维拉帕米通过下调硫氧还蛋白互作蛋白的表达抑制丙型肝炎病毒感染

目的 探讨抗高血压药维拉帕米是否可通过下调宿主硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的表达而抑制丙型肝炎病毒(HCV)的感染.方法 用不同浓度梯度的维拉帕米处理人肝癌细胞系Huh7.5.1,用qPCR和蛋白质印迹法检测TXNIP的表达.用维拉帕米处理Huh7.5.1细胞,同时加入细胞培养产生的HCV (HCVcc),48 h后检测HCVcc感染情况.用TXNIP siRNA转染Huh7.5.1细胞,检测下调TXNIP表达后,维拉帕米对HCVcc感染的影响;用TXNIP启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因表达质粒(pTXNIP-EGFP)转染Huh7.5.1细胞,分析维拉帕米对TXNIP启动子转录活性的影响.结果 与对照孔相比,维拉帕米(100、200、400 μmol/L)可下调Huh7.5.1细胞中TXNIP的表达,并呈现浓度依赖性(P＜0.05);并可抑制HCVcc对Huh7.5.1细胞的感染,且浓度越高抑制作用越明显(P＜0.05).进一步研究结果显示,与对照组相比,维拉帕米能够抑制pTXNIP-EGFP转染细胞中EGFP的表达水平(P＜0.05).结论 维拉帕米可下调TXNIP的表达从而抑制HCV感染,这可能是通过抑制TXNIP启动子的转录活性来实现的.     

庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达

目的;研制特异的抗ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ抗体诊断试剂。方法：ＰＣＲ扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ ＮＳ５基因片段并定向克隆至转座载体ｐＦａｓｔＢａｃ ＨＴａ,转化ＤＨ１０Ｂａｃ感受态细胞,３７℃振荡培养４ｈ使发生转座,于三抗选择平皿筛选重组ｂａｃｍｉｄ。脂质体介导转染ｓｆ９细胞,将转染上清再次感染ｓｆ细胞,以批量表达ＮＳ５重组蛋白。利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法分析,检测重组蛋白。结果：序     

寨卡病毒基因序列分析及核酸检测方法

目的 分析寨卡病毒基因组序列特征,建立寨卡病毒的核酸检测方法.方法 构建81种虫媒传播黄病毒和寨卡病毒的系统进化树,比较寨卡病毒与登革病毒4型、日本脑炎病毒的核酸和氨基酸序列差异,分析亚洲型和非洲型寨卡病毒基因变异位点,尤其是中国的4株输入性寨卡病毒基因序列.通过比较亚洲型和非洲型寨卡病毒全基因组核酸序列,设计一组寨卡病毒实时荧光定量PCR检测的引物和探针,并检测其敏感性与特异性.结果 81种虫媒传播黄病毒中,寨卡病毒与Spondweni、Kedougou病毒同源性最近.全基因组核酸序列比较结果显示寨卡病毒与登革病毒4型的同源性比日本脑炎病毒更近,而氨基酸序列比较结果显示寨卡病毒与日本脑炎病毒的同源性更近.与传统亚洲型寨卡病毒比较,广东GD01株有5个氨基酸突变位点,广东GDZ16001株有3个,浙江ZJ03株有6个,赣县VE Ganxian株有33个.所设计的PCR引物和探针对质粒标准品检测呈阳性,检测下限为100拷贝/mL,对细胞培养的寨卡病毒RNA检测呈阳性,而对登革病毒1～4型和日本脑炎病毒检测呈阴性.结论 寨卡病毒与Spondweni病毒同源性最近,赣县VE Ganxian株的高变异显示寨卡病毒正在快速变异.本研究设计的PCR引物和探针可用于亚洲型和非洲型寨卡病毒株检测,具有较高的敏感性和特异性.     

