尿动力分析仪的发展现状及趋势分析

介绍了尿动力分析仪的基本组成、工作原理,分析了尿动力分析仪的发展现状,重点研究了尿动力学的发展和尿动力分析仪的生产及使用情况,并对尿动力分析仪的发展前景进行了展望,指出了尿动力分析仪将会朝着功能化、信息化、人性化方向发展,并在泌尿科领域中发挥越来越重要的作用.     

HDAC2磷酸化区域突变体的构建及其对小鼠成纤维细胞增殖的影响

目的 应用片段缺失突变技术鉴定HDAC2自身磷酸化对其Sumo-E3连接酶活性及蛋白质翻译的影响.方法 以前期获得的鼠源性HDAC2 Sumo-E3连接酶结构域基因片段为模板,设计片段缺失突变引物,经长片段重叠延伸PCR技术扩增获得片段缺失突变基因片段,后于Top10大肠杆菌中自然连接扩增获得pcDNA3.1/HDAC2-Sumo-E3连接酶磷酸化结构域缺失突变的真核表达载体.然后将载体转染于L929成纤维细胞瞬时过表达突变基因,再经翻译反应性荧光素酶报告基因实验和Western-blot鉴定HDAC2自身磷酸化修饰对Sumo-E3连接酶介导的报告基因和靶蛋白质表达的影响.最后通过MTT实验检测HDAC2自身磷酸化修饰对其Sumo-E3连接酶介导的L929细胞增殖的影响.结果 成功构建获得磷酸化修饰完全缺失的HDAC2片段缺失突变体pcDNA3.1/HDAC2-Sumo-E3(DEL 394-424AA).LUC报告基因检测结果显示,DEL 394-424AA片段缺失突变体促进LUC翻译是对照组的4.24倍,且能显著促进靶蛋白ODC和c-Myc的表达,以及L929小鼠成纤维细胞的增殖效应.结论 HDAC2自身磷酸化修饰对HDAC2 Sumo-E3连接酶活性及其调节的蛋白质翻译和细胞增殖作用起负性调节作用.     

HBV前S1抗原下调肝细胞表面MHC-Ⅰ并促进肝癌产生

目的 探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染诱发肝癌所涉及的内在机制.方法 对稳定过表达HBV前S1抗原(preS1)的L02、HepG2和Huh7细胞进行流式细胞术、实时荧光定量和裸鼠成瘤等实验来评估preS1在HBV相关性肝癌发生中的作用.结果 preS1诱导细胞肿瘤干细胞(CSCs)相关因子和表面标志分子的表达上调,...     

三七总皂苷抑制Hela细胞增殖的实验研究

目的:研究三七总皂苷(PNS)抑制宫颈癌Hela细胞增殖的可能机制。方法:MTT法检测不同浓度PNS作用于Hela细胞24、48和72hHela细胞增殖率;检测PNS作用于Hela细胞24h荧光素酶报告基因(LUC)的变化;蛋白质印迹法检测200μg/mL PNS作用于Hela细胞4E-BP1、S6K1、mTOR及其磷酸化水平变化;ELISA法检测PNS作用于Hela细胞24hVEGF的变化。结果:PNS可以明显抑制Hela细胞生长,随时间延长及PNS剂量增加抑制率明显增高;LUC相对光单位值(RLU值)明显低于对照组,其S6K1、4E-BP1、mTOR蛋白表达及其磷酸化水平均明显降低,200μg/mL PNS作用于Hela细胞24h后其VEGF表达明显降低,差异均有统计学意义,P值均<0.01。结论:PNS能抑制Hela细胞增殖,其机制可能是PNS阻断mTOR信号通路,降低mRNA翻译效率,抑制蛋白质翻译起始复合物形成,从而抑制Hela细胞增殖。     

严重多发伤患者外周血清对巨噬细胞核因子-κB的激活作用及其与预后的关系

目的 探讨严重多发伤患者伤后24 h外周血清对巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)的激活作用及其与预后的关系.方法 收集47例严重多发伤患者及24名健康体检者的外周血清.将带有荧光素酶报告基凶的NF-κB重组质粒转染至巨噬细胞(RAW 264.7),24 h后用不同的血清刺激该细胞6 h.榆测荧光素酶活性以反映血清对NF-κB的激活作用强度,同时以EIJSA法测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1(IL-1)受体拮抗剂(IL-1Ra)、可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ(sTNFRI)水平.结果 创伤血清组对巨噬细胞NF-κB的激活作用显著高于正常血清组,且创伤后MODS组、死亡组值分别显著高于尤MODS组及存活组.该变化与APACHE Ⅱ评分呈明显的正相关,但与血清中各细胞因子水平无明显相关性.NF-κB活性在判定MODS及死亡结局的受试者作业特征曲线(ROC)下面积显著大于APACHE Ⅱ评分的ROC下面积.结论 早期测定严重多发伤患者外周血清对巨噬细胞NF-κB的激活作用对MODS及死亡结局的判定具有参考价值.     

