应用超高灵敏度荧光显微成像及共聚焦显微成像观察光敏剂细胞内分布的对比研究

背景：光敏剂亚细胞分布研究多采用激光共聚焦显微镜来开展。激光共聚焦显微成像系统能够获得细节清晰的细胞断层荧光图像，可以进行精确的光敏剂亚细胞定位。但其样品准备过程复杂，费用不菲，而且对于荧光效率较低的光敏剂探测难度很大。目的：应用带像增强器的冷电感耦合装置(intensified charge-coupled device，ICCD)的超高灵敏度荧光显微成像系统及共聚焦显微成像进行光敏剂细胞内分布的对比研究，深入探讨光动力疗法的损伤机制，为拓展其在临床康复治疗领域的适应证奠定实验基础。设计：非随机非对照的实验研究。地点、材料和干预：实验地点为北京理工大学光电工程系实验室。传代培养内皮细胞、食管癌细胞和肺癌细胞，将不同浓度血卟啉单甲醚(hematoporphrin monomethyl ether，HMME)与细胞共同孵育不同时间。采用荧光显微镜及ICCD组成的荧光显微成像系统采集不同浓度及不同孵育时间条件下HMME的荧光图像，并采用计算机图像处理技术进行图像增强、滤波后计算其细胞浆与细胞核的平均荧光强度比值。同时应用激光共聚焦显微镜图像采集进行对比。主要观察指标：不同荧光显微成像系统采集到的细胞的光敏剂荧光图像的细节特点及胞浆与胞核区域光强比值的对比观察。结果：HMME浓度为5mg／L时，荧光显微镜采集到HMME的荧光图像；HMME浓度升高到160mg／L，激光共聚焦显微镜获得HMME的荧光图像。两组图像的特点都为胞浆中荧光强度较高，细胞核区荧光较弱；细胞浆与细胞核的比值约为2～3：1。结论：荧光显微镜和ICCD采集细胞内光敏剂的荧光图像灵敏度高，方法可靠、实用，可用来对荧光效率较低的光敏剂进行细胞内分布研究。HMME较多分布在细胞质中，细胞核吸收较少。从而得出HMME介导的内皮细胞及肺癌细胞光动力损伤的初次损伤位点可能是细胞浆内多种细胞器。     

竹红菌乙素-光动力学疗法治疗脉络膜新生血管方案的初步探讨

目的 观察不同参数的竹红菌乙素．光动力学疗法(HB-PDT)对青紫蓝兔脉络膜毛细血管层的生物学效应以及对视网膜的非选择性损伤，为临床应用HB-PDT疗法治疗脉络膜新生血管(CNV)提供依据。方法 青紫蓝兔18只，随机分为6组，每组3只。其中药物对照组耳缘静脉注射HBl．5mg／kg，不照激光。激光对照组耳缘静脉注入生理盐水2．0mg／kg，PDTI-Ⅳ组耳缘静脉注射HB各10mg／kg，分别以能量密度为240、14．4、30．0、48．0和56．OJ／cm^2，波长为532nm的倍频YAG激光照射兔眼底。观察兔眼底变化、荧光素渗漏情况及视网膜、RPE、视细胞、脉络膜的组织病理学变化。结果 在PDT后第1天，单纯照光组和单纯药物对照组眼底和组织学无改变；HB剂量为10mg／kg，功率密度120-700mW／cm^2、能量密度14．4—56．0J／cm^2的532nm激光照射，可以导致脉络膜毛细血管层的闭塞，视网膜外层损伤，内层无明显改变。HB剂量10mg／kg，功率密度300—600mW／cm^2，照光时间80—100s，能量密度30—50J／cm^2是适宜的治疗参数。结论 HB对视网膜和脉络膜的生物学效应与光敏剂的剂量和激光照光时间、功率密度、能量密度密切相关。生物学效应与能量密度呈量效依赖性关系。     

肺癌组织血卟啉单甲醚激光诱发药物荧光与激光诱发自体荧光的光谱区别

目的探讨新型光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)激光诱发药物荧光与激光诱发自体荧光在肺癌组织中的光谱区别。方法15例肺癌病人(药物组)术前3h静脉注射HMME3mg/kg,20例肺癌病人(对照组)术前不注射HMME,使用三倍频Nd∶YAG激光(波长355nm)和多光道分析仪(OMA)对切除肺癌标本的癌组织进行激光诱发荧光光谱测定,82个检测点行组织病理学检查。结果(1)两组肺癌组织主峰(462.4nm±7.1nm与463.6nm±4.9nm)差异无显著意义;(2)药物组于623.4nm±1.6nm处有一明显的特征峰(即药物峰),对照组于主峰右侧平滑下降;(3)以600nm～623nm波段的斜率表示两组特征,结果药物组斜率为负值,对照组斜率为正值,负值越大,说明药物峰越高。结论新型光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)激光诱发药物荧光与激光诱发自体荧光在肺癌组织中的光谱有明显区别。     

药品现代物流管理模式探讨

随着经济全球化和信息技术的迅速发展,药品物流现代化管理具有规模化、集约化、规范化的经营管理优势,是我国药品营销发展的趋势, 也是企业采用先进的技术手段,提高经营管理水平,增强企业的生存和竞争能力的需要。为此, 国家食品药品监督管理局审时度势于2004年3月印发的《开办药品批发企业验收实施标准(试     

应用超高灵敏度荧光显微成像及共聚焦显微成像观察光敏剂细胞内分布的对比研究

背景光敏剂亚细胞分布研究多采用激光共聚焦显微镜来开展.激光共聚焦显微成像系统能够获得细节清晰的细胞断层荧光图像,可以进行精确的光敏剂亚细胞定位.但其样品准备过程复杂,费用不菲,而且对于荧光效率较低的光敏剂探测难度很大.目的应用带像增强器的冷电感耦合装置(intensified charge-coupled device,ICCD)的超高灵敏度荧光显微成像系统及共聚焦显微成像进行光敏剂细胞内分布的对比研究,深入探讨光动力疗法的损伤机制,为拓展其在临床康复治疗领域的适应证奠定实验基础.设计非随机非对照的实验研究.地点、材料和干预实验地点为北京理工大学光电工程系实验室.传代培养内皮细胞、食管癌细胞和肺癌细胞,将不同浓度血卟啉单甲醚(hematoporphrin monomethyl ether,HMME)与细胞共同孵育不同时间.采用荧光显微镜及ICCD组成的荧光显微成像系统采集不同浓度及不同孵育时间条件下HMME的荧光图像,并采用计算机图像处理技术进行图像增强、滤波后计算其细胞浆与细胞核的平均荧光强度比值.同时应用激光共聚焦显微镜图像采集进行对比.主要观察指标不同荧光显微成像系统采集到的细胞的光敏剂荧光图像的细节特点及胞浆与胞核区域光强比值的对比观察.结果HMME浓度为5 mg/L时,荧光显微镜采集到HMME的荧光图像;HMME浓度升高到160 mg/L,激光共聚焦显微镜获得HMME的荧光图像.两组图像的特点都为胞浆中荧光强度较高,细胞核区荧光较弱;细胞浆与细胞核的比值约为2～31.结论荧光显微镜和ICCD采集细胞内光敏剂的荧光图像灵敏度高,方法可靠、实用,可用来对荧光效率较低的光敏剂进行细胞内分布研究.HMME较多分布在细胞质中,细胞核吸收较少.从而得出HMME介导的内皮细胞及肺癌细胞光动力损伤的初次损伤位点可能是细胞浆内多种细胞器.