兔抗凋亡诱导因子多克隆抗体的制备、纯化与鉴定

背景：凋亡诱导因子是存在于线粒体膜间隙中的黄素蛋白,它不仅具有氧化还原和电子传递功能,还具有促细胞凋亡功能,从而在维持细胞正常生理活动中具有重要作用。 目的：制备抗凋亡诱导因子多克隆抗体并进行特性鉴定。 设计、时间及地点：单一样本观察,于2006-09/2008-08在新乡医学院免疫学研究中心完成。 材料：新西兰大白兔雌性2只,体质量1.9~2.1 kg;Jurkat E6-1细胞系购自美国ATCC公司。食管癌组织取自新乡医学院普通外科手术患者。抗原肽-KLH由上海华大天源生物科技公司合成。CNBr活化的Sepharose 4B购自美国Pharmacia公司。 方法：利用美国过敏和感染疾病研究所(NIAID)主办的抗原表位分析网站(http://beta.immuneepitope.org/home.php)的在线软件对凋亡诱导因子蛋白的氨基酸序列进行分析设计凋亡诱导因子抗原肽,制备多克隆抗体并纯化。 主要观察指标：采用间接ELISA、Western blot、免疫组织化学3种方法对获得的多克隆抗体进行特性鉴定。 结果：间接ELISA法检测显示,血清抗凋亡诱导因子抗体的效价达到1∶128 000。Western blot结果显示,存在Mr67 000条带。免疫组织化学检测结果显示,在食管癌细胞的胞质中有棕黄色的阳性颗粒存在,说明此抗体也可以用于免疫组织化学染色。 结论：实验获得了高效价的特异性的抗凋亡诱导因子抗体。     

2010年河南省中原地区临床分离菌耐药监测分析

目的了解2010年河南省中原地区临床分离菌的分布及耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用纸片扩散法(K-B法)或自动化仪器法对2010年河南省中原地区7所医院临床分离菌株进行药敏试验及ESBLs的检测,按CLSI 2008年标准判定药敏结果,并用WHONET 5.4软件进行数据分析。结果 7所医院共分离病原菌5014株,其中革兰阴性杆菌3402株占67.9%,革兰阳性菌1612株占32.1%;大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌(SAU)、克雷伯菌属为最常见临床分离菌,分别占20.6%、16.2%、11.4%、9.2%、9.2%;大肠埃希菌、克雷伯菌属和奇异变形菌中ESBLs的检出率分别为48.7%、36.2%和18.1%;葡萄球菌属中MRSA和MRSCN的检出率分别为67.4%和81.4%;SAU和CNS对青霉素、大环内酯类、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶等高度耐药,对呋喃妥因、利福平耐药率较低,未见耐万古霉素葡萄球菌;肠球菌属对万古霉素、呋喃妥因、氨苄西林、青霉素耐药率依次为0.9%、27.0%、36.0%和41.4%,庆大霉素高耐药株已达67.6%。结论该地区细菌耐药性仍呈上升趋势,定期对该地区细菌耐药性进行监测,对合理使用抗菌药物、减少耐药菌株的产生和流行有重要价值。     

不同麻醉方法对乳腺癌患者围术期血清皮质醇和IL-6水平的影响

<正>手术应激反应是决定和影响术后患者转归的重要因素,减轻手术应激可降低术后并发症的发生率,改善高危患者的术后恢复。本文通过观察乳腺癌手术患者在全麻复合硬膜外阻滞及单纯全麻下围术期血清皮质醇和IL-6的水平变化,评价不同麻醉方法对乳腺癌手术患者围术期应激反应和     

硬膜外镇痛对食管癌根治术患者血糖和皮质醇水平的影响

术后镇痛的目的不仅是解除患者的痛苦，而且对预防术后并发症具有重要意义，也是治疗措施之一。文献报道，胸段硬膜外镇（Thoracic epidural anaesthesia，TEA）对应激性代谢失常具有一定的调控作用。为此，本文就TEA对食管癌根治术患者围术期血糖及皮质醇水平的影响进行了探讨。     

以TGF-β1表达诊断人体椎间盘退变的可行性研究

目的探讨转化生长因子-β1基因(TGF-β1mRNA)表达作为人体椎间盘退变诊断新指标的价值。方法采集创伤患者与椎间盘退变患者静脉血与手术切除组织,应用ELISA、HE染色、免疫印迹和RT-PCR等方法进行测定。结果血液与组织中TGF-β1mRNA的表达基本一致。在创伤组血液与组织中TGF-β1mRNA呈低表达;在退变组血液与组织中TGF-β1mRNA呈高表达,其表达量与病变程度成正比;退变组与创伤组比较具有非常显著性差异(P<0.01)。结论 TGF-β1mRNA表达可作为人体椎间盘退变诊断的新指标。     

