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81.
用碘六醇(Iohexol)分离液从大鼠腹腔渗出液中分离出效应细胞用于体外试验。结果表明,在特异性抗周期型马来丝虫微丝蚴(mf)血清存在时,中性粒细胞(Neu)和巨噬细胞(Mφ)对mf都有强烈的粘附和杀伤作用;嗜酸粒细胞(Eos)只表现粘附效应。正常鼠血清存在时,Neu、Mφ对脱鞘mf的粘附作用要高于Eos。血清加入EDTA可明显地抑制效应细胞的粘附和细胞毒作用,而加入EGTA则无类似现象,提示补体通过激活替代途径参与了该反应。用葡萄球菌A蛋白(SPA)或兔抗大鼠IgG免疫球蛋白处理抗血清后,粘附细胞的虫体数显著下降,表明细胞的粘附效应主要依赖于IgG抗体。通过相差显微镜和电镜观察,显示效应细胞粘附于虫体表面,并对其产生损伤作用。 相似文献
82.
目的构建我国流行的周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶(BmCP)基因原核和真核表达质粒,为进一步研究奠定基础。方法从周期型马来丝虫虫体中提取总RNA,反转录成cDNA,设计合成引物,以eDNA为模板,通过PCR从eDNA中扩增出目的基因,扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pMD18-T载体,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒,进行测序分析和同源性比较。阳性克隆的质粒亚克隆至真核表达质粒peDNA3.1(+),转化感受态大肠埃希菌(E-coli)DH5α,筛选阳性克隆,用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果RT—PCR扩增出1条约1201bp的特异性条带,重组质粒双酶切和以质粒为模板的PCR结果与预期相符.DNA序列分析与GenBank已知的基因序列同源性为99%。构建了真核重组表达质粒peDNA3.1-BmCP。结论成功构建了周期型BmCP原核和真核重组表达质粒,为进一步研究该基因的功能提供了条件。 相似文献
83.
恶性胸腔积液是肺癌晚期常见并发症之一,约占24%~42%。主要表现为大量胸腔积液压迫肺组织、心脏及大血管,导致进行性加重的呼吸困难和咳嗽等,严重影响患者的生活质量并可危及生命[1]。其特点是增长迅速与反复发作,确认后生存时间在3~12个月[2]。46~64%的胸腔积液患者为恶性肿瘤所致[3],常见于肺部和乳腺癌胸膜转移, 相似文献
84.
85.
恶性疟原虫FCC1/HN株CSP抗原细胞免疫应答IL-2和IFN-γ的体外诱生分析 总被引:1,自引:1,他引:0
本实验利用恶性疟原虫FCCI/HN株CSP抗原基因在真核细胞(HeLa)中高效表达,将纯化的表达蛋白作为候选疫苗免疫小鼠,并通过体外诱生检测小鼠脾细胞白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)水平。结果 显示经疫苗免疫后的BALB/C小鼠脾细胞体外经特异性刺激后产生的IL-2和IFN-γ水平有显著提高。与我们前期研究结果 比较,表明对该疫苗特异性的IL-2、IFN-γ的产生与淋巴细胞增殖以及NK细胞活性增高有明显的相关性;该疫苗对T细胞有一定的刺激能力,可诱导小鼠产生较强的细胞免疫反应。 相似文献
86.
本实验利用恶性疟原虫FCC1/HN株CSP抗原基因在真核细胞(HeLa)中高效表达,将纯化的表达蛋白作为候选疫苗免疫小鼠,并通过体外诱生检测小鼠脾细胞白介素2-IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)水平,结果显示经疫苗免疫后的BALB/C小鼠脾细胞体外经特异性刺激后产生的IL-2和IFN-γ水平有显著提高。与我们前期研究结果比较,表明对该疫苗特异性的IL-2、IFN-γ的产生与淋巴细胞增殖以及NK细胞 相似文献
87.
目的:构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂/3-磷酸甘油醛脱氢酶复合表位基因(CPI502/GAPDH720)真核表达质粒pcDNA3.1(+)-BmCPI502/BmGAPDH720,并观察其在人宫颈癌细胞(Hela细胞)中的蛋白表达。方法:根据T细胞表位预测的基因序列设计引物,以质粒pGEM-T-CPI621为模... 相似文献
88.
为观察恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 pc DNA3- EBA175 / HRP 重组质粒经肌肉途径接种后在宿主体内的表达。BAL B/ c小鼠分为 3组 ,1组 (实验组 )经后腿股四头肌注射重组质粒 pc DNA3- EBA175 / HRP 10 0 μg;2组 (实验对照组 )注射空白质粒 pc DNA3 10 0 μg;3组 (正常对照组 )注射 PBS(p H7.4) 10 0 μl。每隔 2 0 d加强注射 ,于第 1次接种后 2 0 d和第 2次接种后 10 d取小鼠双侧股四头肌免疫组化染色 ,于第 3次接种后 40 d取小鼠各组织作聚合酶链反应 (PCR)检测目的基因。结果显示 ,(1) 1组经重组质粒免疫小鼠血清、恶性疟原虫抗原免疫小鼠血清、恶性疟原虫人工合成九肽 HRP 单克隆抗体及抗恶性疟原虫全虫抗原单克隆抗体作用 ,免疫组化染色后 ,在注射部位肌肉组织的肌膜、肌间隙处见到褐色分泌颗粒 ;1组未注射侧肌肉组织、2组及 3组均未见褐色颗粒。 (2 )采用PCR从 1组肌肉、心脏、肝脏、肺脏和肾脏组织扩增出目的基因 EBA175和 HRP ,2组及 3组相应组织均未扩增出目的基因片段。本研究为疟疾多基因 DNA疫苗的研制提供了体内表达的依据 相似文献
89.
90.
抗体和(或)补体依赖细胞介导的对周期型马来丝虫微丝蚴细胞毒作用的体外研究寄生虫学教研室方政,徐亚雄研究表明在特异性抗血清存在时,中性粒细胞(Neu)和巨噬细胞(Mφ)对微丝蚴(mf)都有强烈的粘附和杀伤作用;嗜酸粒细胞(Eos)只表现粘附效应。参与反... 相似文献