肾小管上皮细胞中lck／P38信号传递的影响

目的：探讨ＩＬ－１２、ＬＰＳ对肾小管上皮细胞中ｌｃｋ基因表达及活性改变的影响，明确ｌｃｋ／Ｐ３５信号传递途径在炎症过程的作用。方法：用原位杂交、放射自显影分别检测ｌｃｋ基因表达及ｌｃｋ活性，用免疫印迹法对明小管上皮细胞在ＩＬ－１２、ＬＰＳ刺激下其Ｐ３８磷酸化进行测定。结果：肾小管上皮细胞径ＩＬ－１２，ＬＰＳ刺激后ｌｃｋｍＲＮＡ表达水平增高，ｌｃｋ知性在刺激后５ｍｉｎ时最强，加入ｌｃｋ抑制剂ＰＰ１     

异种器官移植病毒感染的研究状况(文献综述)

介绍异种器官移植存在的病毒类型 ,评价这些病毒在人类宿主引起疾病的风险     

大鼠肾脱细胞支架的制备研究

背景 基于完整天然肾的脱细胞支架可以用于生物人工肾,然而目前对肾脱细胞支架的制备没有统一的标准.由于脱细胞的结果直接关系到再细胞化和肾功能的发挥,因此对脱细胞支架的制备方案进行探索和优化显得尤为重要.目的 探究基于大鼠完整肾的脱细胞支架制备方案,为组织工程肾的制备提供生物支架材料.方法 通过给离体肾灌注十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)溶液洗脱肾内的细胞成分制备大鼠肾脱细胞支架,病理染色及透射电镜观察组织结构及细胞外基质保留情况,超声和超声造影观察支架完整性和血管网络通畅性,DNA和SDS定量检测支架内的核酸和洗脱剂的残留,细胞毒性检测脱细胞支架的安全性.结果 脱细胞时间随着灌注流速增加而减少,高流速灌注洗脱肾造成鲍曼氏囊面积变大而导致鲍曼氏囊破裂,且有细胞核成分残留.低流速下制备的脱细胞支架结构完整、细胞成分洗脱干净.0.5 mL/min流速下液体环境中灌注洗脱制得的脱细胞支架结构完整,DNA和SDS残留符合标准,超声探查见脱细胞支架完整,造影检查见完整血管网络,支架无细胞毒性.结论 制备大鼠肾脱细胞支架的最佳灌注流速是0.5 mL/min,超声和超声造影检查可以作为评价肾脱细胞支架的手段.     

地塞米松和川芎嗪对狼疮肾炎外周血单个核细胞白细胞介素12表达的影响

目的　探讨地塞米松、川芎嗪对活动期、静止期狼疮肾炎（ Ｌ Ｎ） 外周血单个核细胞（ Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ） 白细胞介素１２（ Ｉ Ｌ１２） 表达的影响。方法　应用地塞米松（１０ － ５ ｍｏｌ／ Ｌ） ,川芎嗪（３３ μｇ／ｍｌ） 对 Ｌ Ｎ 患者 Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ 培养,以正常人为对照,分别采用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法和半定量 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 法检测细胞上清液及细胞 Ｉ Ｌ１２ 和 Ｉ Ｌ１２ Ｐ４０ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达。结果 Ｌ Ｎ 活动期、静止期较正常对照组 Ｉ Ｌ１２ 蛋白、基因水平明显增高（ Ｐ ＜ ０ ．０１） 。地塞米松明显抑制狼疮肾炎 Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ Ｉ Ｌ１２ 表达（ Ｐ ＜ ０ ．０１） ,而川芎嗪仅对活动期狼疮肾炎 Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ Ｉ Ｌ１２ 表达抑制明显（ Ｐ ＜ ０ ．０５） ,两种药物对正常人对照 Ｉ Ｌ１２ 表达无明显抑制作用（ Ｐ ＞ ０ ．０５） 。结论　狼疮肾炎 Ｉ Ｌ１２ 表达水平增高,这与 Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ 处于异常活化状态有关;地塞米松、川芎嗪下调狼疮肾炎 Ｉ Ｌ１２ 表达,提示它们通过免疫调节直接抑制了活化的狼疮肾炎 Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ 表达 Ｉ Ｌ１２     

淋巴细胞特异蛋白质酪氨酸激酶/P38信号传递途径在小鼠肾小管上皮细胞的作用

目的 探讨小鼠肾上管上皮细胞是否存在淋巴细胞特异蛋白质酪氨酸激酶（lck）基因表达及lck/p38细胞分裂原活化蛋白信号传递分子经IL-12、IL-2、脂多糖（LPS）等刺激时在肾小管上皮细胞的变化。方法 无菌分离培养BALB/C小鼠肾小管上皮细胞,采用地高辛标记的lck寡核苷酸探针原位杂交检测肾小管上皮细胞中lck基因表达;应用放射自显影方法观察lck活性变化,利用免疫印迹分析lck蛋白表达及p38磷酸化。结果 IL-12、IL-2、LPS刺激肾小管上皮细胞活化,lck mRNA表达较对照组明显增强;经上述物质刺激后lck活性、p38磷酸化分别于5min、15min最强,其中LPS刺激最显著而lck、p38蛋白水平则无明显变化。加入lck抑制剂PP1,IL-12刺激时未发现p38磷酸化,而IL-2、LPS刺激只有轻度抑制。结论 IL-12、IL-2、LPS促进肾小管上皮细胞中lck基因表达,并只有IL-12唯一通过lck诱导p38磷酸化,它们皆可通过lck/p38信号传递途径参与对肾小皮细胞发挥生物作用。     

肾脏病学临床型研究生培养实践与探索

肾脏病学是研究肾脏泌尿系统病变,如急慢性肾炎、泌尿系统感染炎症、先天性或遗传性肾病、急慢性肾功能不全等疾病的一门综合性学科,并具有血液透析腹膜透析等肾脏替代治疗,是近年发展很快的一门学科。由于肾脏病学具有知识系统复杂、专业性强、对医生综合素质要求高等特点,研究生不能等同于本科生的培养方式,故在肾脏病学临床型研究生培养过程中,需     

骨髓间充质干细胞治疗急性腹膜纤维化的作用方式探讨

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗急性腹膜纤维化的作用方式.方法 取SD大鼠114只,制作急性膜腹粘连模型,其中6只在腹膜刮伤后24h经尾静脉(n=3)或腹腔(n=3)注入MS(s,采用活体成像示踪法观察MSCs的分布并对两种方式注射后MSCs的示踪效果进行比较；其余108只大鼠随机分为无血清条件培养基(CM)...