基于肝脏代谢组学研究柴胡皂苷A对小鼠酒精性脂肪肝保护作用

目的：基于代谢组学探讨柴胡皂苷A (SSa)改善酒精饮食诱导下小鼠酒精性脂肪肝(AFL)的作用机制。方法：将C57BL/6J雄性小鼠分为饮食对照(NC)组、模型(EtOH)组、不同剂量SSa干预(Et+SA-L、Et+SA-M、Et+SA-H,5、10、20 mg·kg^–1)组,每组6只。除对照组外,各组小鼠使用含5%乙醇的流质饮食诱导10 d构建AFL模型,自乙醇饲料喂养第4天起给药至造模结束。应用酶联免疫吸附法检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和小鼠肝脏丙二醛(MDA)含量水平。采用苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏组织形态学变化。采用超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Exactive MS)建立检测NC组、EtOH组、Et-SA-H组小鼠肝脏代谢谱,以偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)分析模式识别,以T检验、差异倍数筛选潜在生物标志物,并借助MetaboAnalyst数据库富集代谢通路。结果：SSa减轻AFL小鼠肝体比...     

人参茎叶皂甙提高创伤小鼠细胞免疫功能的实验研究

利用小鼠闭合伤、截肢伤及烧伤模型，观察创伤后４天细胞免疫功能的变化及人参茎叶皂甙（ＧＳＬ）的体内调节作用。结果显示：各创伤小鼠脾脏指数（ＳＩ）和胸腺指数（ＴＩ）降低，脾细胞的Ｔ淋巴细胞转化及Ｔｈ数目下降，Ｔｓ数目增多，白细胞介素２（ＩＬ－２）、ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）、ＩＬ－２ｍＲＮＡ以及ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ水平均明显受抑。经皮下注射ＧＳＬ（５０ｍｇ／ｋｇ，每天１次，连续４天）不仅可使创伤小鼠的ＳＩ、ＴＩ恢复正常，且可纠正Ｔ淋巴细胞转化、Ｔｈ数目的下降以及Ｔｓ数目的增多，逆转ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－２ｍＲＮＡ、ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ的受抑状态。提示：ＧＳＬ可从器官－细胞－分子乃至基因转录水平纠正创伤后细胞免疫功能低下。     

降钙素原及其与炎症的关系

降钙素原是降钙素无激素活性的前肽物质。全身严重细菌、真菌、寄生虫感染、脓毒症、脓毒性休克、内毒素血症、多器官功能衰竭患者血浆降钙素原水平异常升高。相反，严重病毒感染、非感染性炎症反应以及自身免疫或过敏性变态反应等疾病时血浆降钙素原不升高或轻微升高。对上述疾病具有辅助诊断价值。     

酵母双杂交随机肽库的设计及构建

目的构建一个含16个氨基酸的酵母双杂交随机肽库.方法设计合成编码16肽的随机DNA片段,PCR扩增随机DNA片段,经限制性内切酶BamH I和EcoR I酶切后克隆入酵母表达质粒pGADT7 GH,构建酵母双杂交随机肽库质粒pGADT7GH-RP并检验其库容.结果扩增获得编码16肽的随机DNA片段,并成功将随机DNA片段克隆入酵母表达质粒pGADT7GH,与GAL4AD形成融合蛋白,其库容为1.28 × 107.结论成功地构建了酵母双杂交随机肽库.     

皮肤美容试验的研究

医学美容正在开拓性探讨中,如对什么样的皮肤病及皮肤的自身耐受性,选择不同的美容方法有着重要的意义。为此我们在实践中对三种美容试验进行了研究。1 冷光镜试验法1.1 试验方法 在暗室内进行,将冷光镜通电后.掀按电键,使滤过紫外光闪亮,对准皮肤损害,在放大镜上观察荧光颜色。结果为:蓝白色者为健康皮肤;紫色或兰紫色者为过敏皮肤;暗褐色者为色素沉着皮肤,橘黄色音为多脂或痤疮性皮肤。1.2 试验结果:50例中呈橘黄色的17例,可进行倒膜疗法;6例是暗褐色,可进行面膜疗法。因此本试验对皮肤病的诊断及选择美容方法提供了依据。2 安全度试验法2.1 试验方法 采用透明胶纸,剪成1×2cm~2,在大腿内侧或前臂内侧贴敷,A点贴敷3~#,B点贴敷2~#,C点贴敷1~#。经过24～48小时后观察结果,皮     

血浆降钙素原的测定及其临床意义

随侵损性诊断操作、细菌耐药性、严重烧创伤发生率、器官移植病人和放化疗病人的增加 ,医院性感染、脓毒症、脓毒性休克和多器官功能衰竭综合征 (ＭＯＤＳ)的发生率出现不断升高。尽管现代医疗已取得很大进步 ,但上述感染并发症仍是危重病人晚期死亡的主要原因。因此对这些感染并发症进行早期治疗显得尤为重要。然而感染并发症的传统诊断指标存在耗时、敏感性和特异性不高的缺陷。近年来发现 ,在全身严重细菌感染和脓毒症的辅助和鉴别诊断方面降钙素原 (Ｐｒｏｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ ,ＰＣＴ)是一个具有高特异性和敏感性的新指标 ,本文就此作…     

