青天葵甲醇提取物通过ERK信号通路诱导鼻咽癌CNE-2细胞凋亡

目的 研究青天葵甲醇提取物（Nervilia fordii methanol extracts，NFME）体外对鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法 MTT法检测不同浓度（0，0.25，0.5，1，2，3 mg·mL^-1）的NFME处理CNE-2细胞24，48 h对CNE-2细胞生长抑制率的影响；克隆原形成试验观察NFME对CNE-2细胞克隆形成率的影响；Hoechst凋亡染色观察NFME对CNE-2细胞凋亡的影响；Western blotting测定NFME作用下caspase-3、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化。结果 MTT试验结果显示，与对照组相比，在给药24 h时0.5 mg·mL^-1的NFME就能抑制CNE-2细胞的增殖（P<0.05），抑制率为12.64%。而在给药48 h时0.25 mg·mL^-1的NFME就能抑制CNE-2细胞增殖（P<0.05），抑制率为22.43%；克隆原形成能力试验表明，0.25 mg·mL^-1的NFME能够抑制CNE-2细胞集落的形成（P<0.05）；Hoechst33258凋亡染色观察到0.25 mg·mL^-1的NFME作用24 h能够观察到CNE-2细胞发生凋亡（P<0.05），凋亡率达到17.91%；Western blotting结果表明0.5 mg·mL^-1的NFME能使CNE-2细胞中caspase-3发生剪切，随着给药浓度增加其剪切作用越明显（P<0.01），同时0.5 mg·mL^-1的NFME能够降低CNE-2细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平（P<0.05）。结论 青天葵甲醇提取物能抑制鼻咽癌CNE-2细胞的增殖并诱导其发生凋亡，其作用机制可能与抑制ERK信号通路有关。     

青天葵甲醇提取物通过ERK通路抑制人肝癌细胞增殖并诱导其凋亡

目的 研究青天葵甲醇提取物（Nervilia fordii methanol extracts，NFME）体外对人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法 紫外-可见分光光度法测定青天葵中总黄酮和总多酚的含量；MTT法检测不同浓度（0，0.25，0.5，1，1.5，2 mg·mL^-1）NFME处理24 h对SMMC7721、HepG2和LO2细胞生长抑制率的影响；克隆形成试验观察NFME对SMMC7721和HepG2细胞克隆形成率的影响；Hoechst凋亡染色观察NFME对SMMC7721细胞凋亡的影响；流式细胞术检测NFME对SMMC7721细胞凋亡和细胞周期的影响；Western blotting测试NFME作用下caspase3、PARP、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化。结果 NFME中总多酚含量为（4.25±0.46）mg·g^-1，总黄酮含量为（4.72±0.13）mg·g^-1；MTT试验结果显示，与对照组相比，在给药24 h时0.5 mg·mL^-1的NFME就能抑制SMMC7721和HepG2细胞的增殖（P<0.001）；克隆形成试验表明，0.125 mg·mL^-1的NFME能够抑制SMMC7721和HepG2细胞集落的形成（P<0.001）；Hoechst凋亡染色观察到0.25 mg·mL^-1的NFME作用24 h能够观察到SMMC7721细胞发生凋亡（P<0.05）；流式细胞试验结果证实0.5 mg·mL^-1的NFME能够诱导SMMC7721细胞的凋亡（P<0.01），凋亡率14.43%，阻滞细胞周期于S期；Western blotting结果表明NFME能使SMMC7721细胞中caspase3发生剪切，随着给药浓度增加其剪切作用越明显（P<0.05），活化的caspase3剪切下游PARP的表达；同时NFME能够降低SMMC7721细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平（P<0.05）。结论 NFME能抑制人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的活性并诱导其发生凋亡，其作用机制可能与抑制ERK信号通路从而诱导细胞凋亡有关。     

甘草酸制剂对阿霉素所致小鼠心脏及肝脏损伤的抑制作用研究

目的 分析甘草酸制剂对阿霉素（ADM）所致小鼠心脏、肝脏损伤的抑制作用及机制。 方法 选择小鼠 60 只，按随机数字表法分为正常对照组、ADM 组、异甘草酸镁（MgIG）组，每组 20 只。 MgIG 组给予MgIG（40 mg/kg）腹腔注射，连续 10 日；第 8 日下午 MgIG 组、ADM 组给予 ADM（30 mg/kg）腹腔注射，正常对照组给予等体积生理盐水腹腔注射；第 10 日下午股动脉采血，离心后取血清，经全自动生化分析仪检测肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、AST、ALT 水平，利用试剂盒计算出超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力及丙二醛（MDA）含量，取心脏、肝脏组织进行 Bax、Bcl-2、Caspase-3、NF-κB p65 蛋白 Western Blot 检测及凋亡细胞的 TUNEL 检测。 结果 与正常对照组比较，ADM 组小鼠血清 CK、CK-MB、LDH、AST、ALT、MDA 水平升高（P<0.01），SOD、GSH-Px 水平降低（P<0.01），心脏、肝脏组织中 Bax/Bcl-2、Caspase-3、NF-κB p65 蛋白表达升高P<0.01），小鼠心脏、肝脏组织中 TUNEL 阳性细胞明显增加。 与 ADM 组比较，MgIG 组小鼠血清 CK、CK-MB、LDH、AST、ALT、MDA水平降低（P<0.01），SOD、GSH-Px 水平升高（P<0.01），心脏、肝脏组织中 Bax/Bcl-2、Caspase-3、NF-κBp65 蛋白表达降低（P<0.01），小鼠心脏、肝脏组织中 TUNEL 阳性细胞数量减少（P<0.01）。 结论 甘草酸制剂对 ADM 所致小鼠心脏、肝脏损伤具有明显的抑制作用，其可能与增强心肌及肝细胞的抗氧化能力和抑制凋亡有关。