基于3D肝细胞模型评价盐酸胺碘酮重复给药肝毒性

目的：建立3D肝细胞微球模型并用于评价盐酸胺碘酮及联用肝药酶诱导剂利福平或抑制剂酮康唑时的重复给药肝毒性。方法：采用诱导分化的HepaRG和HHSteC细胞混合共培养构建3D肝细胞微球模型,对HepaRG诱导分化后形成的胆管结构功能进行验证,活细胞探针标记肝细胞微球中两种细胞并对其分布情况进行检测,免疫荧光染色对肝细胞微球表达的特异性和功能性蛋白进行检验,并对试验周期内模型的肝功能指标稳定性进行连续监测。模型验证后,对每40个肝细胞微球进行连续4或5天的盐酸胺碘酮重复染毒,并联用肝药酶诱导剂利福平或抑制剂胺碘酮进行重复染毒,检测不同给药组的细胞毒性及肝功能指标。结果：本研究构建的3D肝细胞模型可以模拟肝脏胆管结构的外排功能,HepaRG和 HHSteC细胞在微球中以24∶1的比例始终保持较均匀的分布,肝脏特异性和功能性蛋白表达丰富,并能在至少5天内维持肝功能指标稳定。在重复给予胺碘酮时,模型从给药第三天起出现剂量和时间依赖性的细胞毒性作用,且联用利福平(LDH和TBIL升高)或酮康唑(LDH、ALT、ALP和GLU升高)能产生剂量相关的肝毒性协同作用。结论：本研究成功构建更适用于短期重复给药毒性评价的3D肝细胞微球模型,对于体外药物肝毒性筛选和代谢研究具有明显优势,能够进行药物肝毒性标志物的筛选研究。     

荧光检测HPLC测定血浆中阿霉素和羟基阿霉素

阿霉素具较强抗各种肿瘤的活性,但有相当严重的心脏毒性。因此,监测血浆中阿霉素及其主要代谢物羟基阿霉素(Aol)很有必要。本文报道一种用于测定血浆中阿霉素及Aol浓度的荧光检测新HPLC法,与以前其它测定方法相比更为灵敏,适用于给药后长时间血药浓度的监测,以研究该药物的最后消除情况。色谱条件250mm×4mm id层析柱,内装8.5μm Lichrosorb RP,流动相为甲酸     

Ames波动试验和GADD45a-GFP GreenScreen两种快速筛选方法评价大黄素和芫花素的遗传毒性

目的 使用Ames波动试验和GADD45a-GFP GreenScreen两种快速筛选方法,对有毒中药芫花和了哥王的主要单体成分大黄素和芫花素的遗传毒性进行评价。方法 （1）Ames波动试验：在非代谢活化（-S9）和代谢活化（+S9）条件下使用鼠伤寒沙门菌TA100开展基于96孔液态培养法的细菌回复性突变试验,大黄素和芫花素（终质量浓度范围均为0.1~10 μg/mL）与菌液充分混合后在37℃下培养72 h。（2）GADD45a GreenScreen高通量筛选试验：在非代谢活化（-S9）和代谢活化条件下（+S9）将表达GADD45a基因的TK细胞（GenM-T01和GenM-C01）与大黄素（0.13~32.0 μg/mL）和芫花素（0.07~16.0 μg/mL）分别作用48 h（-S9）和3 h（+S9）,之后通过酶标仪和流式细胞仪检测绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）的荧光强度。结果 有无代谢活化条件下,10 μg/mL大黄素均可诱导TA100的回复性突变率显著性升高（P<0.05、P<0.001）;代谢活化条件下,10 μg/mL芫花素可诱导TA100的回复性突变率显著性升高（P<0.001）,16.0 μg/mL芫花素诱导TK6细胞表达的GADD45a-EGFP荧光强度也超过了遗传毒性阈值（1.3倍）。结论 当前研究提示大黄素和芫花素为可疑遗传毒性,需要开展深入研究明确其遗传毒性及机制。Ames波动试验和GADD45a GreenScreen是良好的高通量筛选备选试验,可极大优化浩繁的药物的毒性筛选工作,尤其适宜诸如中药等成分和配伍复杂的药物。     

磁共振颅表定位网用于颅内小病灶术前定位26例临床分析

目的：观察和分析磁共振颅表定位网对颅内小病灶进行术前定位的治疗效果方法：应用磁共振颅表定位网定位技术,对26例颅内小占位病灶进行术前定位,然后进行小骨瓣开颅手术,将颅内小病灶显微镜下全切。结果：26例患者经过定位网定位后,准确而微创地切除了病灶,而且诊治过程顺利,无严重并发症发生。结论：磁共振颅表定位网具有定位准确、安全等优点,是重要的神经外科微创诊疗技术。     

