TSHR胞外区中间段在BALB/c小鼠体内的免疫原性研究

目的观察促甲状腺激素受体（TSHR）胞外区中间段（TSHRm）的免疫调节作用，探讨TSHR分子结构与功能的关系。方法将血蓝蛋白与原核表达的人TS／HRm融合蛋白耦联，间隔15d注入BALB／c小鼠腹腔内共5次，对照组注射生理盐水；检测动物血清T4、促甲状腺激素受体抗体（TRAb）、促甲状腺激素受体刺激抗体（TSAb）、促甲状腺激素受体阻滞抗体（TBAb）水平及甲状腺组织病理变化。结果对照组动物T4水平升高后下降，TRAb水平较实验前升高，TSAb、TBAb无显著变化。实验组动物T4总体水平一直保持升高趋势；免疫30d时血清TRAb水平显著升高（P〈0．001），TSAb、TBAb水平变化表现为先升后降。甲状腺组织的病理变化为甲状腺上皮细胞增生和淋巴细胞浸润。结论 人TSHRm融合蛋白可刺激小鼠产生TRAb、TSAb和TBAb，其对动物机体的影响反映了TSAb和TBAb综合作用的结果，表明TSHRm可能具有TSAb及TBAb两种抗原表位。     

1585例正常人及不同甲状腺疾病患者血清TRAb水平的临床研究

目的 以制备的富含甲状腺刺激性抗体(TSAb)抗原决定簇的重组TrxTSHRn蛋白为抗原,建立酶联免疫吸附(ELISA)技术确定促甲状腺激素受体抗体(TRAb)的阳性切限值,并初步应用于临床.方法 以重组TrxTSHRn蛋白为抗原,通过不同的抗原包被量、不同的样品血清稀释度优化,建立间接ELISA检测方法(TRAb-N ELISA以检测TSAb为主).以此方法检测正常成人组1060例(年龄18 ～81岁),健康儿童27例及非自身免疫性疾病儿童(肺炎患儿)88例(年龄0～14岁,平均3.8岁),确定阳性切限值.检测不同甲状腺疾病患者血清TRAb水平.结果 TRAb-N ELISA检测正常成人组405 nm处吸光度A.值((x)±s)为0.398±0.167,儿童组为0.186±0.094,二者差异有统计学意义.亚组分析中,不同性别组之间及正常成人组各年龄段之间差异无统计学意义.成人组阳性切限值((x)+2s)为0.732,阳性率2.45％ (26/1 060).初发Graves病患者阳性率70.31％(74/105)、治疗1年Graves病患者阳性率35.70％(10/28)、桥本甲状腺炎患者阳性率36.67％ (44/120)、单纯甲状腺肿患者阳性率4.60％ (2/43)、亚急性甲状腺炎患者阳性率6.67％( 3/45)、非毒性结节性甲状腺肿患者阳性率7.25％(5/69).结论 儿童血清TSAb水平显著低于成人,而不同年龄、性别的成人之间TSAb水平无差异.初发Graves病患者TSAb阳性率较高,因此TSAb可用于Graves病的诊断、疗效观察及判断预后.     

新生儿先天性亚临床甲状腺功能低下的初步探讨

新生儿足跟血促甲状腺激素(TSH)20mU/L以上为筛查先天性甲状腺功能低下(甲低)界限值，而TSH5～20mU／L的新生儿在筛查中约占5％，近来有报道血TSH5～20mU／L可能为先天性亚临床甲低。因此，笔者2002年4月对本地区(总医院、一中心医院、中心妇产科医院、和平产院、南开医院、水阁医院、二中心医院和红桥医院)1998年1月-1999年12月2年出生的血TSH值在5～20mU／L的新生儿进行了随访调查，现报告如下。     

菌必治治疗非淋菌性尿道炎128例

1.临床资料本组男性80例,女性48例,年龄17～60岁。以青壮年占83％。患者本人或性伴侣有不洁性交史。诊断标准:①患者有不洁性交史,出现尿道口刺痒、尿频、尿急、尿痛、尿道口红肿充血。②病人常于清晨逸出水样或粘液样分泌物,偶见脓痂封住尿道口。③女性病人阴道红肿,子宫颈糜烂,有少许脓性分泌物。④分泌物直接涂片检查Gram染色常于高倍视野下见到10～15个多核白细胞,但找不到双球菌。⑤应排除滴虫,白色念球菌感染。     

