生物免疫疗法治疗腹部恶性肿瘤13例分析

目的：探讨生物学治疗在腹部恶性肿瘤中的作用。方法：对13例腹部恶性肿瘤患者经手术、生物免疫（DC、CIK、Tal）等方法治疗。结果：13例经手术均获成功。在生物免疫治疗方法下观察6～8个月,13例除1例死于多器官功能衰竭外,其余均良好生存,血液中免疫细胞大幅增加,肿瘤标记物下降（P〈0.05）,复查未发现肿瘤复发及转移情况。结论：生物免疫治疗作为恶性肿瘤新兴疗法,在腹部恶性肿瘤患者的治疗方面发挥了优越的作用。     

老年急性喉炎1例诊疗分析

老年急性喉炎起病和发病过程不典型,症状易被基础疾病掩盖,故诊断有一定困难。现就1例老年急性喉炎的诊疗过程分析如下。 1病历摘要 男,87岁。因多次摔倒2个月余以腔隙性脑梗死、短暂性脑缺血发作于2009-02-23收入院,既往无心、肺基础疾病。住院第7天因受凉出现发热（37.3～38.3℃）,四肢肌肉关节酸痛,乏力,轻度咳嗽及轻微吞咽痛,无咳痰、声嘶、呼吸费力等不适。查体：精神差,T 37.6℃,R 20次/m in,心肺腹（-）。神经系统：认知力减退,右瞳孔3 mm,对光反射减弱,左瞳孔2 mm;伸舌右偏;四肢肌张力增高,双上肢肌力Ⅴ-级,双下肢肌力Ⅲ级;四肢肌腱反射（＋＋＋）,双侧Chaddock征（＋）,右B ab insk i征（＋）;脑膜刺激征（-）。头颅M R I：（1）双侧侧脑室周围轻度缺血性改变,脑桥多发腔梗;（2）脑萎缩;（3）双侧额、颞、顶部硬膜下积液;（4）颅内动脉僵硬、纤细,考虑脑内动脉粥样硬化。血常规：W BC 12.36×109/L,N 0.86;床旁胸片见左下肺片絮状阴影;诊断左下肺感染,予哌拉西林钠三唑巴坦针静脉滴注。4 d后白细胞计数正常,中性偏高,患者出现腹泻,大便培养为真菌,     

传导性角膜成形术后眼内压的变化

目的讨探传导性角膜成形术(conductive kerato-plasty,CK)对眼压测量的可能影响。方法在术前和术后第1周、第4周、第12周,分别用非接触式眼压计(non-contacttonometer,NCT)和Goldmann眼压计(goldmann applanationtonometer,GAT)测量接受CK治疗的20例36眼的眼压,所得结果采用SPSS 11.0软件进行统计分析。结果和术前比较,CK术后NCT、GAT以及Schiotz眼压计测量值显著降低。眼压变化与年龄、性别、角膜曲率及拟矫正屈光度无关。DCT则无显著性差异。结论CK术后压平式眼压计测量眼压值偏低。为避免CK术后青光眼的误诊,不能按传统的正常眼压值衡量术后结果。     