疏乳消块丸对大鼠乳腺增生的治疗作用及其机制

目的:观察疏乳消块丸对大鼠乳腺增生病的治疗作用,并对其作用机制进行探讨。方法:采用肌内注射雌-孕激素联合诱导制备乳腺增生模型大鼠,灌胃给予疏乳消块丸30 d后,观察各组药物对乳腺增生大鼠乳腺组织病理学的改变及各组大鼠乳头形态学变化,用放射免疫方法测定各组大鼠血清雌二醇(E2)、黄体酮(P)的含量,并计算脏器指数。结果:疏乳消块丸能明显减小乳腺增生大鼠乳头高度及乳房直径,抑制大鼠乳腺增生程度,还可明显降低大鼠血清雌二醇水平、增加孕酮水平。结论:疏乳消块丸对大鼠乳腺增生病有良好的治疗作用,其机制与调节乳腺增生大鼠血清中性激素水平有关。     

长白灵咳喘片中白色葡萄球菌止咳有效成分的研究

长白灵咳喘片是由黄连、灵芝和白色葡萄球菌等成分组成,是一个疗效较好的治疗慢性气管炎的复方制剂,特别是止咳作用具有独到的效果。     

小檗碱及其衍生物的研究进展

小檗碱是从中草药黄连等植物中提取分离得到的一类异喹啉类生物碱。近十年来，已经有2 000多篇国内外文献报道了小檗碱及其衍生物在治疗肿瘤、糖尿病、心血管疾病、高血脂、炎症、细菌和病毒感染、脑缺血性损伤、精神疾病、阿尔茨海默病(Alzheimer disease)、骨质疏松等多方面的临床应用、药效机制以及该类化合物的构效关系等研究结果。这些结果表明小檗碱生理功能广泛，潜在的结构改造和开发应用价值很大，但还未见系统的回顾和综述。本文对这些文献进行了系统地分析整理，主要从临床应用与药效机制、分子药理、体内吸收代谢、构效关系四个方面来介绍小檗碱及其衍生物的研究进展，旨在为进一步深入开展以药效机制为基础的小檗碱结构改造和创新药物研究提供比较系统的信息。     

磷酸西他列汀在大鼠体内的药代动力学研究

目的:建立超高效液相色谱-电喷雾离子源-串联三重四极杆质谱(UHPLC-ESI-MS/MS)方法测定大鼠血浆中磷酸西他列汀的含量,研究磷酸西他列汀经尾静脉单次给药后在SD大鼠体内的药代动力学过程。方法:18只SD大鼠分为3组,分别单次给予9,3,1 mg.kg-1磷酸西他列汀,按照不同时间点于眼后静脉丛采血。液质联用法测定血药浓度。质谱采用正离子和选择反应监测(SRM)模式,用于定量分析的离子分别为磷酸西他列汀m/z 408.0→235.0和内标氟西汀m/z 310.0→148.0。根据非房室统计矩模型用WinNolin软件进行曲线拟合并计算药代动力学参数。结果:大鼠分别尾静脉单次注射高、中、低剂量(93,和1 mg.kg-1)药物后,血药浓度-时间曲线下面积(AUCINF)分别为(5 154.82±637.37)(,1 729.30±290.76)和(589.39±66.92)h.ng.mL-1,剂量之比为9∶3∶1,对应的AUC比值为8.75∶2.93∶1,与给药剂量呈线性正相关性;统计结果表明3个剂量组的AUC有显著性差异t,1/2,Vz,CL,MRTlast与给药剂量无关。结论:所建立的UHPLC-M...     

小儿支气管哮喘应用硫酸镁联合孟鲁司特治疗的临床观察

目的：探讨硫酸镁联合孟鲁司特治疗对支气管哮喘患儿免疫功能的影响及临床疗效。方法：选取100例小儿支气管哮喘患者作为研究对象,根据治疗方式进行分组;所有患儿予常规综合治疗;对照组在常规综合治疗的基础上口服酮替芬8周;观察组在常规综合治疗的基础上静脉滴注硫酸镁1个疗程,睡前口服孟鲁司特8周;观察两组患儿住院5d的临床疗效,对比患儿治疗前及治疗8周后T细胞亚群（CD4+、CD4+/CD8+）、NK细胞、IL-4、EOS的改善情况。结果：小儿支气管哮喘患者的CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞、IL-4、EOS表达水平均高于正常水平,两组患儿治疗后的CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞、IL-4、EOS均有所下降,但观察组治疗后的CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞、IL-4、EOS的下降幅度显著大于对照组（P＜0.05）;观察组临床总有效率为94.00%,对照组临床总有效率为76.00%;两组临床总有效率差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：应用硫酸镁联合孟鲁司特治疗小儿支气管哮喘有效,能改善炎症反应及改善预后。