人工全髋关节置换股骨近端广泛骨溶解在男性以及女性患者中的定量分析

目的 研究人工全关节置换术后股骨近端骨溶解问题。方法 对52例患者56髋进行随访，男性组26例28髋，女性组26例28髋，两组患者在年龄、所用假体、术前诊断方面采用匹配性研究。最短随访时间9个月，最长10年6个月。并用计算机图像分析的方法定量研究骨密度改变的规律。结果 52例（56髋）患者股骨近端均发生不同程度骨溶解，最早术后9个月，术后1-5年内骨溶解改变最明显，第6年呈减缓趋势。结论 人工全髋关节置换术后骨溶解在男性以及女性患者中都存在，二者无显著差异（P〉0．05）。     

关于在骨科实习教学中实施PBL教学法的思考

为适应现代社会对医学人才的要求,在骨科的实习教学中应注重学生创新能力的培养。打破学科界限,使学生在有限的时间内学到更多的科学知识、解决问题的技能和自主学习的技能。我科通过改变教师的教学观念、调整课程的设置内容及教学方法,把教学活动的主体"以学科为中心"转移到"以学生为中心"的轨道上来,教师的角色发生了转变,由知识传授者转变成为探索者和引领者,学生在主动学习的过程中体会到了探索者的乐趣。     

加强骨科实习医生临床技能的培养

骨科实习医生的临床技能培养影响到学员将来毕业后作为一名合格医生的能力,在整个教学过程中尤显重要。分析了影响实习医生临床技能培养的诸多因素:教和学忽视临床技能的训练;医院管理层对实习教学不够重视;临床带教方法陈旧,实习生缺乏主动性;骨科专科性强使学员产生畏难情绪等。并针对以上问题提出了相应的对策。     

人破骨细胞分化因子(ODF)的克隆和序列分析

目的克隆人破骨细胞分化因子(ODF)基因并进行序列分析。方法以人骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板,采用RT-PCR方法得到人ODF的编码区cDNA,克隆至载体pUC19中,酶切鉴定后进行序列分析。结果获得人ODF编码区基因和重组质粒pUC19-ODF,DNA序列分析证实获得了ODF基因,其序列和文献报道一致。结论采用基因克隆的方法得到人OPG基因,为进一步进行其结构和功能研究打下了基础。     

微创经皮并结合伤椎椎弓根螺钉固定治疗胸腰椎骨折

[目的]探讨结合伤椎椎弓根螺钉内固定的经皮微创治疗胸腰椎骨折的疗效。[方法]回顾性分析2010年4月～2012年3月30例胸腰椎骨折患者采用经皮空心椎弓根螺钉固定患者疗效,均采用结合伤椎的6钉固定。随访时间最短8周,最长22个月,平均14个月。交通事故伤19例,摔伤11例,平均年龄43岁。手术方法采用经皮椎弓根螺钉结合伤椎短螺钉固定复位术。所有患者术前均采用TLICS评分。对患者手术前后VAS评分,ODI指数,术中出血,术后住院时间,后凸畸形矫正情况等进行统计。[结果]本组病例术中出血量、术后住院时间、术前术后VAS评分、ODI指数等均有显著统计学差异(P<0.05)。术前与术后影像学比较,矢状位后凸Cobb角、伤椎自身成角、矢状指数、伤椎椎体前缘高度均有显著性改善(P<0.05)。[结论]结合伤椎内固定的微创经皮椎弓根螺钉内固定术具有出血少、住院时间短、术后并发症少等优点,对伤椎畸形的矫正和内固定的效果满意,具有与开放手术相同的疗效。     

人survivin蛋白的表达、纯化与单克隆抗体制备

目的:表达人survivin重组蛋白并制备单克隆抗体.方法:表达含有survivin基因的重组质粒pRSETB-survivin,表达人survivin重组蛋白,以此为抗原,常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS21细胞融合,得稳定分泌survivin mAb的杂交瘤细胞株,ELISA检测mAb的相对亲和力,Western blot检测mAb的特异性.间接免疫荧光观察骨肉瘤细胞中survivin的表达情况.结果:重组载体pRSETB-survivin转化入大肠杆菌BL21中表达所得蛋白经Western blot验证为目的蛋白.筛选出2株能稳定分泌特异性抗人survivin的mAb杂交瘤细胞株,免疫球蛋白亚类均为IgG类;单克隆抗体的亲和常数为S1 1.52×10-9mol/L,S2 2.31×10-9mol/L.Western blot结果显示,2株单抗识别相对分子质量为20 000的survivin单一条带,并发现在骨肉瘤细胞中survivin主要表达在胞浆内.结论:成功地表达出人survivin重组蛋白,制备出抗人survivin mAb,为进一步用于survivin的免疫学检测及骨肉瘤生物学治疗奠定了基础.     

