变形链球菌表面蛋白PAc结构基因克隆工程数据分析

目的 :使变形链球菌重要毒力因子PAc蛋白编码基因pac的遗传工程背景清晰化 ,以利于克隆构建DNA防龋疫苗。方法 :运用DNASIS计算机分析软件包对pac全基因DNA序列进行酶切图谱 ,开放阅读框 ,遗传密码子 ,编码蛋白等结构参数分析 ,并就pac基因克隆化方案作出探讨。结果 :pac基因中多个限制性内切酶切点可供制取含重要功能域的目的DNA片段以克隆化 ;重要密码子及开放阅读框的阐述可帮助准确制定编码产生正确PAc读框的克隆方案。结论 :pac基因的遗传工程背景资料分析增强了其克隆化方案的可操作性     

转基因植物及其在龋病预防中的应用

利用转基因植物生产外源性蛋白是近期发展起来的一项新技术。所具有的经济、安全、使用方便等特点 ,使其成为现在的研究热点 ,也使得防龋疫苗及防龋抗体生产的商业化成为可能。本文就转基因植物的生产及其在龋病预防中的应用等方面作一综述。一、转基因植物的研究概况。完整的动物基因 (含启动子、内含子及加尾信号 )在植物中不能得到正确的表达 ,但如果采用ＣＤＮＡ代替基因组编码序列 ,并且使用在植物中有效的启动子和终止子 ,则来自动物的ｃＤＮＡ都可在植物中有效的转录和翻译[1 ] 。1.植物基因转化的基本方法。植物细胞与动物细胞不同 …     

血型链球茵的DNA转化及其生态学特征的研究

人类口腔中血型链球菌的转化率为14.3%.血链耐链霉素转化子能在成年大白鼠口腔中定居且定居时间长达55天。临床新鲜分离株在大白鼠口腔中定居的时间明显较实验室保存株长,采用洗必太预处理大白鼠口腔有助于接种菌在大白鼠口腔中的定居。     

龈沟液的实验指标与牙周病的关系——龈沟液流量、总蛋白浓度、白蛋白浓度及白蛋白与总蛋白比值的研究

本研究通过对54例龈内液的流量.总蛋白浓度白蛋白浓度及白蛋白与总蛋白比值的研究发现,龈沟液流量在不同的牙龈指数之间及附着水平小于1mm 和附着水平大于5mm 之间有显著性差异;龈沟液中的总蛋白浓度与牙龈炎症程度成反比,这可能是由于炎症加重时,龈沟液流量增加所致;白蛋白浓度与炎症之间未见明显关系,但是白蛋白与总蛋白的比值显示出随炎症严重程度的增加而增高的趋势,这说明炎症情况下的龈沟液仍为炎性渗出液。     

中试防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX免疫小鼠的实验研究

目的：评价中试防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX诱导小鼠体内特异性免疫应答的效果。方法：分别由武汉生物制品研究所中试制备和实验室采用德国Qiagen公司去内毒素质粒大量提取试剂盒手工提取防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX;两种方法制备的质粒分别于0周,2周经肌肉、鼻腔免疫小鼠,并以鞭毛蛋白作为黏膜佐剂与质粒同时经鼻腔免疫小鼠,PBS及空载体pVAX1作为对照。免疫前开始每两周收集小鼠血清和唾液样本,ELISA定量检测血清及唾液中特异性抗体含量。结果：中试质粒和手提质粒肌注时均能够诱导血清特异性IgG,但诱导唾液特异性sIgA的能力较为有限。在与黏膜佐剂鞭毛蛋白同时滴鼻时,中试质粒可诱导较为明显的血清特异性IgG和唾液特异性sIgA。在相同的免疫条件下,中试质粒诱导的特异性抗体水平低于手提质粒组,但二者无显著性差异。结论：中试防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX能够诱导小鼠体内特异性体液免疫应答。     

分泌型抗体对致龋变形链球菌的防御作用

共同粘膜免疫系统 (Ｔｈｅｃｏｍｍｏｎｍｕｃｏｓａｌｉｍｍｕｎｅｓｙｓ ｔｅｍ ,ＣＭＩＳ)是抵御有害病原通过粘膜侵害人体健康的重要屏障 ,它所产生的分泌型免疫球蛋白 (ＳＩｇＡ)在一定程度上维护着口腔健康。本文就近年来粘膜分泌免疫在龋病预防中的研究进展作一综述。一、抗体介导的抗变形链球菌的保护机制口腔中的抗体来源于两种途径 :①循环系统的各种免疫球蛋白 (ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ,Ｉｇ)从龈沟渗出到达口腔 ;②唾液腺产生的分泌型ＩｇＡ(ＳＩｇＡ)。后者在比例上占绝对优势。一般认为 ,抵御致龋菌的特异性免疫保护作…     

人口腔粘膜上皮角朊细胞的体外培养

人口腔粘膜上皮角朊细胞的原代培养有许多困难 ,其中主要是上皮细胞接种成活率、产量和成纤维细胞污染的问题。我们比较酶消化法和组织块法建立口腔粘膜上皮角朊细胞体外培养模型 ,并用免疫组织化学法进行培养细胞的定性研究。1.材料 :培养物来源于 5个月～ 10岁唇裂患者修复术中的口内粘膜。切取唇内侧粘膜组织修复剩余物若干 ,每块约0 5ｃｍ× 0 5ｃｍ大小。2 .方法 :①酶消化法 :用Ｄ Ｈａｎｋｓ液冲洗粘膜块 ,剪切至0 2ｃｍ× 0 2ｃｍ大小。配制 0 3ｋｇ/ＬⅠ型胶原酶和 0 4%Ｄｉｓｐａｓｅ消化液的混合液 (1∶1) 5ｍｌ,将粘膜块…     

GTF—PAc融合防龋DNA疫苗的研究（Ⅰ）携带GLU基因片的真核表达质粒pGLU的构建

目的：将变形链球菌糖基转移酶GTF－I的编码葡聚糖结合区（GLU）的序列克隆到真核载体pCI中,为构建GTF－PAc融合防龋DNA疫苗做准备。方法：用PCR的方法扩增含gtfB基因的重组质粒pYNB13的GLU区序;将载体pCl和GLU扩增片段分别酶切,外体连接,构建成真核表达质粒pGLU,酶切电泳鉴定。结果：PCR获得了glu目的的片段,质粒pGLU含有glu目的片段,结论：构建了含有gtfB基因重要抗原决定簇区的真核表达质粒pGLU。     

中药NZ有效部位ZD的提取分离及抗炎免疫作用

目的：提取中药NZ的有效部位（简称ZD）,进行初步的结构鉴定实验;对ZD的抗炎及免疫实验进行初步实验研究。方法：以小鼠耳肿胀模型,大鼠足跖肿胀模型和大鼠棉球肉芽肿模型评价ZD的抗炎作用;利用小鼠植物血凝素（PHA）刺激淋巴细胞转化实验评价ZD的免疫作用。结果：ZD对小鼠二甲苯性耳肿胀、角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀和大鼠棉球肉芽肿模型均有显著抑制作用;同时在小鼠PHA刺激淋巴细胞转化实验中显示具有免疫增强作用。结论：ZD具有较强的抗炎和增加免疫作用。