不同剂量中波紫外线对HaCaT细胞p62及自噬体形成关键基因Beclin-1、Atg12和Atg3的调控效应研究

【摘要】 目的 探讨不同剂量中波紫外线（UVB）照射培养的HaCaT细胞后不同时间点对p62、Beclin-1、Atg12和Atg3蛋白表达水平的调控效应。 方法 使用4.5、10和50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞,照射后加入新鲜培养基继续培养4 h和12 h,同时设相同处理但不照射UVB的细胞为对照细胞。另设观察组,在照射后立即（包括对照细胞）,使用含蛋白酶抑制剂E64D（10 μg/L）和胃酶抑素（10 μg/L）的培养基孵育4 h和12 h,以阻断对p62的降解。使用Western印迹法测定HaCaT细胞p62、Beclin-1、Atg12和Atg3蛋白的表达水平。 结果 50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后4 h,p62表达水平（p62与内参的比值为0.473 ± 0.022）较对照细胞（0.246 ± 0.038）升高（t = 15.27,P < 0.05）;阻断溶酶体后,细胞新生p62的水平（0.445 ± 0.035）与阻断溶酶体的对照（0.244 ± 0.016）相比,仍为上调（t = 7.62,P < 0.05）。在4.5 mJ/cm2 UVB照射细胞后12 h,与对照（0.254 ± 0.035）相比,HaCaT细胞p62表达上调（0.497 ± 0.047,t = 22.89,P < 0.05）;阻断溶酶体后,与阻断溶酶体的对照（0.257 ± 0.025）相比,p62表达水平仍然上调（0.548 ± 0.051,t = 17.42,P < 0.05）。4.5 mJ/cm2和50 mJ/cm2 UVB照射后4 h和12 h,对照细胞和照射细胞间的Beclin-1、Atg12和Atg3的表达差异均无统计学意义（P > 0.05）,阻止溶酶体对自噬体内容物的降解也未能发现Beclin-1、Atg12和Atg3的表达差异（P > 0.05）。 结论 p62表达在不同剂量UVB照射和照射后不同时间存在差异调控,并且这种调控效应与自噬体形成可能没有生物学联系。     

携带HPV11基因组的HaCaT细胞APOBEC3s表达及α干扰素的调控

目的 探讨携带HPV11基因组的HaCaT细胞(HPV11.HaCaT)中载脂蛋白B信使RNA编辑酶催化多肽样蛋白3家族(APOBEC3s,A3s)mRNA表达、主要A3蛋白在细胞内的表达、分布,以及外源性α干扰素对其调节.方法 qRT-PCR检测HPV11.HaCaT细胞中A3A、A3B、A3C和A3H mRNA的基础表达水平,并与正常HaCaT细胞作比较;分别用不同浓度的重组人IFN-α2b (rhIFN-α2b)作用于HaCaT、HPV11.HaCaT、Hela细胞6、24、48 h后,qRT-PCR检测A3A、A3B、A3C和A3H mRNA表达水平.细胞免疫荧光染色法观察rhIFN-d2b刺激6h时,A3A蛋白在3种细胞中的表达和分布情况.结果 HPV 11.HaCaT细胞内A3A、A3B、A3C mRNA表达量均明显高于正常HaCaT细胞(P＜0.05).在不同浓度rhIFN-α2b刺激下,3种细胞4种A3成员mRNA表达趋势存在差异,其中A3A升高最为明显.与各自正常对照组相比,106 IU/ml rhIFN-α2b刺激6h时3种细胞的A3A mRNA表达明显升高,差异有统计学意义(HaCaT细胞35.77±5.01比1.00±0.05,P＜ 0.05;HPV11.HaCaT细胞15.34±2.14比0.99±0.01,P＜0.05;Hela 24.60±5.45比0.97±0.03,P＜0.05),而A3B、A3C和A3HmRNA相对表达量均低于10倍.经106 IU/ml rhIFN-α2b处理6h后,3种细胞胞质和胞核中均可见到A3A蛋白的阳性染色增加.结论 HPV11进入HaCaT细胞后,可激活A3s(尤其是A3A)免疫系统.α干扰素诱导A3A的高表达可能是其发挥免疫调控功能的机制之一.     

高氧液体在小儿单肺通气麻醉手术中应用的临床研究

目的探讨高氧液体在小儿单肺通气麻醉手术中应用效果。方法选择2014年7月至2016年7月我院行麻醉手术的单肺通气患儿30例,均行肺叶切除术,通过随机数表法分为A组(n=15)和B组(n=15),A组患儿在单肺通气后通过30 ml(kg·h)的速度,恒速输入醋酸林格高氧液体,B组患儿用同样的速度输入等量的醋酸林格液体。比较两组患儿术中血气分析、炎性因子变化以及术后情况。结果两组患儿在T0(通气前)、T1(通气10 min)、T2(通气30 min)、T3(通气60 min)、T4(通气2 h)时,p H、动脉氧分压(PaO_2)、混合静脉血氧分压(PvO_2)、混合静脉血氧饱和度(PvO_2)水平均发生不同程度下降(P0.05),但A组在T1、T2、T3、T4时,pH、PaO_2、、水平均高于B组(P0.05);两组患儿T1、T2、T3、T4时肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6、IL-8、IL-10、丙二醛(MDA)水平较T0时比较,均出现不同程度的升高(P0.05);A组在T1、T2、T3、T4时,TNF-α、IL-6、IL-8、MDA均比B组低(P0.05);A组苏醒时间短于B组(P0.05),躁动发生率比B组低(P0.05)。结论在小儿麻醉手术行单肺通气后输注高氧液体,可有效预防低氧血症的发生,减轻炎性反应,安全性高,值得应用推广。     