核因子_(-k)B的结构和功能研究进展

１９８６年，Ｓｅｎ和Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ首先从Ｂ淋巴细胞核抽提物中，检测到一种能与免疫球蛋白Ｋ链基因增强子ＫＢ序列（５＇－ＧＧＧＡＴＴＴＣＣ－３）特异结合，并能促进。链基因表达的核蛋白因子，称之为核因子－ＫＢ（ｎｕｃｌｅａｒ ｆａｃｔｏｒ－ｋａｐｐａ Ｂ，ＮＦ－ＫＢ）。此后，ＮＦ－ＫＢ在许多领域被受关注。近来发现，ＮＦ－ＫＢ能与调控免疫应答、炎症反应、细胞分化和生长、细胞粘附和细胞凋亡所必需的许多细胞因子、粘附因子等基因启动子或增强子部位的ＫＢ位点发生特异性结合，启动和调节这些基因的转录，在机体的免…     

核因子-κB、IκB在创伤失血性休克大鼠肝损伤中的作用

目的 从组织受体水平探讨核因子-κB(NF-κB)、IκB在创伤失血性休克后肝组织中的变化及其在肝损伤中的作用机制.方法 雄性健康Wistar大鼠36只,采用双侧股骨骨折伴失血性休克模型,随机分成正常对照组6只,双侧股骨骨折伴失血性休克组30只.动态观察伤后0.5、2、4、6、8 h大鼠肝组织核因子-κB、IκB、肝脏病理、肝功能、TNF-α、IL-6等变化.肝组织NF-κB采用EMSA法测定结合活性、IκB采用免疫印迹法测定其蛋白含量,并进行计算机图像分析.数据采用SPSS 12.0软件分析,两组间比较采用配对资料的t检验.结果 NF-κB的活性伤后迅速升高,伤后2 h与正常对照相比,差异具有统计学意义,[(8.4±0.7) vs (2.3±0.4),P＜0.01];伤后6 h达到高峰,和正常组相比,P＜0.01[(43.4±4.6) vs (2.3±0.4),P＜0.01].IκB伤后迅速降低,伤后2 h和正常对照相比,差异具有统计学意义[(17.0±2.0) vs (26.4±2.2),P＜0.01].伤后6 h继续下降至比较低的水平,和正常组相比,P＜0.01[(6.5±1.1) vs (26.4±2.2),P＜0.01].TNF-α、IL-6伤后逐渐升高,并于伤后6 h达到高峰:和正常组相比,P＜0.01[TNF-α,(173.7±12.1) vs (30.8±1.8)pg/ml,P＜0.01;IL-6,(175.5±12.5) vs (10.4±0.7)pg/ml,P＜0.01].光镜下伤后4～8 h肝窦内有少许淤血,有散在炎性细胞浸润;血清ALT、TB伤后4 h开始增高,和正常组相比,P＜0.01[ALT,(640.6±80.2) vs (536.8±60.0)nmol·L-1,P＜0.01;TB,(4.7±1.1) vs (1.6±0.2)mol/L,P＜0.01];白蛋白伤后4 h明显下降,和正常组相比,P＜0.01[(13.3±1.6) vs (20.6±3.4)g/L,P＜0.01].结论 NF-κB及其抑制蛋白IκB参与了严重创伤失血性休克后肝损伤的发生;且NF-κB增高越多、IκB减少越明显,肝损害越重.提示NF-κB及其IκB在严重创伤休克后肝组织细胞损伤与抗损伤机制方面起着重要作用.     

肺炎克雷伯菌crp缺失株生物学特性初步研究

目的:研究cAMP受体蛋白(cAMP receptor protein,crp)对肺炎克雷伯菌生物学特性的影响。方法:通过细菌生长特性、荚膜染色、超黏性试验和离心试验观察肺炎克雷伯菌crp缺失株体外生物学特性的改变。结果:肺炎克雷伯菌crp缺失株生长菌落较小,生长速度较慢,细菌形态由杆状变为圆形,离心不易沉淀于Ep管底部。结论:crp调控子可能会影响肺炎克雷伯菌的生长、细菌形态和荚膜含量等生物学特性。该研究为肺炎克雷伯菌crp基因功能进一步研究提供了依据。     

脱细胞真皮基质临床研究及应用进展

脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)是异体或异种皮经过特殊处理制备而成的新型真皮移植替代材料,目前在烧伤创面修复、整形美容、皮肤软组织缺损等方面得到广泛应用。本文就ADM在临床研究及应用进展进行综述。