GM-CSF基因增强HCV非结构蛋白DNA疫苗诱导的细胞免疫应答

作者分别构建了编码丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）非结构蛋白ＮＳ３、ＮＳ４和ＮＳ５的质粒ｐＴＶ－ＮＳ３４５、编码粒细胞－巨噬细胞－集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的质粒ｐＴＶ－ＧＭＣＳＦ以及编码ＮＳ３４５和ＧＭ－ＣＳＦ的双顺反子质粒ｐＴＶ－ＮＳ３４５／ＧＭＣＳＦ，分别将这三种质粒转染ＣＯＳ－７细胞，用免疫沉淀法检测ＨＣＶＮＳ３４５蛋白的表达，用ＥＬＩＳＡ检测培养上清中的ＧＭ－ＣＳＦ。将Ｂｕｆｆａｌｏ大鼠分为４组，第１、２、４组分别肌注ｐＴＶ－ＮＳ３４５、ｐＴＶ－ＮＳ３４５／ＧＭＣＳＦ和对照载体ｇＴＶ ４００μ…     

微反应板酶联夹心杂交定量检测乙型肝炎病毒基因组

目的 建立一种在微量反应板上进行乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因杂交定量分析的技术。方法 利用人工合成的多组寡核苷酸探针与乙型肝炎病毒全基因组在微量ＤＮＡ结合板上进行杂交反应，并利用自制的标记放大探针检测杂交信号，信号值以Ａ值标示，与标准曲线比较后，可求得待测标本中ＨＢＶ基因含量。结果 （１）本方法可直接从血清标本中对ＨＢＶ定量，可定量范围为２０ｐｇ－２０ｎｇ／ｍｌ；（２）不与人类基因组及其它病毒或细菌     

CHILDREN’S RESPIRATORY VIRAL DISEASES TREATED WITH INTERFERON AEROSOL

In 1979, the Pediatric Department of Shanghai Changzheng Hospital, in collaboration with the SINE Laboratory, succeeded for the first time in producing a human leukocyte interferon aerosol (IFN-a aerosol). The biological value of the interferon used in the aerosol was not adversely affected. Over 80'70 0f its particles have diameters under 5 Um. In animal ex- periments no irritative reactions were observed. Clinical trials showed the preparation was effective in children's respiratory viral disease including in fluenza, bronchiolitis caused by RSV, mumps, asthma (infectious), asthmatic bronchitis and recurrent upper respiratory tract infections. Based on our animal ex periments and clinical trials lasting more than 7 years, IFN a aerosol is proved effective, safe and non- traumatic. It has no side effects and is economical and easy to use     

不同发育阶段人胚胎原始生殖细胞的定位及体外培养

目的:对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞(PGC)进行定位并比较其体外培养的差异.方法:取4～7周发育阶段的人胚胎,应用组织化学法检测PGC内碱性磷酸酶(AP)以对其定位.体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织进行培养,第1次传代后,用AP标记,计数不同发育阶段AP阳性的PGC和体外培养的阳性克隆并进行比较.结果:在卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处有AP强阳性细胞,阳性信号位于胞质内.阳性细胞散在分布,在生殖嵴处聚集成团.不同发育阶段的胚胎组织培养均有阳性克隆出现.统计学分析结果表明,4～7周人胚胎内AP阳性的PGC数目及细胞内信号强度无明显差异(P>0.05);由胚胎组织培养获得的AP阳性克隆数也无显著差异.结论:人PGC位于卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处.4～7周发育阶段,胚胎内PGC数目和体外培养的克隆数无明显变化.     

光纤微球列阵技术检测生物战剂

目前,生物战剂的快速检测和鉴定大多局限于对单一病原微生物,同时快速检测多种生物战剂微生物一直是一个难题。美国Tufts大学Song等利用光纤微球列阵技术开发了一套全新的检测平台,可以同时快速准确地检测可疑标本中的多种生物战剂微生物。光纤微球列阵技术主要基于以下原理:(1     

PCR检测丙型肝炎病毒感染各高危人群

用ＰＣＲ方法克隆了中国丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者的５’端非编码区（５’－ｎｏｎｃｏｄｉｎｇｒｅｇｉｏｎ，５’－ＮＣＲ）序列，并根据此序列合成引物检测我国ＨＣＶ各高危感染人群的病毒复制情况，结果显示ＨＣＶＲＮＡ在慢性丙型肝炎患者的血清标中的阳性率为８１．８％（９／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的血液透析患者血清标本中的阳性率为６３．６％（７／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的献血员血清标中的阳性率为２０％（４／     

HCV F蛋白体外自组装以及在HCV感染者肝组织中的分布研究

目的 探讨HCV F(frameshift)蛋白是否能自组装为病毒样颗粒以及F蛋白是否存在于HCV患者肝组织中.方法 将0.5～1 g/L大肠埃希菌重组表达的F蛋白与0.006 g/L tRNA混合,于100 μl组装缓冲液中进行反应,取组装产物进行1:10稀释,2%醋酸铀复染后电镜观察是否形成病毒样颗粒.HCV感染者肝组织中F蛋白的检测采用免疫组织化学法.结果 1 g/L F蛋白与tRNA混合(167:1)后,可形成直径35 nm的病毒样颗粒.在20例HCV感染者的肝穿刺组织标本中,有2例患者的肝细胞胞浆中可检测到F蛋白.结论 F蛋白在体外可以形成病毒样颗粒,在部分HCV感染者的肝组织中存在F蛋白,F蛋白在HCV的生活周期中可能有重要功能.     

哺乳动物生殖细胞的形成、性分化和永生化

小鼠原始生殖细胞产生于原肠胚形成阶段,迁移到生殖嵴位置后获得性别分化决定.体外培养时原始生殖细胞可大量增殖,现在已经建立了人类EG细胞株,这些永生的EG细胞具有正常的核型和多向分化能力,它可分化为某些特定的细胞类型,在临床上对退行性疾病的治疗有一定的意义.