血清 β-防御素和维生素D与社区获得性肺炎预后相关性的研究

目的研究社区获得性肺炎(CAP)患者中血清β-防御素2(h BD2)、β-防御素3(h BD3)与维生素D(VD)的关系及其预测CAP的预后价值。方法前瞻性研究,纳入2017年4月至2018年4月首都医科大学北京友谊医院呼吸内科收治的CAP患者,记录基线临床信息,采用酶联免疫吸附法检测血清h BD2和h BD3,采用液相色谱法测定血清VD水平,用Spearman相关性分析评价血清h BD2、h BD3与血清VD[25(OH) D_3]之间的相关性。入院后30 d随访,按临床结局将CAP患者分为不良预后组和无不良预后组,分析不同变量对CAP不良预后的预测价值。结果 (1)本研究共入组395例CAP患者,386例进入最终统计学分析。血清h BD2、h BD3和25(OH) D3水平[中位数(四分位间距)]分别为122. 18 (55. 79,365. 23) pg/ml、66. 89(46. 05,110. 46) pg/ml、14. 81(10. 0,19. 81) ng/ml,VD缺乏在CAP患者中占75. 4%。(2)血清h BD2(rho=-0. 222,P 0. 001)和h BD3(rho=-0. 103,P=0. 043)水平与血清25(OH) D3水平呈弱负相关,血清h BD3与h BD2呈中度正相关(rho=0. 411,P 0. 001)。(3)40例患者预后不良,不良预后组和无不良预后组相比,两组患者在年龄、Charlson合并症指数、就诊前应用抗生素、肺炎严重指数(PSI) 90、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞比率(N%)、C反应蛋白(CRP) 8 mg/L、血沉(ESR) 20 mm/h、D-二聚体(D-dimer)、白蛋白(Alb)、动脉血氧分压(PaO_2)方面差异具有统计学意义(P 0. 05),血清h BD2、h BD3和25(OH) D3差异无统计学意义,P值分别为0. 55、0. 21、0. 72。(4)就诊前应用抗生素,以及D-dimer、Alb和PaO_2水平对是否发生不良预后有预测价值。结论在CAP患者中,血清25(OH) D3水平与h BD2和h BD3水平呈负相关。h BD2、h BD3和VD水平均不能预测CAP的预后。未早期使用抗生素、D-dimer升高、低白蛋白血症、Pa O2下降仍是CAP预后不良的主要因素。     

VEGF特异siRNA重组腺病毒构建及其对K562细胞增殖的抑制作用

目的 构建重组腺病毒Ad5-VEGFsi观察其抑制人红白血病K562细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达及其对K562细胞增殖抑制作用的影响.方法 ①合成针对人VEGF mRNA的特异性siRNA;将其插入穿梭质粒psES-HUS,命名为pSES-VEGFsi;后者与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组.酶切鉴定成功后,于HEK293细胞中包装、扩增,氯化铯超速梯度离心后得到滴度较高的重组腺病毒Ad5-VEGFsi;②Ad5-VEGFsi以最适感染复数(multiplicity of infection,MOI)感染K562细胞72 h后,RT-PCR及ELISA方法检测VEGF mRNA及细胞培养液上清VEGF蛋白表达、MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪测定细胞凋亡率.结果 成功构建重组腺病毒Ad5-VEGFsi,氯化铯梯度离心纯化获得重组腺病毒滴度约4.6×1011pfu/ml;Ad5-VEGFsi感染K562细胞72 h后,VEGF mRNA水平与对照组相比下降了66.55%(P＜0.01),蛋白浓度下降了 86.03%(P＜0.01).感染Ad5-VEGFsi后K562细胞生长明显受到抑制,且细胞的凋亡率也较对照组增加了13.89%(P＜0.01).结论 重组腺病毒腺Ad5-VEGFsi可明显抑制人白血病K562细胞VEGF的表达,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.     

