腺病毒介导gax基因转染对血管平滑肌细胞迁移的影响

目的以腺病毒介导gax基因转染血管平滑肌细胞(VSMC),探讨gax基因表达增强后VSMC迁移的变化.方法以携带大鼠gax基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(AdCMV-gax)常规转染VSMC后,应用免疫细胞化学染色检测gax基因表达的变化,Boyden's小室观察gax基因表达增强对VSMC迁移的影响.结果①AdCMV-gax转染前,PDGF-BB下调Gax蛋白的表达,接近正常生理浓度的PDGF-BB(2 ng/ml)即可使VSMC的Gax蛋白表达率由36.42%显著降低至22.83%(P＜0.05),随着PDGF-BB浓度的升高,gax基因表达下降程度更加显著;AdCMV-gax转染后,无论有无PDGF-BB刺激,VSMC中gax基因的表达均比转染前显著增高.②AdCMV-gax转染使VSMC表达gax增强后,VSMC迁移数较未转染组显著减少.结论增强gax基因表达,可抑制由有丝分裂原刺激所引起的VSMC迁移.     

低压稳恒直流电场在兔梗死心肌修复中的作用

目的探讨兔实验性心肌梗死（MI）时在心肌缺血和非缺血区域施加一定强度稳恒直流电场对梗死心肌的修复效应。方法家兔40只均予冠状动脉前降支结扎,分为心肌梗死（MI）组、平面电场2.0V组与平面电场3.0V组、透壁电场2.0V组与透壁电场3.0V组。分别给予相应的直流电场干预。4周后去甲肾上腺素激发实验分析心功能;Masson染色评估心肌梗死面积和心肌纤维化程度。结果平面电场2.0V、透壁电场2.0V和透壁电场3.0V治疗可改善MI后的收缩和舒张功能,也明显缩小了MI后瘢痕面积,同时降低梗死区边缘带纤维化程度,尤以透壁电场3.0V治疗时显著,而平面电场3.0V则无显著作用。结论适宜的低压稳恒直流电场可缩小兔实验性MI面积,降低心肌纤维化程度,改善左心室功能,对梗死心肌起到保护作用。     

诱导型一氧化氮合酶及肿瘤坏死因子-α基因多态与矽肺易感性

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因多态性与矿工矽肺易感性的关系.方法采用病例对照设计,以男性矽肺病人184例为病例组,111例无矽肺的男性接尘矿工为对照组.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）技术检测iNOS Ser608Leu和TNF-α-308位点的多态性.结果 iNOS Ser608Leu位点携带T等位基因（C/T或T/T）的个体患矽肺的危险性降低（OR=0.48,95%CI=0.29～0.80）,且与矽肺期别相关（P＜0.01）.在矽尘高暴露组中,T等位基因的保护作用明显（OR=0.43,95%CI=0.24～0.78）.TNF-α-308基因多态与矽肺危险性之间无相关性（P＞0.05）,但携带A等位基因（G/A或A/A基因型）的吸烟工人更易发生矽肺（OR=2.48,95%CI=1.16～5.32）.结论iNOS基因16外显子C＞T突变可能是抵抗矽肺发生和发展的保护因素,TNF-α-308位点基因多态在矽肺发病的遗传易感因素中不起主要作用,但该多态性与吸烟有交互作用.     

中药提取分离技术的应用进展

对中药提取分离的新技术：超临界流体萃取技术，超声波提取技术，半仿生提取技术，酶法提取技术，大孔树脂吸附分离技术，超滤技术，高速离心分离技术，高速逆流色谱分离技术，微波辅助提取技术，双水相萃取技术等的应用进展作了综述。     

结核杆菌感染对人肺组织β-防御素的作用

目的 探讨结核杆菌对人肺组织β—防御素—1，2基因的表达调控。方法 取肺结核病人病变部分的肺组织，提取RNA，采用RT—PCR技术扩增人β—防御索hBD—1 cDNA，hBD—2 cDNA，并重组到pGEM—TEasy载体，经限制性内切酶谱分析和DNA序列测定证实。结果 所克隆的cDNA片段分别为hBD—1，hBD—2的cDNA序列；肺结核病人肺组织hBD—诱导表达，hBD—1固有表达增强。结论 结核杆菌感染可正相调节人肺组织hBD—1，hBD—2的表达。     

