17β-雌二醇对CNE2细胞κ阿片受体表达的抑制作用

目的观察雌激素对κ阿片肽受体(κOR)mRNA含量和蛋白表达的调节作用.方法采用半定量RT-PCR和Western blot方法,检测17β-雌二醇作用24~72h后CNE2细胞κOR mRNA含量和蛋白表达的变化.结果17β-雌二醇(1μmol/L)作用24h后,CNE2细胞表达κOR mRNA和蛋白明显降低,mRNA和蛋白含量分别下降到对照组的(49.2±7.66)%(P<0.01)和(60.8±8.36)%(P<0.01);作用时间延长到48h后,CNE2细胞κOR蛋白含量为对照组的(32.9±7.13)%(P<0.01);而延长到72h后,κOR mRNA和蛋白含量分别下降到对照组的(20.8±7.71)%(P<0.01)和(29.8±8.41)%(P<0.01).结论雌激素能够从转录水平抑制κOR在CNE2细胞的表达.     

他莫西芬促进HeLa 宫颈癌细胞系增殖

目的: 研究他莫西芬(tamoxifen, TAM)对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响. 方法: 应用生长曲线测定、MTT、流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜等技术. 结果: TAM（1×10-7mol*L-1）使HeLa细胞的生长曲线向上移动；TAM（1×10-8～1×10-6 mol*L-1）可显著促进HeLa细胞增殖；TAM（1×10-6 mol*L-1）促进细胞G1/S期转化，并显著促进细胞内Ca2+释放. 结论： TAM可能对子宫颈癌细胞的生长分化具有重要的调节作用,这种调节作用可能是通过影响细胞周期和胞内Ca2+水平而实现的.     

IL-2促进大鼠子宫平滑肌细胞增殖及IL-2R的表达

目的：研究白细胞介素-2(IL-2)对大鼠子宫平滑肌细胞增殖的影响，并探讨其可能的机制。方法：以培养的大鼠子宫平滑肌细胞进行了以下实验：以MTT比色法，测定IL-2对该细胞增殖的剂量效应；用流式细胞技术，观察IL-2对该细胞细胞周期各阶段DNA含量的影响；用激光共聚焦显微镜技术，检测IL-2对该细胞内Ca^2 水平的影响；用RT-PCR技术，检测IL-2R在该细胞的表达。结果：IL-2(10～1000U／ml)可显著促进大鼠子宫平滑肌细胞的增殖。用流式细胞技术检测细胞中DNA的含量发现，IL-2(100 U／ml)可提高该细胞由G1期进入S期的比例。激光共聚焦法检测到IL-2(100U／ml)可升高细胞内的Ca^2 浓度。RT-PCR技术检测到细胞表达IL-2R a mRNA、IL-2RβmRNA和lL-2R γmRNA三条链。结果：IL-2参与了对大鼠子宫平滑肌细胞增殖的调节，其促进增殖作用可能与该细胞周期DNA含量的变化、Ca^2 浓度的改变和IL-2R的表达有关。     

白介素8受体免疫阳性细胞在大鼠消化道的分布

目的 观察白介素-8受体（IL-8R）免疫阳性物质在大鼠消化道的存在和分布。方法 运用免疫组织化学方法对5只2-3mo龄雄性SD大鼠胃肠道进行形态学观察。结果 IL-8R免疫阳性物质广泛分布于正常大鼠消化道管壁的粘膜层内,细胞形态不一,大部分呈柱状或锥形,散在分布于腺上皮间。部分呈圆形或椭圆形,散在于粘膜固有层内。结论 首次证明IL-8R分布于消化道粘膜上皮细胞,提示IL-8在消化道局部可能具有生理调节作用。     

к阿片受体选择性激动剂U50488H对心肌梗死大鼠血管紧张素Ⅱ、内皮素和一氧化氮的影响

目的:采用选择性к阿片受体激动剂U50488H激活κ阿片受体,观察其对缺血再灌注大鼠心肌梗死面积以及血管紧张素Ⅱ、内皮素和NO的影响。方法:实验于2002-03/2003-05在解放军第四军医大学生理学教研室完成。选用健康雄性成年SD大鼠32只,随机分为4组(n=8):①对照组:未结扎冠状动脉左前降支。②缺血再灌注组:结扎冠状动脉左前降支,给予心肌缺血45min,并再灌注15min。③U50488H组:预先给予U50488H1.5mg/kg,15min后造模,方法同缺血再灌注组。④Nor-BNI组:在给予U50488H10min前先给予选择性к阿片受体阻断剂Nor-BNI0.5mg/kg,余同U50488H组。观察各组大鼠心肌超微结构、心肌梗死面积以及血浆肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶、血管紧张素Ⅱ、内皮素和一氧化氮等因子的水平。结果:32只大鼠进入结果分析。①心肌梗死面积:U50488H组小于缺血再灌注组和Nor-BNI组[(0.039±0.01),(0.085±0.01),(0.077±0.02)cm2,P<0.01],后两组差异不显著。②血浆中肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶活性:缺血再灌注组大鼠高于对照组(P<0.01),U50488H组明显低于缺血再灌注组(P<0.01)。③血管紧张素Ⅱ水平:缺血再灌注组大鼠高于对照组[(305±38),(134±26)ng/L,P<0.01],U50488H组明显低于缺血再灌注组[(197±23)ng/L,P<0.01]。④内皮素:缺血再灌注组大鼠高于对照组[(366±32),(179±24)ng/L,P<0.01],U50488H组明显低于缺血再灌注组[(242±27)ng/L,P<0.01]。⑤一氧化氮浓度:缺血再灌注组大鼠低于对照组[(21±6),(58±9)mol/L,P<0.01],U50488H组明显高于缺血再灌注组[(44±8)mol/L,P<0.01]。结论:U50488H可通过激活心脏к阿片受体发挥心脏保护作用,并可以减少心肌酶的漏出,下调血管紧张素Ⅱ、内皮素水平以及上调一氧化氮水平。     

