医学微生物学实验教学的体会

医学微生物学实验教学是理论教学的有益补充,也是医疗实践的前奏.实验课教学不同于理论教学,重在培养学生动手能力,该文围绕课前准备、课中安排、课后分析归纳等多个层面,重点阐述了如何上好一堂医学微生物学实验课的方法和切身体会.     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究—Ⅰ.霍乱弧菌单克隆抗体的敏感性和特异性检测结果

将所获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体(McAb),用不同年代的霍乱弧菌(两种生物型)及常见的肠道菌(含不凝集弧菌),以试管凝集试验法测定它们的敏感性和特异性,并以霍乱弧菌多克隆抗体比较。结果表明,12株霍乱弧菌单克隆抗体,对各型霍乱弧菌(9株)均有不同程度的抗体效价(1:40～1280),其中四株单克隆抗体对各型霍乱弧菌的凝集效价比多克隆抗体的凝集效价高,所以较敏感;所有12株单克隆抗体,对不凝集弧菌等9种、株肠道菌的凝集效价,均<1:140,而多克隆抗体对这些肠道菌有不同程度交叉凝集(1:40～220)的却有2/4,证明这些单克隆抗体的特异性比多克隆抗体高,适合于诊断应用。     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究——Ⅲ.单克隆抗体免疫荧光快速检测霍乱弧菌的实验研究

为了进一步研究所获得的霍乱弧菌单克隆抗体在诊断应用中的价值,将其中一株2B_1H_1C_6用FITC标记,进行免疫荧光直接法和间接法快速检测霍乱弧菌模拟标本,同时以标记多克隆抗体相比较。结果表明,单克隆抗体的间接荧光比多克隆抗体的间接荧光特异,前者仅对伤寒疾杆菌和痢疾杆菌有很微弱的非特异荧光(±),而后者对多数肠道菌有±～++的非特异荧光,在1000～10,000菌/ml时,两种抗体的免疫荧光均可检出,18份粪便模拟粪便的     

IL-2重组逆转录病毒载体的构建及介导的肝癌特异性基因治疗研究

将小鼠白细胞介素２（ｍＩＬ－２）ｃＤＮＡ全序列克隆到逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ的ＰＬ位点，使其转录受ＳＶ４０早期启动子驱动，构建ｐＭＮＳＭ－ＳＶ４０－ｍＩＬ－２。用小鼠白蛋白增强子／启动子（Ａｌｂｅ／ｐ）置换ｐＭＮＳＭ－ＳＶ４０－ｍＩＬ－２中ＳＶ４０启动子，构建ｐＭＮＳＭ－Ａｌｂｅ／ｐ－ｍＩＬ－２。经酶切鉴定符合要求。将重组体用磷酸钙共沉淀法导人逆转录病毒包装细胞ｐＡ３１７中，用所得的重组病毒在８μｇ／ｍｌＰｏｌｙｂｒｅｎｅ存在条件下体外感染小鼠肝癌细胞（ＭＭ４５Ｔ．Ｌｉ、ＢＮＬＩＭＥ）、黑色素瘤…     

肥大细胞负调控分子与变态反应性疾病

Ⅰ型变态反应病的发生率逐年上升,目前缺乏有效的治疗方法,严重影响人类的健康和患者的生活质量。近年来,利用免疫负调控作用的信号分子,抑制肥大细胞和嗜碱粒细胞释放炎性介质和细胞因子,为Ⅰ型变态反应性疾病的免疫治疗开辟了新的途径。肥大细胞和嗜碱粒细胞表面表达的IgE高亲和力受体（FceRI）在Ⅰ型变态反应发生中起着重要作用,     

携带DT_(390)-VEGF_(165)或DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因的真核表达载体的构建及表达

抑制血管再生可能是治疗实体瘤的有效途径。肿瘤血管生成的主要调控者是血管内皮细胞生长因子(ＶＥＧＦ)。ＶＥＧＦ的 5种异构体中ＶＥＧＦ165是表达丰度最高的异构体 ,ＫＤＲ和Ｆｌｔ 1为ＶＥＧＦ的高亲和受体。1996年Ｓｏｋｅｒ等在各种肿瘤细胞系上发现了仅与ＶＥＧＦ165外显子 7编码的结构域结合的受体 ,即ＶＥＧＦ165Ｒ[1] 。目前将细菌毒素的跨膜结构域和酶性结构域与细胞因子或抗体构成的融合蛋白靶向杀伤各型细胞的研究已有大量报道 ,但这些融合毒素仅对某些类型的肿瘤有效。为扩大癌症治疗范围 ,我们选择ＶＥＧＦ165和ＶＥＧＦｅｘ…     

核酸疫苗作为治疗性疫苗的前景

联系核酸疫苗的免疫机理和慢性病毒感染的发生机制,对将核酸疫苗用作慢性病毒感染的治疗疫苗的发展前景作一简要阐述。     

利用重组痘苗病毒表达人CD20基因

目的获得重组人 CD2 0分子并研究编码人 CD2 0的基因在痘苗病毒中的表达。方法从 p GEM- T- EASY/ CD2 0载体上酶切下编码人 CD2 0分子的 c DNA,亚克隆到 p JSA1175载体上 ,重组质粒与野生痘苗病毒共转染 TK- 143细胞。结果APAAP检测到重组病毒感染的细胞表面有 CD2 0分子表达 ,富集后病毒滴度约为 1× 10 9pfu/ ml。结论人 CD2 0基因在痘苗病毒中表达 ,为研究其功能以及研制单克隆抗体奠定了基础