皱襞三切口薄皮瓣打包加压法治疗严重腋臭

目的 探讨皱襞三切口薄皮瓣打包加压法在治疗严重腋臭中的应用.方法 选择89例严重腋臭患者,在腋毛区沿腋皱襞设计三条线,肿胀麻醉下切开第一、二条线形成桥状皮瓣,于第二、三条线之间切除部分皮肤,皮下剥离,将皮瓣及周边腋毛区皮肤修剪成厚中厚皮片,修剪皮下脂肪,缝合皮肤,放置引流条,打包加压固定.结果 87例皮瓣成活良好,2例切缘营养不良,经神灯照射后成活良好;随访6个月,痊愈率为98.88%(88/89);无活动受限,术后瘢痕均不明显,痛触觉减退面积较小,治疗效果满意.结论 皱襞三切口薄皮瓣打包加压法可彻底切除和修剪腋毛区,缩小痛触觉减退区域,术后并发症少,疗效确切,适合严重腋臭患者.     

逆行复合组织瓣双荷包法纠正重度乳头内陷

目的：探讨逆行复合组织瓣双荷包法纠正重度乳头内陷的临床应用。方法：设计位于乳晕第四象限蒂为乳头根部的三角形复合组织瓣,方向斜向外下方,顶点不超过乳晕边缘,松解乳头基底部,切断牵拉的纤维条索,上提乳头,将三角形复合组织瓣去表皮,下拉填充于乳头基底部,在距乳头0．8cm和1．5cm处,双重荷包缝合固定。结果：42例乳头内陷患者术后随访1年,均获得满意疗效。乳头横径、纵径、高度及外观明显改善。结论：该术式矫正乳头内陷具有有切口小、创伤轻微、操作简单易行、效果确切、不易复发和并发症少等优点。     

Exendin-4促进小鼠脂肪干细胞向成骨细胞分化

目的探讨艾塞那肽-4(exendin-4)能否促进脂肪干细胞向成骨细胞分化及分子机制。方法体外培养鉴定脂肪干细胞,通过脂肪干细胞的多向分化能力验证脂肪干细胞。给予脂肪干细胞exendin-4刺激,观察成骨相关基因蛋白的表达。结果 Exendin-4诱导脂肪干细胞向成骨细胞分化抑制向脂肪细胞分化。不仅如此,exendin-4可能通过提高PI3K、 Akt和β-catenin的表达促进脂肪干细胞(ADSCs)向成骨细胞分化。结论 Exendin-4促进小鼠脂肪干细胞(ADSCs)向成骨细胞分化,可能是通过激活GLP-1R通路。     

伏立康唑治疗侵袭性真菌感染有效性及安全性的Meta分析

目的系统评价伏立康唑治疗侵袭性真菌感染的有效性及安全性。方法检索PubMed、Co-chrane Library、EMbase、CNKI、CBM、VIP数据库,收集截至2011年12月已发表的伏立康唑治疗深部真菌感染的随机对照试验。由2名研究者按照纳入标准独立筛选文献、提取资料和评价质量后,采取RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果共纳入研究7项,676例。Meta分析结果提示,伏立康唑、两性霉素B的治疗成功率比较,差异无统计学意义;伏立康唑、伊曲康唑的治疗成功率、不良反应发生率比较,差异均无统计学意义;伏立康唑治疗成功率略高于米卡芬净组(P=0.11),但差异无统计学意义,其不良反应发生率高于米卡芬净(P=0.000 6)。结论伏立康唑在治疗侵袭性真菌感染中表现出高效低毒的特点。随着其临床应用愈加广泛,其价值有待进一步检验。     

腮腺透明细胞型嗜酸细胞腺瘤1例

腮腺嗜酸细胞腺瘤是一种涎腺良性肿瘤,其发病率低,既往文献少有报道,而以透明细胞为主型的嗜酸细胞腺瘤病例报道更为少见。该肿瘤临床表现及影像学检查无特异性,在诊疗中与涎腺其他肿瘤如嗜酸细胞癌以及转移性肾透明细胞癌鉴别困难,易导致误诊误治。为探讨涎腺透明细胞为主型嗜酸细胞腺瘤的诊断和治疗,提高对该肿瘤的临床病理组织学特征的认识,现报告1例腮腺透明细胞为主型嗜酸细胞腺瘤病例,并对以往相关文献进行回顾复习。     