Diaton眼压计与非接触式眼压计测量眼压的比较

目的比较Diaton眼压计（DT）与非接触式眼压计（NCT）测量眼压的差异。方法分别使用DT和NCT测量患者眼压,对测量值进行统计学分析,多元相关分析研究眼压测量值与年龄、角膜曲率、等效球镜度、中央角膜厚度之间的相关性。结果 DT与NCT的平均眼压测量值分别为（13.81±3.27）mmHg和（15.80±3.48）mmHg,差异有统计学意义（P〈0.05）,二者测量值的相关系数r=0.438,P〈0.05,两种眼压计的测量差值随中央角膜厚度增加而升高;将所有患者依照中央角膜厚度分为3组,NCT测量值在3组间有显著差异,而NCT测量值在3组间无差异;NCT测量值与年龄和中央角膜厚度呈正相关,而DT测量值与年龄、角膜曲率、等效球镜度、中央角膜厚度均不相关。结论 Diaton眼压计测量值不受年龄和中央角膜厚度影响,与非接触式眼压计测量值呈正相关,可应用于临床普查和诊断。     

人乳头瘤病毒11型基因组DNA在HaCaT株中的转染

目的 探讨转染与筛选技术获取稳定携带有HPV11基因组DNA的细胞的可能性。方法 对含有pBR322.HPV11质粒的大肠杆菌培养扩增,然后进行质粒的提取与纯化,并用限制性内切酶BamHⅠ切割下HPV11全长基因。低熔点琼脂糖回收后,用T4 DNA连接酶进行线状DNA的自身环化,再与pIK-neo质粒、用Lipofectamine试剂共转染HaCaT细胞。通过G418筛选阳性细胞克隆,将阳性克隆细胞合并与培养扩增后,用FQ-PCR技术检测细胞内HPV11DNA的存在,用巢式RT-PCR技术检测HPV11 E1^E4 mRNA的表达。结果 HPV11型基因组DNA转染至HaCaT细胞后,经G418筛选约2周,培养皿内即可见对G418抵抗的阳性细胞克隆出现,其形态与普通HaCaT细胞相似。用FQ-PCR在筛选后的HaCaT细胞中检测到HPV11DNA的存在,平均病毒DNA载量为（15.9 ± 16.8）拷贝/细胞。传代3次后细胞内病毒DNA无丢失,载量为（23.9 ± 1.1）拷贝/细胞。与未传代细胞相比,二者间差异无统计学意义（t = -0.822,P > 0.05）。巢式RT-PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后检测到HPV11 E1^E4 mRNA表达的特异性628 bp条带。结论 HPV11基因组DNA可通过脂质体转染法成功导入HaCaT细胞内,通过筛选可获得阳性细胞,且经3次传代后HPV11DNA仍然存在。     

小檗碱衍生物HB-13抗单纯疱疹病毒1型豚鼠皮肤感染的疗效

目的:评价小檗碱衍生物HB-13凝胶治疗单纯疱疹病毒1 型(herpes simplex virus, HSV-1)豚鼠皮肤感染的疗效.方法:用HSV-1在豚鼠皮肤造模,感染后1小时开始局部给药,每日2次,连续7天.同时以阿昔洛韦凝胶和喷昔洛韦乳膏阳性对照,及凝胶基质和空白对照.结果:与空白对照相比,0.5% HB-13凝胶可减轻皮损评分,促进结痂,但不能缩短病程.结论:0.5% HB-13凝胶对HSV-1感染有明显减轻临床症状的作用.