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目的:利用基因工程技术生产人骨形态发生蛋白-1的高保守区多肽, 为进一步产生广谱型BMP-1抗体提供有效的抗原蛋白。方法:通过分析BMP-1类各种分子的基因序列及蛋白结构, 选择其中的一个片段作为目的基因。从人骨肉瘤细胞株Saos-2中提取总RNA, 用RT-PCR扩增目的基因片段并克隆到原核表达载体pMALc2中, 构建成重组质粒BMP-1(322-588aa)-pMALc2。将该重组质粒转化大肠杆菌DH5-α, 经过筛选鉴定获得数个阳性克隆, 再进行DNA序列测定。最后用IPTG诱导宿主菌表达融合蛋白。结果:BMP-1基因片段被成功地克隆到pMALc2载体中, 在IPTG的诱导下能高效表达, 融合蛋白的表达量占细菌蛋白总量的(66-72)%。结论:所获得的重组蛋白包含BMP-1的几个完整的重要结构域(2个CUB区和1个EGF区), 为BMP-1类分子所共有的高度保守区。该重组蛋白作为抗原, 可进一步用于产生能有效、特异地识别人类BMP-1类分子的广谱型BMP-1抗体。 相似文献
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三种方法检测沙眼衣原体感染宫颈标本的比较研究 总被引:3,自引:0,他引:3
采用DIG标记的沙眼衣原体DNA探针斑点杂交、细胞培养和免疫荧光三种方法对540例高危人群宫颈标本沙眼衣原体感染进行了检测,其阳性率分别为30.0%、29.62%和30.37%。并发现DIG标记的DNA探针检测标本与细胞培养法具有相似的敏感性和特异性,高于免疫荧光法。因而可作为一种简单、快速、准确的沙眼衣原体检测方法。 相似文献
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目的:探讨nm23H1与大肠癌淋巴结转移的关系。方法:利用限制性片段长度多态性、Southernblot和免疫组织化学染色技术(LSAB法),检测80例大肠癌及正常粘膜DNA中nm23H1杂合性缺失(nm23H1LOH)和石蜡组织切片中nm23H1蛋白表达。结果:80例中45例为杂合子,其中LOH14例,9例有淋巴结转移,31例无LOH者,仅6例有淋巴结转移(P<0.01);nm23H1蛋白表达阴性20例中11例有淋巴结的转移,表达阳性25例中4例有淋巴结转移(P<0.01)。nm23H1LOH和nm23+H1蛋白表达阴性者在DukesC/D期较A、B期多见(P<0.05)。LOH和蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小、部位、组织类型无关。结论:nm23H1LOH与大肠癌淋巴结转移呈正相关,蛋白表达与大肠癌淋巴结转移呈负相关;检测大肠癌组织DNA中nm23H1LOH和组织切片中nm23H1蛋白表达,可能成为预测大肠癌淋巴结转移的生物学指标之一。 相似文献
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对19例手术切除骨巨细胞瘤组织和4例骨巨细胞瘤细胞系进行了细胞遗传学研究,发现瘤细胞多为异倍体,染色体众数多为亚二倍体。核型分析表明第17,18号染色体丢失频率较高,染色体末端缺失和端粒融合是骨巨细胞瘤最常见的细胞遗传学改变。我们将骨巨细胞瘤染色体高度非随机断裂点和同一患者体细胞染色体脆性部位与目前公认的癌基因点进行比较,发现三个位点分别与癌基因MET,FLT,YES2/PDGFB(sis)同位或 相似文献
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朱全胜 《中外医用放射技术》1999,(9):60-61
特殊类型肺癌由于缺乏可靠的临床表现及胸部平片改变,极易造成误诊、漏诊^(1)。本文总结分析了我院收集到的资料完整的20例特殊类型的病例,包括1.肺段型肺癌10例;2.纵膈型肺癌2例;3.细支气管肺泡癌1例;4.肺上沟癌2例;5.肺结核与肺癌并存2例;6.胸腔积液与肺癌并存3例。重点讨论了几种特殊类型肺癌的景象学特点及临别诊断,以进一步提高对特殊类型肺癌的认识。 相似文献
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人骨膜间质干细胞移植后成骨能力及成骨起源的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的研究人骨膜间质干细胞异体移植后成骨能力及成骨起源。方法将幼儿骨膜分离培养后获得的骨膜间质干细胞悬液,移植于裸小鼠两侧背部皮下及老年股骨颈骨折处,观察并验证新骨形成。结果移植后第11天肉眼可见皮下结节,第4周其直径为2~7mm(平均3.6mm)。组织学检查证实结节为结缔组织包裹的骨小梁球;人类特有的载脂蛋白B基因(apoB基因)的PCR实验以及抗人类组织沉淀素反应均为阳性。注入无完整活细胞的骨膜间质干细胞冻融液及培养液的两组裸小鼠皮下均未见结节形成。从患者取出的新骨作组织学及PCR检查显示,新骨apoB基因有两条电泳带,即含两个个体产物。结论裸小鼠皮下新骨结节含有人类细胞,移植的骨膜间质干细胞可直接成骨;异体移植细胞与宿主骨细胞可能共同成骨,为临床应用提供了重要的理论依据。 相似文献
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骨肉瘤中p53、p21WAF1、cyclinA蛋白的表达及其意义 总被引:1,自引:1,他引:1
目的探讨骨肉瘤中p53、p21WAF1、cyclinA蛋白的表达及相互关系.方法应用免疫组化方法对骨肉瘤组织及正常软组织中p53、p21WAF1、cyclinA的蛋白表达进行检测.结果正常软组织中p53表达均阴性,28%(14/50)骨肉瘤中可检测到p53蛋白的异常积累;正常软组织中均有不同程度的p21WAF1蛋白的阳性表达,52%(26/50)骨肉瘤p21WAF1阴性,骨肉瘤中p21WAF1的蛋白表达表现为p53蛋白依赖性的方式;正常组织中cyclinA为阴性,75.6%(28/37)骨肉瘤中存在cyclinA蛋白过表达,cyclinA与p21WAF1的表达呈负相关(r=-0.874,P<0.01);p21WAF1蛋白的表达与骨肉瘤的分化呈正相关(r=0.687,P<0.01).结论p53蛋白的异常积聚、p21WAA1的失表达及cyclinA的过表达参与了骨肉瘤失控的增生及肿瘤的形成. 相似文献