CRNDE靶向调控miR-186影响胶质瘤干细胞生物学行为的分子机制

【目的】 存在于脑胶质瘤组织中的胶质瘤干细胞(GSCs)与恶性脑胶质瘤的发生、发展和复发密切相关。长链非编码RNA (lncRNA)的转录和功能失调能够参与肿瘤的发生发展。结直肠肿瘤差别表达基因(CRNDE)属于lncRNA,有报道CRNDE在胶质瘤组织中的表达上调。本项目旨在研究GSCs中异常表达的CRNDE是否影响GSCs的生物学行为及相关的分子机制。 【方法】 Real-time PCR检测GSCs和non-GSCs中CRNDE和miR-186的表达水平以及CRNDE对miR-186的成熟体、初级转录本和前体表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证CRNDE与miR-186以及miR-186与靶基因间存在靶向结合。RIP和RNA pull-down实验检测CRNDE与miR-186和Ago2之间的相互作用。CCK-8细胞活力检测、流式细胞术、transwell迁移、侵袭实验验证CRNDE和miR-186对GSCs的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。建立GSCs裸鼠移植瘤模型验证Lv-shCRNDE和Lv-miR-186单独或联合应用对人GSCs裸鼠移植瘤的生长及荷瘤鼠生存时间的影响。 【结果】 GSCs中CRNDE的表达较non-GSCs组显著上调;GSCs中miR-186的表达水平较non-GSCs组显著下调。沉默CRNDE显著抑制了GSCs的增殖、凋亡、迁移和侵袭。通过生物信息学软件分析,预测到CRNDE与miR-186存在结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验证明了CRNDE与miR-186的结合作用,明确了结合位点。在GSCs中,CRNDE能够结合Ago2,并与miR-186存在相互作用。下调GSCs中CRNDE的表达能显著上调miR-186的成熟体表达,而初级转录本和前体的表达均未见明显变化。过表达miR-186显著抑制了与GSCs增殖、凋亡、迁移和侵袭相关蛋白XIAP、noggin、MAPK1和PAK7的表达;沉默miR-186则显著上调了上述蛋白的表达。miR-186能够靶向结合XIAP、noggin、MAPK1和PAK7基因的3'非翻译区。沉默CRNDE后通过上调miR-186的表达,促进miR-186对靶基因XIAP、Noggin、MAPK1和PAK7的负性调控,抑制了GSCs的增殖、凋亡、迁移和侵袭;过表达CRNDE结果则与之相反。与Lv-shCRNDE和Lv-miR-186单用相比,两者联合应用能够显著抑制人GSCs裸鼠移植瘤的生长,延长荷瘤鼠生存时间。 【结论】 CRNDE通过结合并负性调控miR-186的表达,减弱miR-186对靶基因XIAP、Noggin、MAPK1、PAK7的调节,影响GSCs的生物学行为。该研究能够为脑胶质瘤的治疗和药物研发提供新策略。     

靶向血管内皮生长因子siRNA对K562细胞凋亡及survivin表达的影响

目的 应用腺病毒介导的血管内皮生长因子(VEGF) siRNA沉默K562细胞中VEGF的表达,观察其对K562细胞凋亡及凋亡抑制基因survivin表达的影响.方法 应用成功构建的携带特异性VEGF siRNA的重组腺病毒(Ad5-VEGF siRNA)感染K562细胞,实验分为3组:实验组(K562/Ad5-VEGF siRNA组)、空载体组(K562/Ad5组)、对照组(K562组).通过RT-PCR法检测细胞内VEGF及survivin mRNA的表达,ELISA法检测细胞培养上清中VEGF蛋白表达,Western blot法检测细胞survivin蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 实验组细胞VEGF及survivin mRNA表达水平较对照组均有明显降低(P＜0.01),且细胞培养上清中VEGF蛋白表达水平[(1121±15)pg/ml]低于空载体组[(1290±28)pg/ml]和对照组[(1303±28)pg/ml](P＜0.01).Western blot法检测结果显示,实验组survivin蛋白表达水平(0.26 ± 0.11)较对照组(0.74±0.10)也显著降低(P＜0.01).实验组细胞凋亡率与对照组比较明显增加(P＜0.01).结论 应用RNA干扰沉默K562细胞中VEGF基因表达后,survivin的表达也随之降低,同时细胞凋亡率相应增加.VEGF可诱导K562细胞中survivin基因表达,可能是survivin基因表达的上游调控因子.