超声监视下对不孕症396例通液治疗的研究

目的探讨超声监视下对不孕症通液治疗的研究。方法（1）选择无妇科疾病，排除其它不孕因素，婚后1～6年不孕的健康妇女396例，进行B超或彩超监视下的输卵管通液治疗；（2）采用汕头CTS-280型超声仪及飞利浦影像之星彩超仪，探头频率为3．5～5MHz。检查方法在下腹部及耻骨联合上方进行纵横扫查，患者屈膝仰卧位，妇科医生进行外阴及阴道常规消毒、铺巾、牵引宫颈、暴露宫颈口、用三通管插入宫腔底体部，在超声医生的监视下行通液治疗。结果在超声监视下行通液治疗术396例，经1次通液治疗的有280例，均为双侧输卵管通畅，一例输卵管通畅的有86例，双侧不通的有30例，30例其中22例1个月后再次通液治疗，双侧通畅的有16例，一侧通畅的有6例。全部患者未见不良反应。结论在超声监视下行通液治疗术安全可靠，可有效的治疗不孕不育，无副作用，可直接观察输卵管内径及通畅情况，同时也可附带治疗子宫及输卵管内的炎症。     

心肌酶谱和高敏肌钙蛋白T在小儿手足口病并发心肌损伤诊断中的临床应用价值

目的探析心肌酶谱、高敏肌钙蛋白T诊断小儿手足口病并发心肌损伤的临床应用价值。方法选择2016年4月至2017年1月湖北医药学院附属太和医院收治的手足口病患儿100例,根据心电图检查结果分为心电图正常组(n=40)和心电图异常组(n=60),同期选择体检健康者50例为对照组,比较三组的心肌酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、高敏肌钙蛋白T(hs-cTnT),并比较手足口病异常心电图组患儿急性期与恢复期的hs-cTnT、CK等生化指标。结果手足口病患儿心电图异常组的CK-MB、CK、α-HBDH、LDH、AST、hs-cTnT明显高于手足口病患儿心电图正常组和对照组,差异有统计学意义(P0.05)。手足口病患儿心电图异常组急性期CK-MB、CK、α-HBDH、LDH、AST、hs-cTnT水平明显高于手足口病患儿心电图异常组恢复期,差异均有统计学意义(P0.05)。结论心肌损伤为手足口病患儿的严重并发症,监测患儿的hs-cTnT、心肌酶谱等生化指标对手足口病患儿心肌损伤的诊治具有重要的临床价值。     

非小细胞肺癌miRNA-191启动子区甲基化状态及其临床病理特征的相关分析

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)微小RNA(miRNA)-191启动子区甲基化状态及其在NSCLC发生、发展中的意义.方法 甲基化特异性PCR(MSP)检测105份NSCLC患者术后肿瘤组织及其对应癌旁组织中的miRNA-191启动子甲基化水平,并分析miRNA-191启动子区甲基化状态与对应患者临床病理特征间的关系.结果 105份NSCLC肿瘤标本中有48份发生甲基化,甲基化率为45.71％,对应的癌旁组织中有87份发生甲基化,甲基化率为82.86％,二者比较差异有统计学意义(χ2=37.87,P<0.01).miRNA-191启动子区甲基化组与非甲基化组在TNM分期、肿瘤组织分化程度方面比较,差异有统计学意义(χ2=4.27、6.75,P=0.04、0.01),非甲基化组的TNM分期更晚、组织分化程度更低;而性别、年龄、组织类型方面比较,差异无统计学意义(χ2=0.01、0.89、1.80,P=0.91、0.35、0.25).生存分析结果显示,与NSCLC患者甲基化组比较,NSCLC患者非甲基化组的总生存期更短(χ2=6.06,P=0.01).结论 NSCLC肿瘤组织miRNA-191的甲基化率明显低于癌旁组织,NSCLC的发生、发展过程可能与miRNA-191启动子区的异常甲基化密切相关.     

苦参碱抑制宫颈癌HeLa细胞增殖作用及机制

目的探讨苦参碱对人宫颈癌HeLa细胞体外增殖的抑制作用及其分子机制。方法以不同浓度（0.5、1.0、1.5、2.0g/L）的苦参碱分别处理HeLa细胞24、48、72h后,应用MTT法检测细胞增殖抑制率,WesternBlot方法检测培养48h细胞中真核细胞翻译起始因子4E（eIF4E）、4E结合蛋白1（4E-BP1）蛋白表达情况;1.0g/L的苦参碱作用HeLa细胞1、3、6、12h后,Western Blot方法测其eIF4E、4E-BP1蛋白磷酸化水平。结果苦参碱明显抑制HeLa细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性：在相同时间内,随着苦参碱浓度的增加,HeLa细胞的增殖抑制率明显升高（F=235.035,P〈0.05）;在同一浓度时,随着苦参碱作用时间的延长,HeLa细胞的增殖抑制率也明显升高（F=320.207,P〈0.05）;2.0g/L苦参碱作用72h对HeLa细胞增殖抑制率最大,为（65.30±2.17）%。不同浓度苦参碱处理HeLa细胞48h后,eIF4E、4E-BP1蛋白的表达均无明显变化（F=0.171、0.932,P〉0.05）。1.0g/L苦参碱作用于HeLa细胞不同时间后,细胞中eIF4E、4E-BP1蛋白磷酸化水平均降低,且呈时间依赖性（F=43.48、107.23,P〈0.01）。结论苦参碱可以明显抑制体外培养宫颈癌HeLa细胞的增殖,其作用可能是通过抑制eIF4E以及4E-BP1的磷酸化,从而抑制蛋白翻译来实现的。