外籍教师参与医学微生物学本科教学的几点思考

双语教学已经在医学专业课程教学中逐步展开,并取得较好的教学效果.在总结以往双语教学经验教训的基础上,尝试由外籍专业课教师直接参与本科学员医学微生物学理论课教学.客观地分析了外籍专业课教师在医学微生物学教学中的优势与不足,提出了结合学员实际情况,采用课前中文预习,课中随堂难点翻译,课后重点中文复习的辅助方式,使学员在掌握医学微生物学基本知识和技能的前提下,学习必要的专业英语词汇和表达,提高了专业英语表达和交流的能力.     

重要病原微生物研究进展及展望

目的 综述国内外重要病原微生物的研究现状和发展动态,提出未来军队病原微生物学研究的发展方向.方法 采用情报调研方法,检索和综述近5年来国内外在一些重要病毒(如肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、流感病毒、脑炎病毒、出血热病毒)和细菌(如结核分枝杆菌、2型猪链球菌、鼠疫耶尔森菌、炭疽杆菌和幽门螺杆菌)及其所致传染病研究领域的研究进展.结果 病原微生物引起的各种传染病是目前威胁人类健康与生命的最重要的一类疾病.特别是近30年来,一些"新现传染病"和"再现传染病"造成的严重危害受到广泛关注.随着人类对病原微生物认识的不断加深,对付病原微生物的手段也不断完善.结论 "十二五"期间,军队医学微生物学领域应努力培养和造就一支具有较强创新能力的科技人才队伍,建设和完善一批功能先进配套的科研基地和技术平台,组织申报和落实重大项目,取得一批具有原始创新和重要应用前景的科研成果,提高科技成果转化率和科技进步贡献率,力争在若干重大前沿、主流领域的研究中取得重要进展和突破.     

肝脏相关性疾病的组织特异性基因治疗

组织特异性基因治疗是ｉｎｖｉｖｏ基因治疗的首要问题。这种基因治疗包括靶向感（转）染和靶向表达，前者包括定位转染和导向转染，后者就是应用组织特异性转录调控序列和ｍＲＮＡ稳定序列而使治疗基因在靶细胞高效表达。肝脏的结构特性和肝脏疾病的重要性决定了肝病组织特异性基因治疗是重要的和可行的。肝肿瘤、病毒性肝炎及其他肝相关性疾病的组织特异性基因治疗有广阔的前景     

Toll样受体在佐剂增强免疫治疗中的作用

有效的治疗性疫苗主要包括两个部分:抗原和佐剂.在髓样树突状细胞中,Toll样受体起佐剂受体的作用.本文讨论了Toll样受体及其接头分子在不同的宿主免疫应答中的作用,以及免疫治疗中佐剂与受体及其接头分子间的相互关系.     

单纯疱疹病毒糖蛋白D疫苗

本文对以截短的2型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)糖蛋白D为抗原、以含有铝剂和单磷酰脂质A的AS04为佐剂的HSV疫苗(gD2t-AS04)进行了综述,并对其他类型的HSV疫苗作了简要回顾.     

枸杞多糖联合LAK／IL－2疗法对75例晚期肿瘤的疗效观察

用枸杞多糖（ＬｙｃｉｕｍＢａｒｂａｒｕｍＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＢＰ）联合ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法临床试验治疗７９例晚期肿瘤患者，其中７５例可评估病人资料分析提示，ＬＢＰ联合ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法组疗效（４０．９％）显著优于ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法组（１６．１％）。两种治疗方案对恶性黑色素瘤、肾癌、直结肠癌、肺癌、恶性胸水和鼻咽癌有一定的疗效。ＬＢＰ联合ＬＡＫ／ＩＬ－２治疗组的缓解持续时间显著长于ＬＡＫ／ＩＬ－２治疗组。ＬＢＰ联合ＬＡＫ／ＩＬ－２治疗组治疗前后外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）的ＮＫ、ＬＡＫ活性增高程度均显著大于ＬＡＫ／ＩＬ－２治疗组，说明ＬＢＰ能够提高ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法对晚期肿瘤的治疗效果。