粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因修饰的树突状细胞疫苗增强体外抗肿瘤免疫效应

Objective To investigate if granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) gene-modified dendritic cells ( DC) enhance antitumor immunity in vitro. Methods Mice were injected with chemokine ligand 3 (CCL3) via the tail vein. Fresh B220-CD11c+ cells were sorted from the peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and cultured into DCs by cytokines. DCs were transfected with AdGM-CSF gene at different ratios of multiplicity of infection ( MOI) to determine the optimal gene transfection conditions, and the expression of GM-CSF was detected after transfection. The variation of GM-CSF gene-modifiedDCs were analyzed by morphological examination, phenotype analysis, and mixed lymphocyte reaction (MLR). DCs were loaded with gastric cancer antigen obtained by freezing and thawing method. The killing effect of DCs vaccine-stimulated T lymphocytes on gastric cancer cells was assessed by MTT assay. INF-γ production was determined with the INF-γ ELISA kit. Results B220- CD11c+ cells increased obviously after CCL3 injection. The ELISA results showed that after GM-CSF gene modification, DCs could produce high level of GM-CSF. When DCs were transfected with AdGM-CSF gene at MOI equal to 100, the GM-CSF level in culture supematants reached saturation [(130.00±12.61) pg/ml]. After GM-CSF gene-modification, DCs tend to be more maturated as detected by morphological observation and phenotype analysis. At the same time, the capacity of activating the proliferation of allogeneic T lymphocytes was enhanced greatly. T lymphocytes stimulated by DCs transfected with GM-CSF gene showed a specific killing effect on gastric carcinoma cells and produced high level of INF-γ[ ( 1245. 00±13. 75) pg/ml].Conclusion After GM-CSF gene modification, DCs can produce high level of GM-CSF, which tend to be more maturated, and the capacity of activating the proliferation of allogeneic T lymphocytes is enhanced greatly. GM-CSF gene modified DCs can induce specific CTL to target tumor cells in vitro.     

p27kip1在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的　研究p2 7kip1在原发性肝细胞癌 (HCC)中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组化S -P法检测 4 0例HCC、15例肝硬化组织和 5例正常肝组织石蜡标本中 p2 7kip1的表达。 结果　p2 7kip1蛋白在 4 0例HCC中表达阳性率为 32 .5 % (13/40 ) ,在 15例肝硬化组织中为 6 0 % (9/15 ) ,在 5例正常肝组织中为 80 % (4/5 )。p2 7kip1蛋白在HCC中的表达与其在肝硬化组织和正常肝组织中的表达相比有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,p2 7kip1蛋白与HCC的组织学分级、组织学类型、淋巴结转移、远处转移和生存期均有统计学差异。结论　p2 7kip1与HCC的发生、发展可能均有密切联系 ,p2 7kip1蛋白在一定程度上可判断患者的病情进展和预后。     

hTERT启动子驱动的HSV-TK基因重组腺病毒载体的构建和制备

目的构建人端粒酶逆转录酶启动子驱动的HSV-TK基因重组腺病毒的真核表达载体,为进一步研究其在体内外实验提供依据。方法PDC312-TP质粒和PSUCMV-TK质粒经EcoR I,Sal I酶切连接构建PDC312-TP-TK,将质粒PDC312-TP-TK与含有5型腺病毒右臂的质粒Pbhge3通过Lipofectamine 2000共转染至293细胞,经同源重组产生重组腺病毒PSG-TP-TK,PSG-TP-TK在293细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测其滴度。结果质粒PDC312-TP-TK经酶切鉴定正确,扩增得到的PSG-TP-TK经PCR扩增证实为hTERT启动子驱动的HSV-TK重组腺病毒,腺病毒滴度为1.9×1010pfu/ml。结论该实验为重组腺病毒PSG-TP-TK用于肿瘤的基因治疗打下了基础。     