以肌动蛋白为标准化参数在甲状腺乳头状癌中c-fOs表达的研究

目的 :引入细胞管家基因 (β-actin)作为多重扩增的内参照物以达到资料比较的标准化 ,用于研究c -fos在甲状腺乳头状癌中的表达。方法 :14例甲状腺乳头状癌组织标本 ;21例正常对照包括3例乳头状癌病变旁正常甲状腺组织和18例腺瘤病变旁正常甲状腺组织。采用Trizol法提取总RNA ,逆转录 -聚合酶链反应法 (RT -PCR)获取cDNA ,多重聚合酶链反应 (MultiplePCR)法同时扩增371bp的c -fos和227bp的β-actin。扩增产物行1.5%琼脂糖凝胶电泳 ,用UVP凝胶成像分析系统的GelBase/GelBiot -Pro分析软件获取各标本c-fos和β-actin的密度值 ,计算两者的比值。结果 :正常对照和乳头状癌组c -fos/β-actin比值分别为 (x±s) :0.6845±0.0753和0.5938±0.0969 ,两组存在着显著差异(t=2.954,P<0.01) ;经自身配对t检验 ,3例患者的癌变组织明显低于与此癌病变旁的正常组织(t=9.205 ,P<0.05)。结论 :c -fos在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显低于正常对照。     

人促甲状腺激素受体抗原决定簇的研究进展

在环境和遗传因素基础上,机体免疫功能异常变化导致自身免疫性甲状腺疾病,促甲状腺激素受体抗体是其重要的自身抗体,它们属于异质性抗体,不同抗体诱发不同病理改变,每种抗体的相应抗原决定簇在促甲状腺激素受体上分布不尽相同,所致临床表现也迥然不同。确定不同抗体的相应抗原决定簇不仅有助于探讨其病理机制还具有临床诊治意义。     

甲状腺过氧化物酶B细胞抗原决定簇研究进展

甲状腺过氧化物酶(TPO)作为一种重要的甲状腺自身抗原,在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的发病机制中占有重要地位。大多数TPO-B细胞抗原决定簇是高度构象性的,并集中于一个有限的区域——免疫优势区(IDR)中,而TPO表位“指纹”也具有一定的指导意义。IDR定位仍不清楚,可能主要由TPO中MPO样区与CCP样区相接的区域高度折叠而构成。TPO中也存在少量的非IDR B细胞抗原决定簇和线性决定簇。TPO-B细胞抗原决定簇及IDR构成、分布、定位等问题的解决很可能有助于阐明AITDs的发病机制,并为开辟特异性分子治疗途径提供理论基础。     

hTSHR膜外区氨基端基因原核表达载体的构建和鉴定

目的：为研究人促甲状腺素受体膜外区氨基端(hTSHR462hp肽段的免疫学特性，将hTSHIR462hpcDNA片段在原核表达系统中表达，故构建原核表达载体。方法：以人Graves病患者甲状腺组织中提取mRNA为模板，利用RT-PCR方法扩增双链甲状腺组织cDNA，又以PCR技术扩增目的基因，定向克隆法构建融合基因的原核表达载体pET 102-hTSHR462hp。结果：获得了重组目的基因原核表达载体并经PCR鉴定、酶切鉴定插入片段方向、大小正确，DNA测序分析表明插入处接头和读框与预期序列相符。结论：成功构建了融合基因的原核表达载体pET 102-hTSHR462hp，为进一步的蛋白表达、其生物学功能研究和未来临床应用奠定了基础。     

人血清促甲状腺激素的放射免疫测定

1965年Utiger和Odell等用放射免疫技术测定人血清TSH获得成功,同年Lemarchand-Beraud用异源系统(牛TSH抗血清和牛TSH标准物)测定了正常人和甲状腺功能低下病人血清TSH含量。近年来,由于分离技术的进步及TSH抗血清和TSH标准物的标准化,因而测定方法的灵敏度和特异性大大提高,各著者之测定值渐趋于一致,故其正常值范围较早年有所下降。我们