莪红片对不同证型不稳定型心绞痛患者血清白细胞介素-6、18和C反应蛋白的影响

目的观察莪红片治疗不稳定型心绞痛(UA)的疗效,探讨不同证型UA与白细胞介素-6、18(IL-6、18)和高敏C-反应蛋白(hs-CRP)的相关性,以寻找对UA辅助诊断及中医辨证具有一定意义的客观化、量化指标。方法120例患者随机分为治疗组、对照组各60例,对照组采用常规西药治疗,治疗组在对照组基础上加用莪红片,疗程20d。治疗前后检测2组IL-6、IL-18、hs-CRP。结果2组均能缓解UA,2组总有效率分别为97%、83%(P0.01),主要适用于标实为主患者;同时能明显降低患者血清中IL-6、IL-18和hs-CRP(均P0.01)。治疗组治疗前IL-6、IL-18、hs-CRP标实为主患者明显高于本虚为主及对照组(P0.01、P0.05),治疗组降低hs-CRP效果优于对照组(P0.01)。结论莪红片可有效治疗UA,不同证型UA与IL-6、IL-18和hs-CRP的变化密切相关。     

HBV不同模式感染者血清HBV-DNA与Pre-S_2相关性研究

目的　探讨HBV感染者不同模式血清Pre S2 与HBV DNA之间的关系。方法　应用聚合酶链反应技术 (PCR)和酶联免疫吸附法 (ELISA)对 742例HBV感染者血清 ,同时进行HBV DNA和Pre S2 检测。结果　HBeAg阳性血清中 ,HBV DNA和Pre S2 阳性率分别为 89.8%和 88 3 % ,均明显高于HBsAg阳性 (第二、三模式 )血清中HBV DNA(阳性率为 2 1 8%和 5 5 6 % )和Pre S2 (阳性率为 6 3 2 %和 81 2 % )的阳性率 (P <0 .0 1)。结论　HBeAg(+ )患者血清中 ,HBeAg ,HBV DNA和Pre S2 三者有较好的相关性 ,均可表示病毒复制活跃 ;HBsAg(+ )患者血清中 ,Pre S2 阳性率 (分别为 6 3 2 %和 81 2 % )明显高于HBV DNA阳性率 (2 1 8%和 5 5 6 % ) (P <0 .0 1) ,此时Pre S2 (+ )不能作为判断HBV复制活跃的确切指标。     

PCR技术检测慢性牙周炎组织HP—DNA相关序列意义

目的：探讨慢性牙周炎症组织中是否有幽门螺旋杆菌的存在及其意义。方法：选择６２例慢性牙周炎患者，局麻下在炎症明显处取样本，利用ＰＣＲ技术检测幽门螺旋杆菌（ＨＰ）ＤＮＡ。结果：实验组６２例中ＨＰ－ＤＮＡ阳性２１例，占３３．８７％，与对照组相比差异有高度显著性（Ｐ〈０．０１）。结论：慢性牙周炎的发生、发展及迁延不愈与ＨＰ在口腔内定居及感染有密切关系。     

免抗凋亡诱导因子多克隆抗体的制备、纯化与鉴定

背景：凋亡诱导因子是存在于线粒体膜间隙中的黄素蛋白，它不仅具有氧化还原和电子传递功能，还具有促细胞凋亡功能，从而在维持细胞正常生理活动中具有重要作用。目的：制备抗凋亡诱导因子多克隆抗体并进行特性鉴定。设计、时间及地点：单一样本观察，于200609／200808在新乡医学院免疫学研究中一心完成。材料：新西兰大白兔雌性2只，体质量1．9-2．1kg；JurkatE6-1细胞系购自美国ATCC公司。食管癌组织取自新乡医学院普通外科手术患者。抗原肽KLH由上海华大天源生物科技公司合成。CNBr活化的Sepharose4B购自美国Pharmacia公司。方法：利用美国过敏和感染疾病研究所（NIAID）主办的抗原袁位分析网站（http：／／beta．immuneepitope．org／home．php）的在线软件对凋亡诱导因子蛋白的氨基酸序列进行分析设计凋亡诱导因子抗原肽，制备多克隆抗体并纯化。主要观察指标：采用间接ELISA、Westernblot、免疫组织化学3种方法对获得的多克隆抗体进行特性鉴定。结果：间接EUSA法检测显示，血清抗凋亡诱导因子抗体的效价达到1：128000。Westernblot结果显示，存在Mr67000条带。免疫组织化学检测结果显示，在食管癌细胞的胞质中有棕黄色的阳性颗粒存在，说明此抗体也可以用于免疫组织化学染色。结论：实验获得了高效价的特异性的抗凋亡诱导因子抗体。