结肠癌荷瘤裸鼠三步法预定位放免显像及导向治疗研究

目的:探讨亲和素-生物素系统在人结肠癌裸鼠模型中进行预定位放免显像及导向治疗的实验研究。方法:应用三步法给药,在注药后4～48h对荷人结肠癌进行ECT显像和体内分布测定。预定位治疗组采用单次较大剂量投入治疗(放射性剂量为11.1MBq),治疗前后定期测量裸鼠的体重和肿瘤生长体积以及瘤块的组织病理学检查。结果:三步法组在注药后4h肿瘤即显像,其瘤/血比值为5.76±1.64明显高于对照组(直接标记法组和153Sm-DB2组分别为0.26±0.08和1.01±0.22)。三步法预定位治疗组与直接标记单抗组均能明显抑制荷瘤裸鼠体内人结肠癌的生长。结论:三步法预定位具有显著改善血T/NT比值,肿瘤显像时间提前的特点;预定位治疗具有明显的肿瘤抑制效应。     

抗癌胚抗原单抗与生物素及链霉亲和素偶联物的制备及性能鉴定

目的 研究抗癌胚抗原（CEA）单抗与生物素及链霉亲和素（streptavidin,SA)偶联物的制备方法。方法 将CEA单抗按抗体与生物素活化酯物质的量之比为1：15－1：50进行生物素化。抗CEA单抗与SA的偶联采用3－（2－吡啶二巯基丙酸）－N－琥珀酰亚胺酯（SPDP）化学偶联法制备。抗CEA单抗偶联物的生物活性及免疫活性分别采用间接ELISA方法和放射免疫分析法进行测定。结果 生物素化单抗每分子抗体中约偶联3分子生物素,具有良好的SAI结合活性,经SDS－PAGE电泳证实为单一蛋白条带,仍保留95％的免疫活性。SA每分子中含有1－2个疏基,而抗CEA单抗每分子中含有2－3个3－（2－吡啶二基丙酸）－N－琥珀酰亚胺酯间接ELISA方法证实偶联物具有良好的生物素结合活性,SDS－PAGE电泳显示单抗－SA偶联物相对分子质量为210000左右,仍保留着原单抗活性的70％左右。结论 所制备的两类抗CEA单抗偶联物基本保持完整的特异性结合肿瘤CEA的性质,可为进一步的预定位显像和治疗应用提供可靠的靶向载体。     

hTNFα寡聚组氨酸融合蛋白的表达

目的　利用大肠杆菌表达系统对人肿瘤坏死因子(hTNFα)的寡聚组氨酸(6×His)融合蛋白进行表达和纯化研究。方法　采用大肠杆菌表达系统的表达载体pET-28a(+)和pET-22b(+)表达了hTNFα的6×His融合蛋白,其6×His分别位于融合蛋白的N和C端,并利用寡聚组氨酸与过渡态金属离子的高亲和力性质,经Ni2+-IDA Sepharose 6B亲和柱对表达产物进行了纯化。 结果　其表达量分别为菌体总蛋白的45%和8%。前者在胞内以不溶性包涵体存在,未对表达产物作进一步纯化;后者在胞质空间以可溶性存在,经亲和纯化的hTNFα-6×His纯度可达90%以上,得率为0.4mg/100ml,并对L929细胞具有杀伤的功能,其活力为5.42×104U/mg。 结论　表达产物经纯化后具有细胞毒的活性。     

CEA单链抗体表达质粒构建及产物纯化

目的"单链抗体基因的构建并在大肠杆菌中进行表达以及表达产物的纯化研究. 方法"采用重组PCR技术将已获得的抗癌胚抗原(CEA)鼠源单克隆抗体E7B10重、轻链可变区基因(VH、Vk )经(Gly4Ser)3编码的寡核苷酸拼接成单链抗体基因,并在大肠杆菌中表达了单链抗体C端融合6×His蛋白,表达产物经Ni2+-IDA Sepharose 6B亲和柱纯化. 结果"表达的融合蛋白在胞内主要以可溶性存在,其表达量达到菌体总蛋白的10%,SDS-PAGE和Western印迹图谱显示表达产物分子量为27kd,与其基因编码蛋白的理论推算值相符.表达产物经Ni2+-IDA Sepharose 6B亲和柱纯化,纯度可达90%以上,得率为0.8mg/100ml. 结论"纯化后的融合蛋白具有CEA结合活力,其亲和常数为5.4×107/M(抗体结合浓度),略低于其亲本单抗E7B102.7×109/M.     

hTNFα寡聚组氨酸融合蛋白的表达

目的　利用大肠杆菌表达系统对人肿瘤坏死因子(hTNFα)的寡聚组氨酸(6×His)融合蛋白进行表达和纯化研究。方法　采用大肠杆菌表达系统的表达载体pET-28a(+)和pET-22b(+)表达了hTNFα的6×His融合蛋白,其6×His分别位于融合蛋白的N和C端,并利用寡聚组氨酸与过渡态金属离子的高亲和力性质,经Ni2+-IDASepharose6B亲和柱对表达产物进行了纯化。结果　其表达量分别为菌体总蛋白的45%和8%。前者在胞内以不溶性包涵体存在,未对表达产物作进一步纯化;后者在胞质空间以可溶性存在,经亲和纯化的hTNFα-6×His纯度可达90%以上,得率为0.4mg/100ml,并对L929细胞具有杀伤的功能,其活力为5.42×104U/mg。结论　表达产物经纯化后具有细胞毒的活性。     