腺病毒介导血管紧张素Ⅱ2型受体基因转染表达抑制血管平滑肌细胞增殖

目的：探讨血管平滑肌细胞（VSMC）转染表达血管紧张素II（AngII)2型受体（AT2R）对其增殖的影响。方法：构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体（AdCMV-AT2R)体外转染大鼠主动脉VSMC,用RT－PCR方法检测AT2R mRNA表达,流式细胞仪检测AT2R表达率,用细胞周期,分裂指数,MTT比色法和5－溴尿苷（BrdU)掺入法检测VSMC增殖。结果 构建的AdCMV-AT2R体外转染培养VSMC表达率为89．51％,AT2R峰值表达时,其S期和G2－M期细胞比率从31．7％降低到13．9％（P＜0．05）,分裂指数从37．4％降低互9．6％（P＜0．01）,MTTK有光度和BrdU掺入量分别降低61．4％和51．6％（P＜0．01）,结论：AT2RL志染表达可显著抑制体外培养VSMC的增殖,这一作用对再狭窄防治是有益的。     

复方丹参注射液致过敏性休克1例

复方丹参注射液为等量的丹参与降香的灭菌水溶液,具有活血化瘀、理气开窍的功效,能扩张血管增加冠脉血流量,可增强心肌收缩力,减慢心率,改善心肌微循环,使心脏功能获得明显改善。主要用于治疗冠心病、心绞痛、心肌梗死、传导阻滞等疾病,对脑血栓形成后遗症也有疗效。我院遇到1例应用复方丹参注射液导致过敏性休克的病例,现报道如下：     

腺病毒介导的AT2R基因转染对大鼠颈动脉新生内膜增生的抑制作用

目的构建AngⅡ2型受体(AT2R)重组腺病毒载体,并研究AT2R基因转染对大鼠颈动脉新生内膜增生的影响。方法用细菌内同源重组方法构建带有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的AT2R重组腺病毒载体pAdCMV/AT2R。大鼠颈动脉球囊损伤后,将pAdCMV/AT2R或空病毒pAdGFP局部导入,分别用RTPCR、免疫荧光染色、激光共聚焦技术检测目的基因AT2RmRNA及蛋白在血管中的表达,利用图像分析仪进行组织形态学分析。结果重组腺病毒载体pAdCMV/AT2R经PCR鉴定正确,其滴度为1.5×1012pfu/ml。pAdCMV/AT2R局部转染后14天,大鼠颈动脉新生内膜、外膜、中层有绿色荧光,阳性面积约40%;转染后7、14、21天大鼠颈动脉AT2RmRNA及蛋白表达显著高于pAdGFP转染组,21天时其内膜与中层的面积比显著低于pAdGFP组(0.78±0.06vs1.36±0.21,P<0.01)。结论pAdCMV/AT2R在体转染能上调血管中AT2R的表达,显著抑制大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜增生。     

激动网织红核因子相关因子2对大鼠氧化应激所致血管平滑肌细胞损伤的影响

目的探讨激动网织红核因子相关因子2（Nrf2）对氧化应激诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）损伤的影响。方法原代培养大鼠VSMCs,随机分为4组：对照组、氧化损伤组、Nrf2激动剂组、Nrf2干扰慢病毒组。Western免疫印迹法检NtJNrf2蛋白表达变化,MTT法检测各组细胞活力,Hoechst33342法及AnnexinV／FITC法检测各组细胞凋亡情况。结果荧光显微镜显示,Nrf2干扰慢病毒成功感染VSMCs;Western免疫印迹检测显示,Nrf2干扰慢病毒感染细胞后,Nrf2蛋白表达与对照组比较显著降低（P〈0．05）。与氧化损伤组比较,Nrf2激动剂组VSMCs活力显著增加（P〈0．05）,细胞凋亡显著降低（P〈0．05）;而Nrf2干扰慢病毒组VSMCs活力显著减弱（P〈0．05）,细胞凋亡明显增加（P〈0．05）。结论激动Nrf2能减轻氧化应激引起的VSMCs损伤,这可为VSMCs损伤的防治提出新的研究方向。     

甘南藏族自治州玛曲县和碌曲县人群包虫病流行情况调查

目的掌握甘南藏族自治州玛曲县和碌曲县包虫病流行状况,为该地区包虫病的传播动力学研究及开展大规模包虫病防治做好前期工作。方法每位被调查者均填写调查表,用便携式B超对被调查者进行腹部常规扫描,阳性者,行快速斑点免疫金渗滤法免疫学检查,免疫学检查亦阳性者,则被确定为包虫病患者。结果玛曲县和碌曲县共调查1040人,检出包虫病患者23人,患病率为2.21%;两县人群包虫病患病率分别为3.32%和1.00%。不同年龄组、不同饮用水类型及家中养犬数量不同的人群包虫病患病率也不同。结论甘南藏族自治州存在人群包虫病流行。