bFGF小分子干扰RNA诱导胶质瘤U251细胞凋亡作用的研究

目的:初步探讨以小分子干扰RNA沉默碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导胶质瘤细胞系U251凋亡的机制.方法:将U251细胞分为正常对照组、空载体组和实验组,按4×105个细胞每孔接种于6孔细胞培养板,培养24h后,空载体组和实验组按MOI=50分别进行空载体腺病毒(rAd5-null)和含有bFGF小分子干扰RNA(siRNA)的重组腺病毒(rAd5-bFGF)转染,转染72h后检测各组细胞的凋亡及细胞周期变化情况及其相关蛋白的表达.结果:与正常对照组、空载体组比较,实验组U251细胞经转染bFGF-siRNA后出现了明显的细胞凋亡(P<0.05),但细胞周期未见变化(P>0.05);Western blot结果显示,实验组U251胶质瘤细胞经转染bFGF-siRNA 72 h后,bFGF蛋白表达明显降低,同时STAT3及Bcl-2蛋白表达降低,Bax及Caspase-3蛋白表达增强.结论:bFGF小分子干扰RNA能够诱导U251细胞凋亡,其作用可能是通过调节STAT3信号转导通路实现的.     

卡氮芥-聚乳酸缓释剂生物相容性研究

目的：研究卡氮芥(BCNU)-聚乳酸缓释剂生物相容性。方法：将BCNU-聚乳酸缓释膜片(BCNU—PLA组)及聚乳酸缓释膜片(PLA组)分别植入2组Wistar大鼠的额叶脑组织内，观察其对脑、心、肝、脾、肺、肾及血液系统的影响。结果：BCNU—PLA组缓释膜片植入后造成的局部脑水肿持续7d以上，术后14d仍有2只鼠轻度脑水肿，但与PLA组比较差别无统计学意义。其他器官及血液系统未见明显异常。聚乳酸缓释膜片植入后，除早期手术造成的轻微脑水肿外，其他器官与系统无异常。结论：BCNU-聚乳酸缓释剂安全、可靠，生物相容性良好。     

类风湿性关节炎细胞水平建模四种方法比较

目的 比较四种方法 在培养类风湿性关节炎(RA)滑膜细胞(FLS)中的异同,为研究RA提供较好的体外实验模型建模方法 .方法 20例滑膜组织标本均用组织块法、单胶原酶消化法、单胰酶温消化法和双酶消化法四种方法 分离、培养RA FLS,均取培养第7日细胞计数,取第4代细胞鉴定,免疫组化鉴定细胞,测定分离细胞的数量和纯度.结果 四种培养方法 的培养时间比较,单胶原酶法>双酶消化法>组织块法>单胰酶法(P＜0.05).组织块法及双酶消化法所得细胞数较单胶原酶法及双酶消化法少(P＜0.05).第4代细胞均以FLS为主(>95%).结论 四种方法 体外培养可获得生物学特性稳定的RA FLS细胞系,其中组织块法是细胞水平建立RA体外实验模型成功率较高的方法 ,单纯胰酶法是较快速的方法 .     

卡莫司汀-聚乳酸缓释膜片植入家犬脑内的药代动力学研究

目的 观察卡莫司汀(BCNU)-聚乳酸(PLA)缓释膜片植入家犬脑内的药代动力学特征及BCNU在脑组织中的浓度.方法 制备10%BCNU-PLA缓释膜片,并将其植入12只家犬脑内,术后采集不同时间外周血样并处死家犬采集脑组织,采用高效液相色谱法测定血药浓度和脑组织药物浓度.结果 术后22 h家犬血中可测到BCNU,35 h达到峰值(平均243.64 ng/ml).术后5 d脑组织中药物浓度平均26.60 μg/g.结论 BCNU-PLA缓释膜片是治疗恶性胶质瘤的一个良好剂型.     

甲状腺重量及血清TSH浓度对小剂量~(131)I治疗甲亢疗效的影响

目的 :评价甲状腺重量及血清TSH浓度对小剂量1 3 1 I治疗甲状腺功能亢进症 (甲亢 )疗效的影响。方法 :患者治疗前均行甲状腺SPECT扫描并检测血清FT3、FT4、TSH浓度 ;1 3 1 I治疗的剂量为常规剂量的 1 2～ 2 3。结果 :①治疗前一次给药组TSH浓度为 0 .10± 0 .34mμ·L- 1 ,重复给药组为 0 .0 4± 0 .10mμ·L- 1 ,两者差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;②治疗前甲状腺的重量一次给药组为 5 1.2 2± 2 6 .0 9g ,重复给药组 87.34± 6 3.6 9g ,两者差异有显著性 (P <0 .0 0 0 1)。结论 :小剂量1 3 1 I治疗甲亢的疗效良好 ,多数患者能一次治愈 ,但对于大甲状腺患者或血清TSH浓度很低者则需多次治疗。     

