HCV基因分型检测Oligo芯片的制备

目的 研制丙型肝炎病毒（HCV）基因分型寡核苷酸（Oligo）芯片并进行杂交验证。方法 分别对BLAST检索所得的HCV4个亚型型特异序列逐一进行分析，设计长度均一的60mer Oligo探针，用芯片点样仪将设计好的探针打印到玻片上制备成基因芯片。结果 杂交结果显示，Oligo芯片检测HCV各基因亚型的效果较佳。结论 制备的长链Oligo分型芯片检测敏感性、特异性均为满意，为下一步集合更多种肝炎病毒的联合检测与分型打下基础。     

恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶的表达及免疫活性鉴定

目的在大肠杆菌中表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)与谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白,测定重组蛋白的免疫活性。方法采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫(海南株)GDH基因,双酶切后克隆入pGEX-4T-1载体中进行诱导表达,重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清,并用琼脂双向扩散法检测效价,ELISA、Western blotting检测重组抗原的免疫活性。结果获到了重组表达的抗原蛋白,表达产物能与鼠抗恶性疟原虫血清发生特异反应,并能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,免疫琼脂扩散法检测抗体滴度为1∶16。结论恶性疟原虫GDH在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性。     

恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶的表达及免疫活性鉴定

目的：在大肠杆菌中表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶（GDH）与谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白，测定重组蛋白的免疫活性。方法：采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫（海南株）GDH基因，双酶切后克隆入pGEX-4T-1载体中进行诱导表达，重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清，并用琼脂双向扩散法检测效价，ELISA、Westernblotting检测重组抗原的免疫活性。结果：获到了重组表达的抗原蛋白，表达产物能与鼠抗恶性疟原虫血清发生特异反应，并能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答，免疫琼脂扩散法检测抗体滴度为1：16。结论：恶性疟原虫GDH在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性。     

广州地区住院患儿血清抗SARS病毒抗体的检测

非典型肺炎即重症急性呼吸道综合征(SARS)曾蔓延到30多个国家和地区，造成感染患者达7000多例，死亡500多人，某些地区病死率高达15％。但感染人群中儿童很少被感染，此现象是否与儿童体内存在抗SARS病毒的抗体有关?特此，我们检测了广州市儿童医院住院的1066例患儿血清抗SARS病毒的抗体，现报告如下。     

尼美舒利对人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡及STAT3通路相关蛋白表达的影响研究

目的:探讨选择性环氧化酶2(COX-2)抑制剂尼美舒利抑制胃癌细胞株SGC7901增殖的作用和可能的细胞内信号转导机制.方法:将选择性COX-2抑制剂尼美舒利作用于胃癌细胞株SGC7901,MTY法检测细胞增殖状态;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;Western blot法检测STAT3通路相关蛋白的表达.结果:尼美舒利作用胃癌细胞株SGC7901后细胞增殖受到显著抑制且呈时间、剂量依赖性方式;细胞凋亡百分数增高(P<0.05);G0/G1期细胞比例升高(P<0.05);Western Blot结果显示SGC7901细胞中磷酸化STAT3(P-STAT3)、CyclinDI、Bcl-2蛋白的表达明显降低(P<0.05).结论:尼美舒利可抑制胃癌细胞株SGC7901的增殖,阻滞细胞周期的进展,促进细胞凋亡,其机制可能与抑制STAT3信号通路相关蛋白P-STAT3、CyclinDl、Bcl-2表达有关.     

广州地区52例传染性非典型肺炎患者血清检测分析

2002年11月16日我国广东省佛山市发现第一例传染性非典型肺炎(严重急性呼吸综合征，SARS)患者，其传播途径主要通过近距离空气飞沫和密切接触传播，传染性极强。本研究采用军事医学科学院微生物流行病研究所从一例北京SARS患者的肺组织中分离的新型冠状病毒感染Vero E6细胞制成抗原片，对2月份收集的广州地区52例SARS患者血清进行了间接免疫荧光检测(IFA)及分析，以期为SARS的实验室诊断提供参考。     

西尼罗河病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及其应用研究

建立特异、敏感、快速检测西尼罗河病毒(WNV)的SYBR Green实时荧光定量PCR方法.方法:针对西尼罗河病毒囊膜蛋白(E)的保守序列设计引物,建立WNV的实时荧光定量检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性以及稳定性.对保存的54例WNV感染者的血清样本进行检测,分析其检测的准确性.结果:建立的SYBR Green实时荧光定量PCR方法对WNV的检测具有高度的特异性,而对日本脑炎病毒(JEV)、圣路易斯脑炎病毒(SLEV)等均无交叉反应,检测的灵敏度可达到100 pg.标准曲线具有较好的线性关系,相关系数为0.995,实时荧光定量PCR效率为100％.对54例WNV感染样本进行检测,准确率高达98.15％.结论:实时荧光定量PCR技术检测WNV具有较高的特异性、敏感性和稳定性,可作为临床诊断WNV的手段.     

宏基因组测序在感染性疾病病原体检测中的应用

感染性疾病的致病因素复杂,临床表现多样。快速、全面、准确地鉴别病原体,是临床医生及时、有针对性地采取治疗措施的前提。传统的病原体检测方法目标单一、耗时长、操作复杂,很难满足当今感染性疾病诊治的要求。宏基因组测序技术克服了多数病原体不能培养的弊端,能够准确高效地获得全部病原体遗传物质信息,直接检测出感染性疾病的病原体,对疑难感染性疾病的诊断具有重要参考价值。本文对宏基因组测序在感染性疾病病原体检测中的最新研究进展和应用进行综述。     

腹外斜肌腱膜肌肉瓣低张力修补腹股沟疝手术效果研究

目的对腹股沟疝使用腹外斜肌腱膜肌肉瓣低张力进行修补的手术效果进行探讨，评价其临床效果。方法选择90例腹股沟疝患者作为研究对象，随机分为观察组和对照组，观察组实行腹外斜肌腱膜肌肉瓣低张力修补手术，对照组实行传统的疝修补手术，手术后对两组患者的预后进行比较分析。结果两组手术时间差异无统计学意义（P〉0．05）；观察组离床活动时间及平均住院时间小于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。观察组术后出现尿潴留1例、疼痛3例，无复发病例；对照组术后出现尿潴留6例、疼痛13例，6例复发，两组患者的并发症以及复发率差异有统计学意义（P〈0．05）。结论使用腹外斜肌腱膜肌肉瓣低张力修补治疗腹股沟疝，可以缩短病程，改善预后，保证患者的生命安全，具有较高的应用价值，值得推广应用。     

抗新型冠状病毒肺炎一线医务人员焦虑产生影响因素分析

目的 探讨抗新型冠状病毒肺炎一线医务人员焦虑产生的影响因素.方法 采用症状自评量表(SCL-90)从抗新型冠状病毒肺炎一线医护人员中筛选出31例焦虑者作为研究对象,以汉密尔顿焦虑量表(HA-MA)分析焦虑者躯体性与精神性焦虑情况,自行编制的《压力感测评问卷》对焦虑者进行压力感评估.多参数生物反馈仪检测静息状态下焦虑者心...