β-CIT在／正常恒河猴体内分布的SPECT显像研究

目的 研究多巴胺转运蛋白（ＤＡＴ）放射性配体＾１２３Ｉ－、＾１３１Ｉ－β－ＣＩＴ在正常恒河猴体内的分布,探讨其临床应用前景。方法 于正常恒河猴肘静脉处弹注射％＾１２３Ｉ－β－ＣＩＴ（９ＭｃＩ）或＾１３１－β－ＣＩＴ（１０ｍＣｉ）后,运用单光子发射计算机断层扫描仪（ＳＰＥＣＴ）连续动态进行全身和砂部断层扫描,计算各时间点感兴趣区（ＲＯＩ）的放射性计数。结果 不同时间的断层扫描显示注射后２４ｈ,在纹状     

18 F-FDG PET显像与99Tcm-MDP全身骨显像诊断肿瘤远处转移的比较

目的　评价18F 脱氧葡萄糖 (FDG)PET肿瘤显像与99Tcm 亚甲基二膦酸盐 (MDP)全身骨显像对检出骨和远处转移的价值。方法　对 16例恶性肿瘤放化疗后的患者进行18F FDGPET显像和99Tcm MDP全身骨显像 ,并对两种结果进行了比较。结果　 16例肿瘤患者中18F FDGPET显像皆阳性 ,其中 14例患者有远处转移 ,转移病灶共 62处 ,其中骨转移病灶 2 0处 ;在全身骨显像中 ,11例有局限性异常放射性浓聚 ,其中 2例为单一病灶 ,9例为多发病灶 ,共检出病灶 5 7处 ,另 5例骨显像正常。结论　18F FDGPET对恶性肿瘤的诊断具有较高的准确性和特异性 ,但对骨转移灶的诊断价值相对较差 ;99Tcm MDP显像阴性或单一病灶的可疑转移瘤患者有必要进行18F FDGPET检查 ,以明确诊断其他远处转移灶     

67Ga显像对淋巴瘤治疗的监测

目的用67Ga显像预测和监测非霍奇金淋巴瘤(NHL)治疗后的早期疗效.方法86例治疗前67Ga显像和CT扫描阳性的淋巴瘤患者,经临床和病理检查证实为NHL.平面67Ga显像分别在治疗后2和4个疗程进行.有51例患者治疗4个疗程后进行CT扫描.患者经4个疗程治疗后,平均随访时间为1.5年(3～30个月).治疗效果评价①完全有效病灶不显影;②部分有效病灶部分显影;③无效病灶显影无变化或进一步增大.结果86例患者中61例67Ga显像示治疗完全有效,14例部分有效,11例治疗无效.随访中,早期67Ga显像阴性预测值90%(43/48例),晚期67Ga显像阴性预测值69%(9/13例),提示前者更有临床价值.病灶部分消失和无变化者,阴性预测值仅36%(9/25例),提示这部分患者预后很差.CT结果治疗后,51例患者中18例阴性,33例阳性,随访中,阴性预测值67%(12/18例),而阳性预测值为27%(9/33例).表明67Ga显像能有效预测疗效(P<0.001),而CT则不能(P>0.05).结论治疗后早期67Ga显像对预测和检测NHL疗效优于晚期显像,对患者治疗疗效的评价明显优于CT.     

正电子放射性药物的临床应用与进展

正电子发射计算机体层摄影仪(positron em is-sion tom ography,PET)是可反映人体功能、生化代谢及进行分子影像研究的先进功能分子影像设备,PET/CT将能精确反映人体解剖结构的CT与反映功能的PET相整合,是目前临床应用中最佳的分子影像设备。正电子放射性药物是PET或PET/CT进行     

国产~（13）C-辛酸呼气试验评估小鼠胃排空的实验研究

目的通过建立国产13C-辛酸呼气试验胃排空检测系统,评估糖尿病小鼠胃排空异常以及胃动力药物对胃动力功能的影响。方法 13C-辛酸采用格利雅方法合成标记。四氧嘧啶尾静脉注射制作糖尿病小鼠模型。多时间点（0、5、10、15、20、25、30、45、60、75、90、105、120min）采集小鼠13C-辛酸灌胃后呼出的气样,红外线同位素能谱仪测定气样并获得参数13CO2峰值（Cmax）与半排空时间（T1/2）。分析13C-辛酸剂量对胃排空参数的影响及试验的可重复性,评估胃动力药物对糖尿病小鼠胃排空的干预作用,以及13C-辛酸的异常毒性作用。结果 13C-辛酸剂量与Cmax呈正相关（r=0.954,P〈0.05）,但对T1/2无显著影响。重复呼气试验的T1/2变异系数为（4.76±1.43）%。正常对照组和糖尿病组小鼠的T1/2分别为（28.2±6.8）min和（28.1±4.8）min,差异无统计学意义（P〉0.05）;格瑞林使糖尿病小鼠T1/2显著缩短为（19.6±4.9）min（P〈0.05）,而硫酸阿托品则使T1/2明显延长至（40.7±7.0）min（P〈0.05）。13C-辛酸异常毒性试验未见明显毒副反应。结论该研究所建立的小鼠13C-辛酸呼气试验胃排空检测系统具有非侵入性及良好的可重复性,能够有效检测胃排空异常和胃动力药物对胃排空的影响。