岛素抗血清的制备及用SpA菌体提取其IgG的研究

借助于各种免疫学技术,研究机体中内分泌激素和各种活性物质的变化情况,必须制备高效价的抗血清和进一步提取纯度好。活性强、效价高的免疫球蛋白。胰岛素抗血清的制备虽已有一些报告,但从免疫方法简便、抗体产生快、效价高以及提高免疫动物存活率等方面考虑,尚需进一步探讨。关于抗血清中免疫球蛋白IgG的提取,多采用各种类型层析柱进行分离。自近年来阐明     

三苯氧胺促进大鼠子宫平滑肌细胞增殖

目的 :研究三苯氧胺 (tamoxifen ,TAM)对大鼠子宫平滑肌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法 :采用细胞培养、细胞计数、MTT、流式细胞技术和激光共聚焦显微镜技术。结果 :TAM(10 -6mol·L-1)使大鼠子宫平滑肌细胞的生长曲线上移。TAM(10 -8～ 10 -6mol·L-1)剂量依赖性的促进大鼠子宫平滑肌细胞的增殖作用。TAM(10 -6mol·L-1)使大鼠子宫平滑肌细胞周期由G1期加速向S期转化 ,G1期的DNA含量由对照组的 5 5 .5 %下降到加药组的 32 .8% ,S期的DNA含量由对照组的 2 9.0 %上升到加药组的 4 9.4 %。激光共聚焦检测到TAM(10 -6mol·L-1)可使大鼠子宫平滑肌细胞内的Ca2 + 浓度显著升高。结论 :TAM可以通过调节细胞周期各阶段DNA含量和细胞内Ca2 + 浓度水平 ,从而调节大鼠子宫平滑肌细胞的增殖活动。     

图像分析及显微分光扫描法应用于研究大鼠胃窦5－羟色胺细胞

作者采用图像分析及显微分光扫描测定法对正常及注射对氯苯丙氨酸（ｐＣＰＡ）大鼠胃窦粘膜５－羟色胺细胞进行定位定量分析．结果表明，ｐＣＰＡ可以减少细胞内５－羟色胺含量．图像分析及细胞显微分光扫描测定均能反映这种变化．统计学分析表明两种方法无显著差异．与显微分光扫描测定相比，图像分析具有方便快速，人为误差小的优点．     

ELISA检测胰岛素的进一步探讨与应用

本文分别用Nakane过碘酸钠法,改良过碘酸钠法及Wilson过碘酸钠法制备了酶标记胰岛素抗体,结果表明Wilson法所制备的酶结合物活性较好。采用不同的酶促反应时间,所绘胰岛素标准曲线亦不相同,其中以15分钟较为满意,应用ELISA方法和RIA方法对22例正常人口服糖耐量试验的血清胰岛素含量进行检测,两法所测胰岛素变化曲线相平行。     

木黄酮和雌激素对人垂体催乳素瘤细胞的作用

目的 :观察植物雌激素木黄酮和雌激素对培养的人垂体催乳素瘤细胞增殖和凋亡的影响 .方法 :将木黄酮(genistein ,GST)、β 雌二醇 (β E2 )作用于体外培养的人催乳素瘤细胞 ,测定MTT值及3 H TdR掺入量 ,流式细胞仪测定细胞周期 ,并用TUNEL法观察细胞凋亡情况 .结果 :GST可抑制催乳素瘤细胞的增殖 ,并存在着剂量效应 ,1× 10 -5mol·L-1GST可使G1期的细胞比例从对照组的 0 .5 5上升为0 .90 .β E2 以剂量依赖方式刺激催乳素瘤细胞的增殖 ,并使G2期的细胞比例从对照组的 0 .16上升为 0 .4 2 .不同浓度的GST均明显促进催乳素瘤细胞的凋亡 ,E2 对GST的促凋亡作用无明显影响 .雌激素受体阻断剂可阻断雌激素的作用 ,但对木黄酮的作用无影响 .结论 :木黄酮对培养催乳素瘤细胞的影响与雌激素的作用不同 ,木黄酮在体外能明显抑制培养人催乳素瘤细胞的增殖 ,促进其凋亡 ,并不受雌激素受体阻断剂的影响 .