突变型Aβ1～42致敏树突状细胞疫苗治疗阿尔茨海默病转基因鼠作用机制探讨

研究背景β-淀粉样蛋白在脑组织中沉积是阿尔茨海默病的典型病理特征之一,免疫疗法虽可有效清除β-淀粉样蛋白,但在治疗的同时也伴随出现一些不良反应.为了避免疫苗治疗过程中产生的严重不良反应如脑膜脑炎等.尝试采用突变型β-淀粉样蛋白(Aβ1～42)致敏树突状细胞制备阿尔茨海默病疫苗.并在充分评价其安伞性和有效性的基础上,进一步探讨其治疗阿尔茨海默病转基因鼠的作用机制.方法 提取C57/B6小鼠胫骨和股骨树突状细胞,分别以突变型Aβ1～42致敏树突状细胞(实验组)和经弗氏佐剂免疫的野生型Aβ1～42 多肽(佐剂阳性对照组)制备疫苗,然后接种于阿尔茨海默病转基因鼠.免疫组织化学染色观察小鼠脑组织中核激素肝x受体(LXR)、三磷酸腺苷结合盒转运子1(ABCA1)、CD45、晚期糖基化终产物受体(RAGE)和β-分泌酶(BACE)表达水平,体视学法半定量检测海马区cAl、CA2、CA3、DG、Rad和皮质区阳性神经元.结果 与阴性对照组相比.实验组和佐剂阳性对照组转基因鼠脑组织β-淀粉样蛋白表达水平显著降低(P=0.000),阴性对照组治疗前后无变化;经突变型Aβ1～42致敏的树突状细胞疫莆治疗后,转基因鼠脑组织中的LXR、ABCA1、CD45和BACE表达水平升高(P=0.000),RAGE表达水平降低(P=0.000).结论 经突变型Aβ1～42致敏树突状细胞制备的疫苗可通过多种因索的相互作用使阿尔茨海默病转基因鼠大脑β-淀粉样蛋白代谢达到新的免疫半衡,从而减少其在脑组织中的沉积.且无脑膜脑炎等严重不良反应,此与LXR/ABCA1通道作用有关.树突状细胞自身也在清除β-淀粉样蛋白的过程中扮演着预防小良反应发生的重要角色.     

脑膜瘤bFGF基因表达与增殖活性的相关性研究

目的 :探讨脑膜瘤bFGF的异常表达与其恶性程度和增殖活性的关系。方法 :采用Northern杂交和免疫组化对 3 7例脑膜瘤进行bFGF基因表达和蛋白表达及Ki 67标记指数的检测。结果 :2 2例Ⅰ级脑膜瘤bFGFmRNA有表达 ,6例Ⅰ级脑膜瘤无表达 ,Ⅱ、Ⅲ级脑膜瘤bFGFmRNA均有表达 ;bFGFmRNA总的阳性表达率为 83 8%。放射自显影片经薄层扫描仪扫描 ,所得的比值显示 ,Ⅱ、Ⅲ级脑膜瘤的比值为 0 82± 0 12 ,明显高于Ⅰ级脑膜瘤的比值 0 3 4± 0 0 6,差别有显著意义 ,P <0 0 0 1。免疫组化染色显示Ⅰ级脑膜瘤bFGF蛋白表达阳性细胞比率为 ( 2 9 7± 7 6) % ,Ⅱ、Ⅲ级为 ( 63 2± 11 7) % ,前者明显低于后者 (P <0 0 0 1)。Ⅰ级脑膜瘤Ki 67标记指数为 ( 2 8± 1 1) % ,Ⅱ、Ⅲ级脑膜瘤Ki 67标记指数为 ( 6 5± 1 3 ) % ,前者明显低于后者 (P <0 0 0 1)。结论 :bFGF的表达与脑膜瘤的恶性程度有关。     

原发性高血压基础血流和高流量状态下血管内皮因子变化及与高血压的关系

以正常血压者和原发性高血压患者为对象,比较两组在基础血流下内皮松弛因子(NO)和ET水平及内皮依赖性血管扩张改变。结果发现:1.基础状态下NO水平分别为(72.7±44.4)和(63.6±41.5)μg/L(t=1.00,P>0.05)。2.ET水平分别为(46.4±18.0)和(62.4±29.7)ng/L(t=-2.84,P<0.01)。3.高血压患者内皮依赖性血管扩张明显低于正常血压者(0.28±2.95)％对(5.39±3.96)％,t=7.23,P<0.01。结论认为:原发性高血压患者ET和NO水平在基础状态下处于不平衡状态,高ET水平是维持异常增高血压机制之一。NO生成或释放缺陷可能是导致高血压的另一重要机制。     

白藜芦醇对U251脑胶质瘤细胞Bcl-2、Bcl-XL、CyclinD1和STAT-3蛋白表达的影响

探讨白藜芦醇对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制和相关蛋白的表达及其意义.采用MTT法检测白藜芦醇对U251细胞的增殖活性的影响;采用ABC免疫组化法检测相关Bcl-2、Bcl-XL、CyclinD1和STAT-3蛋白的表达.结果显示,白藜芦醇对U251脑胶质瘤细胞生长有抑制作用,且呈时间、剂量相关;白藜芦醇作用于U251脑胶质瘤细胞后Bcl-2、Bcl-XL、CyclinD1、STAT-3蛋白表达下降,同时细胞形态也发生改变.白藜芦醇能抑制U251脑胶质瘤细胞的增殖,能诱导细胞凋亡.