45例功能性消化不良胃排空研究

目的　建立国人胃排空正常值 ,探讨口服不透X线银环标记物胶囊方法对功能性消化不良 (FD)患者的胃排空研究价值。方法　通过受试者于早 8时随标准试餐吞服一粒含 2 4枚银环标记物的胶囊 ,于 4h小时后摄仰卧位腹部平片 1张 ,记数胃内残留的标记物数 ,按公式计算 4小时胃排空率。对胃排空延迟的FD患者给予西沙必利口服治疗 4周后复查 4小时胃排空率 ,比较服药前后的变化。结果　正常人 4h胃排空率为 (94 .5± 5 .2 ) % ;4 5例FD患者中有 31例 (6 8.9% )胃排空延迟 ,服用西沙必利 4周后 2 4例 (78% )患者的胃排空缩短至正常 ,服药前后比较有显著性差异(P <0 .0 1)。结论　口服不透X线银环胶囊方法测定FD患者胃排空操作简便、准确可靠。FD患者有胃排空延迟的动力学特点 ,服用促动力药物治疗FD患者疗效显著     

常见血液病的脾切除治疗

全文介绍几种常见血液病共76例的脾切除治疗经验。认为只要术前适当纠正贫血、出血,改善周围血细胞,注意手术操作尤其是创面渗血,手术安全性较大,全组无1例手术死亡。然血液病病因复杂,疗效悬殊,以自身免疫性溶血性贫血、原发性血小板减少性紫癜较为理想。掌握手术指征尚是难题。副脾部位常有变异,应寻找切除,否则影响疗效。血小板增多宜重视,但不一定都发生血栓。     

胰腺真性囊肿14例临床分析

胰腺真性囊肿是指由胰腺组织上皮细胞发生的囊性病变,临床上较为少见。我院2000年1月至2005年12月共收治胰腺真性囊肿患者14例,现对其临床资料进行回顾性分析,旨在探讨其临床病理特点及诊治方法。临床资料1.一般资料:本组14例患者中男6例,女8例,年龄32~69岁,平均52.3岁。本组患     

自制经鼻空肠营养管在急性重症胰腺炎早期的应用

目的探讨早期经鼻空肠肠内营养(EN)在急性重症胰腺炎(ASP)中的应用原则、方法及疗效。方法23例ASP患者在临床综合治疗的前提下,早期放置自行研制的经鼻空肠肠内营养管给予肠内营养,观察实施EN前后营养疗效指标的变化并做对比分析。结果23例ASP患者,在入院或术后3~11 d,平均第7天给予肠内营养,其血清白蛋白升高,体重增加,呈正氮平衡。血清转氨酶下降,肝功能改善,血淀粉酶未见增高。结论ASP早期经鼻空肠肠腔内营养无创伤,痛苦小,安全有效,对于改善机体营养状况、增强免疫力,促进脏器功能恢复,减少并发症作用显著。ASP肠内营养应用遵循“肠道有功能应使用肠道的原则”。     

沈阳市2007-2011年春节期间狂犬病暴露情况分析

狂犬病是由狂犬病毒引起的急性致死性中枢神经系统感染的自然疫源性疾病,病死率接近100%,为了解春节期间辽宁省沈阳市人群对狂犬病知识的掌握情况,以及暴露后所采取的处理方法,对2007-2011年春节期间狂犬病暴露者进行调查.现将结果报告如下.     

腹茧症8例临床诊治体会

目的探讨腹茧症的诊治方法。方法回顾性分析8例腹茧症病例的临床资料。8例均经手术确诊，术中发现腹腔内广泛灰白色纤维膜如“蚕茧状”包裹全部小肠（5例）或部分小肠（3例）。行纤维膜切除及肠粘连松解术，其中部分肠切除吻合术2例，小肠减压术1例。结果8例患者均治愈，病理检查提示纤维组织增生，呈非特异性炎症改变。随访4个月至3年，全部患者均未再出现肠梗阻症状。结论腹茧症的临床表现缺乏特异性，术前诊断困难，影像学检查能为诊断提供一些线索。肠粘连松解术是治疗本病的有效方法。     

颈阔肌肌（皮）辨在口腔颌面部缺损修复的应用

本文介绍颈阔肌肌皮瓣用于修复口腔粘膜缺损和唇颊部皮肤缺损共２６例，就肌皮瓣切取类型与整复部位，一般资料与疗效以及优点等进行了讨论，最后认为阔肌肌皮瓣具有面积较大、肌薄质软、易于折转造型；位居表浅、接近面部、易于切取、供区不需植皮、简化了手术步骤；血液丰富，成活率高等优点，是修复口腔粘膜缺损应当首选的一个供区。但因肌瓣较薄，不适于凹陷性缺损的修复，对颈部有淋巴结转移，行根治性清扫术时，不宜采用。