抗前列腺特异抗原单链抗体/人羧肽酶A融合基因的构建及表达

目的 构建抗前列腺特异抗原（PSA）单链抗体（scFv)/人羧肽酶A(hCPA)融合基因,为前列腺癌的抗全导向酶-前体药物疗法奠定基础。方法 在已克隆抗PSAscFv和hCPA基因的基础上,用加端PCR分别在scFv基因的3′端和hCPA基因的5′端加上部分连接肽（linker)基因序列,回收后混合。应用重叠延伸拼接法,将抗PASscFv基因和hCPA基因通过linker序列串联为scFv/hCPA融合基因;并将构建的融合基因克隆到融合表达载体pGEX-4T-1中进行表达。结果 序列测定结果表明,构建的抗PSAscFv/hCPA融合基因中scFv和hCPA序列均正确,scFv和hCPA间有18bp的linker序列,推导的氨基酸序列为GSGGSG,与设计的序列相符,融合基因经IPTG诱导表达重组蛋白并以SDS-PAGE分析,在Mr为94000左右出现一条新生蛋白带,表达量约占菌体总蛋白的34%。结论 成功构建并原核表达了抗PSAscFv/hCPA融合基因。     

Calorie Restriction Can Increase Thymocyte Apoptosis through Bcl-2 and Fas Pathway

Ｍａｌｎｕｔｒｉｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓｏｎｔｈｅｔｈｙｍｏｃｙｔｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｒｅｍａｉｎｕｎｋｎｏｗｎ .Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ ,ｗｅｕｓｅｒａｔａｓａｎａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｔｏｒｅｓｅａｒｃｈｔｈｅｆａｓｔｉｎｇｏｎｔｈｅｔｈｙｍｏｃｙｔｅａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｉｔｓｒｅｌａ ｔｉｏｎｓｈｉｐｔｏａｐｏｐｔｏｔｉｃｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｓ ,ｓｕｃｈａｓｂｃｌ 2ａｎｄｆａｓ ,ｗｈｉｃｈｒｅｇｕｌａｔｅｔｈｙｍｏｃｙｔｅａｐｏｐｔｏｓｉｓ .　　Ｗｉｓｔａｒｄａｍｓａｒｅｄｉｖｉｄｅｄ ,ａ…     

窒息新生儿生化指标变化及意义

新生儿窒息对器官特别是脑及心肌的损伤的报道较多〔１〕。窒息对肝肾损伤也不能忽视,肾损伤可能比脑损伤出现早〔２〕。为全面了解新生儿窒息对全身器官的损伤,我们对３０例窒息新生儿作心肌酶等１２项生化指标分析,并与非窒息新生儿比较。对象与方法１．受检对象：１...     

女性尿道平滑肌瘤1例

1病历介绍患者韩某,女,39岁。于1998—04—05因尿道外口无痛性肿物1年人院,体检：胸腹部无著变．尿道后壁有4cm×2cm大小长圆形实性肿物,表面光滑,色苍白,边界清,基底宽,质地硬．无触痛。肿物距尿道外口Icm,尿道外口被压向左侧。诊断：尿道肿瘤,于14日在腰麻下行尿道肿瘤切除术。病理诊断：尿道平滑肌瘤术后尿道置尿管sd．经过顺利。术后随诊无复发。2讨论尿道平滑肌瘤为良性非上度性肿瘤。据文献报告多发于女性,男性极少．发病年龄在19～77岁,平均38岁。30～50岁占67％．好发于原道后壁,其次为尿道前壁和侧壁,本例均符合,…     

内科学、诊断学电脑试题库的建设与应用

题库是提高考试命题质量的基础。本教研室通过对近10年传统题卡进行分析、整理,加强对题库的建设。根据教学大纲要求：（1）按难度高低;（2）按树型结构,每个知识点题目多元化;（3）按书本章、节、目。进行分类作标记。增加题量、题型,从而增强了试题的保密性。通过课堂小测验等多种方式检测题的难度、信度、效度。在题库的应用中注意重点内容,依学时建立试题双向细目表。对评卷过程合理化,减少人为误差。通过题库的改革,实行考教分离,促进教学的改革,改变以灌注知识为主的传统教学方法,开展新型的教学模式,使教学朝着多媒体方向发展,达到优化教学过程,提高教学质量的目的。     

水飞蓟素对乳腺癌细胞系的作用及其机制研究

目的：研究水飞蓟素在体外对不同乳腺癌细胞系的作用，并进一步探讨其作用机制。方法：MTT实验测定水飞蓟素对乳腺癌细胞系MCF－7和SK－BR－3的半数抑制浓度（IC50）；软琼脂克隆形成试验检测加药后两种细胞在软琼脂内的增殖能力。在此基础上，用Her-2抑制剂AG825进行干预，对水飞蓟素的作用机制进行初步探讨。结果：水飞蓟素对两种乳腺癌细胞有不同程度的抑制作用，其中对MCF－7细胞的作用较强，IC50≤0．02％，而对SK－BR－3的作用较弱。Her-2抑制剂AG825可增加SK－BR－3细胞对药物的敏感性，抑制了水飞蓟素作用后该细胞在软琼脂中集落的形成。结论：水飞蓟素在体外对MCF－7细胞具有明显的抑制作用，而AG825可增强SK－BR－3细胞对药物的敏感性。因此，SK－BR－3细胞中Her-2的高表达可能是该细胞对水飞蓟素敏感性差的原因，而水飞蓟素也可能通过Her-2调节某个或某几个下游分子起作用。     

Madigan前列腺切除术38例报告

良性前列腺增生症是泌尿科最常见疾病，前列腺切除术后的早期出血、尿道疼痛等并发症的发生，多因手术将该段尿道切除所致．即使TURP(经尿道前列腺电切除术)也难完全避免。Madigan前列腺切除术防止了上述缺点及并发症。我院从2000年10月至2003年12月对38例良性前列腺增生症患采用Madigan前列腺切除术．报告如下。     

骨髓培养分离出栖稻黄色单胞菌1例

栖稻黄色单胞菌(Flavimmons oryzihabitans)，以前称之为黄伤寒色杆菌(Chromobacterium typhiflavum)，栖稻假单胞菌(Pseudomonas oryzihabitans)和CDC(Center for Disease Control and Preventiopn)Ve-2群微生物。现据rRNA同源性归“其他核酸同源性未知的假单胞菌“之黄色单胞菌属(Flavimons)。该菌属只有唯一的一个菌种——栖稻黄色单胞菌。     

人参的放射防护作用

雄性Swiss小鼠分为3组:第1组连续4天腹腔给以人参提取物,每天10 mg/kg;第2组小鼠照射8 Gy的γ射线;第3组小鼠按第1组给药方式给以人参提取物,于第4天给药30 min后照射8 Gy的γ射线。各组小鼠于照射后的第1、3、7、15和30天解剖测定睾丸中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶的活性和脂质     

玫瑰茄花水提取物和分得的花青素苷对对乙酰氨基酚诱发的大鼠肝毒性的作用

采用雄性Wistar大鼠进行以下3个实验。实验A：36只大鼠随机分为6组，第1组为对照组，饮自来水4周，最后一天给以阿拉伯胶6h后处死动物；第2组大鼠食用对乙酰氨基酚 阿拉伯胶，其他处理同第1组；第3～5组大鼠服用玫瑰茄Hibiscus sabdariffa L．干花水提取物(10%)，分别给药2、3和4