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背景:双向电泳是突触蛋白质组学分析中最流行最通用的蛋白质分离方法之一。但文献中突触蛋白双向电泳对线性固相pH梯度(immobilized pH gradients,IPG)胶条和十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electroph-oresis,SDS-PAGE)浓度的选择很多,尚未见统一标准。
目的:对突触蛋白双向电泳的IPG胶条和SDS-PAGE凝胶浓度进行优化,以获得高质量的突触蛋白双向电泳图谱。
方法:以大鼠海马突触蛋白为试材,比较pH 5.0-8.0与pH 3.0-10.0线性IPG胶条,线性与非线性pH 3.0-10.0 IPG胶条,以及单一浓度10%与12% SDS-PAGE对双向电泳的影响。此外,还使用计算机检索了1989至2013年中国知网及PubMed数据库中关于突触蛋白双向电泳的文献,对文献中选择的IPG胶条、SDS-PAGE凝胶浓度进行了统计和评价,并总结了突触蛋白在不同pH值IPG胶条和不同浓度SDS-PAGE凝胶的双向电泳图谱上的分布特征。
结果与结论:结果表明,使用pH 3.0-10.0的非线性胶条及单一浓度10% SDS-PAGE凝胶进行突触蛋白双向电泳较为适宜,电泳图谱质量好,实验操作便利;同时还推荐合并使用pH 4.0-7.0和pH 6.0-11.0的IPG胶条,以及线性梯度浓度9%-16% SDS-PAGE凝胶,也适用于突触蛋白双向电泳分析。
中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接: 相似文献
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预处理防治肝缺血再灌注损伤的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
肝脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusioninjury, I/R)是困扰肝脏外科发展的一大重症,如何防治I/R一直是研究的热点. 预处理通过诱导细胞的内源性保护机制, 对肝脏I/R有明显的防治作用, 本文就各种预处理对抗肝脏I/R的作用机制作一综述, 探讨各种预处理方法的临床应用价值. 相似文献
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目的 观察脑缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响,探讨星形胶质细胞活化在脑缺血耐受中的意义.方法 36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为缺血预处理再缺血组、缺血组和对照组,每组12只,前2组分别在2 h大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)前3 d给予10 min的MCAO预处理或假手术,第2次MCAO后24 h处死,对照组仅给予2次间隔3 d的假手术.比较各组脑梗死体积、组织病理学变化和GFAP表达.结果 缺血预处理后再缺血组和缺血组梗死体积分别为(136.85±14.51)mm3和(281.37±29.93)mm3,前者较后者显著缩小53.15%(P=0.007);同时,缺血预处理再缺血组神经元变性坏死显著减轻,并伴有GFAP表达显著上调(2组免疫组化染色平均吸光度分别为102.66±8.39和86.28±6.19,P=0.009).结论 缺血预处理可诱导脑缺血耐受,促进GFAP表达,星形胶质细胞活化可能是脑缺血耐受产生的机制之一. 相似文献
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目的 探讨MRA在亲属肾移植供体术前综合评估中的临床应用价值.方法 我科共实施亲属活体供肾切取50例,其中男17例,女33例.通过我科术前供体评估体系,传统开放手术取肾.回顾性分析连续50例供体术前磁共振肾血管显像资料,并与取肾术中的肾血管解剖作对比,后者作为诊断的金标准.结果 50例供体术中证实单支肾动脉44例,6例存在副肾动脉,其中2例术前MRA诊断单支肾动脉.MRA供肾血管有效阳性预测值96%,假阴性率33%,多支血管敏感性66%.无1例供体在MRA检查中发生副反应而放弃检查.结论 亲属活体肾移植供体术前应常规进行MRA钆对比剂增强,血管三维成像检查.MRA供肾血管阳性预测值96%.能够充分了解术前供肾体积、引流系统及实质有无畸形,帮助供体选择,确定供肾切取,确保取肾术绝对安全,提高取肾的质量. 相似文献
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HBV感染患者肝移植术后乙肝复发和再感染是导致移植物功能丧失和患者死亡的重要原因之一.目前乙肝复发和再感染的防治措施包括:被动免疫、主动免疫、抗病毒治疗以及联合治疗. 相似文献
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本文收集初发年龄在40岁以后,脑CT证实有脑萎缩患者64例,其中AD14例,MID8侧。两者比较,MID的临床病程经过更不典型,CT显示AD病人的脑室扩大似更突出。6例年龄性别,受教育年限相匹配的AD和MID的WAIS-RC结果显示,两者在全量表,语言量表,操作量表和各分测验量表分间虽无明显区别,但分别对AD和MID的各分测验结果进行分析,表明AD的相似性得分低,其次是数符和图片排列;MID的B因子的分测验得分较A、C因子低,尤其是图片排列,图画填充和木块图案较低,可能提示AD的智能减退更全面,而MID的智能减退不平行,表现为操作和运动协调的能力更差。 相似文献
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华佗再造丸对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 探讨华佗再造丸(HTZZ)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后缺血半暗带的神经元及胶质细胞的保护作用。方法 采用大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,于缺血再灌注(I/R)后第22、70小时分别进行神经功能评分(NDS);TTC染色测定脑梗死体积;免疫组织化学的方法测定烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的动态变化。结果 HTZZ治疗组与对照组相比,在大鼠I/R后22、70 h NDS均明显增高(P<0.05);脑梗死体积明显缩小(P<0.05);NSE的表达明显增强(P<0.05);GFAP的表达均较对照组明显减少(P<0.05);在I/R后70 h GFAP的表达较22 h时略有增加(P>0.05)。结论 HTZZ对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后缺血半暗带的神经元及胶质细胞有显著的保护作用,是一种有效的神经保护剂。 相似文献
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目的 研究缺血后处理(IPO)减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的机制中关于线粒体途径发挥的作用.方法 按随机数字表法将SD大鼠分为3组,IRI组和IPO组建立肝移植模型,IRI组受鼠在供肝植入后,立即开放门静脉恢复血液供应 ;IPO组受鼠在门静脉完全开放前行IPO,即对门静脉行开放60 s、夹闭60 s,共重复6次.假手术组大鼠在开腹后仅游离肝周韧带,未进行肝移植.术后6 h(IRI组和IPO组为血流完全开放后6h,下同),取各组受鼠的血液和肝组织样本,检测肝功能,采用逆转录聚合酶链反应法检测肝组织B淋巴细胞因子-2(Bcl-2)mRNA和Bcl-2共存蛋白质(Bax) mRNA的表达,采用蛋白质印迹法检测肝组织细胞色素C(Cyt-c)蛋白的表达,使用流式细胞仪检测肝组织的细胞凋亡与坏死率及线粒体跨膜电位的变化,电镜下观察肝细胞线粒体的超微结构.结果 与假手术组相比,IRI组和IPO组肝功能明显受损(P<0.05),肝组织Bax mRNA的表达明显上调(P<0.05),Bcl-2 mRNA的表达明显下降(P<0.05),Cyt-c蛋白含量显著升高(P<0.05),肝组织细胞凋亡坏死率明显增加(P<0.05),肝细胞线粒体跨膜电位明显下降(P<0.05).而IPO组以上各项指标的改变均较IRI组明显减轻(P<0.05),肝细胞线粒体的形态结构改变也明显改善.结论 IPO可能通过抑制线粒体途径来减轻大鼠肝移植中肝脏的IRI. 相似文献