腰椎椎弓根螺钉固定自体骨椎间融合相关因素的临床分析

目的：了解腰椎后路椎弓根螺钉固定、自体骨椎间植骨融合术的临床效果,以及与其相关的并发症等多种因素。方法：分析本科1998年3月至2005年12月得到随访的56例,男32,女24,平均年龄52岁（25—79岁）,平均随访时间4．3年（1个月～7年）。复习围手术期并发症、植骨融合情况、平均出血量和手术时间,并通过问卷和门诊方式评价临床效果。结果：手术并发症有感觉障碍（n=4,7．1％）,硬膜囊撕裂（n=3,5．4％）,深静脉血栓（DVT）形成（n=l,1．8％）,感染（n=1,1．8％）。椎间融合率为94．3％。单节段融合平均失血330ml,双节段600ml,二次手术病例失血量平均多110ml。单节段融合平均需时150分,双节段180分,二次手术的病例需时无明显差别。临床效果为优22．5％,良60．0％,可17．5％。优良率达82．5％。结论：手术并发症轻微,术后不留严重后遗症,注意轻柔操作,严格掌握手术适应症,术后严密观察和抗炎支持治疗是避免和减轻并发症的关键。了解手术过程,熟悉脊柱解剖,同时要标准化操作程序是减少术中出血、缩短手术时间的前提。应用后路减压切除下的椎板和棘突骨粒,椎间致密植骨内固定具有融合率高,无排斥反应,成本低和并发症少等优点,并可同时处理椎管内的情况,手术操作相对安全,还可减压与固定一次完成,术后能达到即刻稳定和持久融合。     

人骨肉瘤组织中survivin的表达

目的:研究survivin在骨肉瘤中的表达及其临床意义。方法:对74例骨肉瘤患者的临床病理资料进行回顾性分析。应用survivin抗体对上述患者的肿瘤组织切片进行免疫组织化学染色并进行统计学分析。结果:74例标本中58例为阳性,总阳性率为78.4%。survivin的表达与患者年龄、性别、骨肉瘤亚型无明显关系。但与Enneking外科分期有关,Ⅰ~ⅡA与ⅡB~Ⅲ之间,肿瘤survivin表达率差异明显(P<0.05)。结论:survivin在骨肉瘤组织中有较高比例的表达,并与肿瘤的外科分期密切相关。     

CD147在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的研究CD147在骨肉瘤中的表达情况,探讨其与临床病理及预后的关系。方法用S-P免疫组织化学染色法对76例骨肉瘤CD147蛋白的表达进行检测,并对其与骨肉瘤临床病理及预后的关系进行统计学分析。结果CD147在骨肉瘤中呈普遍阳性表达,对照组骨软骨瘤、骨瘤和正常骨基本不表达。CD147蛋白表达与Enneking分期和Price分级呈正相关,与软组织侵犯、WHO分型和预后相关。结论骨肉瘤CD147蛋白的表达与肿瘤恶性程度和侵袭性密切相关,对骨肉瘤诊断和预后评估具有重要价值。     

RNA干涉技术抑制骨肉瘤细胞MG63中Survivin基因表达的研究

目的：构建人Survivin基因的si RNA真核表达载体,探讨其对骨肉瘤细胞MG63中Survivin基因表达的干涉作用。方法：应用pSilencer3.0-H1neo构建Survivin特异性RNA干涉载体,转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞。HE染色观察细胞形态学变化,透射电镜观察细胞超微结构。应用RT-PCR、间接免疫荧光和western blot等方法检测Survivin的mRNA和蛋白水平变化。流式细胞仪检测细胞周期变化。结果：成功构建了Survivin基因si RNA真核表达载体PsvA和PsvB,获得了稳定转染的MG63细胞。与野生型MG63、阴性对照和MG63/PsvA细胞相比,MG63/PsvB细胞增殖反应明显减弱,差异有统计学意义,P〈0.01。MG63/PsvB细胞中Survivin mRNA和蛋白表达减少。与野生型MG63、阴性对照和MG63/PsvA细胞相比,MG63/PsvB凋亡率增加7倍（P〈0.01）。结论：特异性si RNA能够明显抑制Survivin基因在MG63细胞中的表达,为进一步研究survivn在MG63细胞中的生物学功能和作用机制奠定了基础。