091 无机砷和甲基化

无机砷既是一种毒物,又是一种抗癌药物.无机砷的许多作用机制与甲基化密切相关,无机砷的甲基化是其在人体内的主要代谢步骤之一;无机砷的致癌作用也与其引起基因的异常甲基化有关.本文对二者间的关系作一综述.     

白血病融合基因与微小残留病的研究进展

随着急性白血病化疗方案的改善和造血干细胞移植的进展 ,急性白血病的完全缓解 (ＣＲ)率明显提高。然而仍有许多ＣＲ患者在数年内复发 ,其主要原因是血液学ＣＲ后体内仍残留 10 6～ 10 9白血病细胞 ,称为微小残留病(ＭＲＤ)。有学者认为ＭＲＤ是血液学ＣＲ乃至持续完全缓解(ＣＣＲ)期间白血病复发的根源[1] 。如何早期准确地诊断ＭＲＤ ,是防治急性白血病复发的前提。目前已用于检测ＭＲＤ的技术主要有流式细胞计数法和聚合酶链反应法(ＰＣＲ) ,敏感性都可达到 10 3 (10 3 细胞中有 1个肿瘤细胞 )以上。应用最广的是ＰＣＲ技术 ,其关键是…     

TRICHOSTATIN A INHIBITS PROLIFERATION, INDUCES APOPTOSIS AND CELL CYCLE ARREST IN HELA CELLS

Objective： The histone deacetylase inhibitors （HDACIS） have been shown to inhibit cancer cell proliferation, stimulate apoptosis, an induce cell cycle arrest. Our purpose was to investigate the antiproliferative effects of a HDACI, trichostatin A （TSA）, against human cervical cancer cells （HeLa）. Methods： HeLa cells were treated in vitro with various concentrations of TSA. The inhibitory effect of TSA on the growth of HeLa cells was measured by MTT assay. To detect the characteristic of apoptosis chromatin condensation, HeLa cells were stained with Hoechst 33258 in the presence of TSA. Induction of cell cycle arrest was studied by flow cytometry. Changes in gene expression of p53, p21wafl and p27Kipl were studied by semiquantitative RT-PCR. Results： TSA inhibited cell growth in a time- and dose-dependent manner. Hoechst 33258 staining assay showed that TSA induced apoptosis. Cell cycle analysis indicated that treatment with TSA decreased the proportion of cells in S phase and increased the proportion of cells in G0/G1 and/or G2/M phases of the cell cycle. This was concomitant with overexpression of genes related to malignant phenotype, including an increase in p53, p21wall and p27Kipl. Conclusion： These results suggest that TSA is effective in inhibiting growth of HeLa cells in vitro. The findings raise the possibility that TSA may prove particularly effective in treatment of cervical cancers.     

LRP15基因的表达谱分析及其在白血病细胞中的表达

为检测LRP15基因在肿瘤细胞以及处于不同发育阶段造血细胞的表达状况 ,探讨其在肿瘤发生、发展以及在白血病分型预后中可能具有的作用 ,利用NCBI提供的SAGE文库及NCI提供的正常组织及肿瘤细胞基因表达数据库 ,分析比较了LRP15基因在多种肿瘤组织、细胞系和正常组织中的表达谱 ;采用RT PCR方法检测了该基因在正常血细胞及原代白血病细胞中的表达状况。结果显示 ,LRP15在人类多种正常组织及肿瘤细胞中有表达 ;在幼稚细胞中表达阳性率高于成熟细胞 (P <0 .0 1) ,在急性髓细胞白血病中M1、M2 和M3 表达的阳性率高于其它亚型 (P <0 .0 1) ;难治组LRP15表达的阳性率有高于初治组的趋势。结论 ,LRP15基因与急性白血病及其它多种肿瘤的发生、发展密切相关 ,对急性白血病的临床分型具有重要的意义 ,可能对判断急性白血病的预后具有一定价值。     

慢性乙型肝炎e系统状态与原发性肝癌的关系分析

目的为探讨慢性乙型肝炎病程中e系统状态与原发性肝癌的关系。方法比较慢性乙型肝炎及原发性肝癌患者的HBeAg和抗-HBe的阳性率。结果慢性乙型肝炎组与原发性肝癌组相比,e系统状态出现明显变化(P<0.005及P<0.01)。结论随着慢性乙型肝炎病程中HBeAg自发血清学转换,肝病活动性及肝纤维化程度逐渐加重,发生癌变的几率也大大提高了。     

曲古抑菌素A通过雌激素受体α依赖和非依赖方式抑制乳腺癌细胞中细胞周期素D1的表达

目的探讨曲古抑菌素A（TSA）对ER—α阳性和ER—α阴性乳腺癌细胞系的作用机制。方法以含不同浓度TSA的培养液培养MCF-7（ER—α阳性）和MDA—MB-231细胞（ER—α阴性）；采用四甲基亚噻唑蓝（MTT）法检测TSA作用后肿瘤细胞的增殖状态；用流式细胞仪定量分析肿瘤细胞增殖周期的改变；用半定量RT—PCR法测定ER—α和cyclinD1mRNA的表达。Western blot检测ER—α、p21和细胞周期素cyclinD1的蛋白表达水平。结果ER—α阳性的MCF-7细胞对TSA的敏感性明显高于ER—α阴性的MDA—MB-231细胞，TSA作用48h时前者的IC50约为40．6nmol／L，后者的IC50约为272．4nmol／L。在MCF-7细胞系中，TSA能有效抑制ER—α和cyclinD1 mRNA的表达，并增强cyclinD1蛋白通过泛素-蛋白酶体通路降解，使肿瘤细胞主要阻滞在G0／G1和G2／M期。在MDA—MB-231细胞系中，TSA对cyclinD1蛋白通过泛素-蛋白酶体通路降解作用增强，但对其mRNA转录本表达无明显影响。结论TSA不仅可以通过依赖ER—α途径抑制cyclinD1 mRNA的表达，也可通过增强泛素-蛋白酶体通路降解cyclinD1蛋白而不依赖于雌激素途径。     

ＬＲＰ１５基因对白血病复发和预后的生物信息学分析

目的　探讨白血病患者骨髓中ＬＲＰ１５基因表达水平与白血病复发的关系以及对白血病分型和预后的影响。方法　采用生物信息学方法,利用互联网平台和开放性的基于基因芯片检测的基因表达数据库,比较ＬＲＰ１５基因在不同白血病患者骨髓中的表达情况,分析ＬＲＰ１５表达水平与白血病复发、分型和预后的关系。结果　白血病初发患者的ＬＲＰ１５表达水平明显高于复发患者（０.２０４±０.０５３ｖｓ．０.０４４±０.０３５,Ｐ＝０.０４２）。在核型正常的急性髓系白血病（ＣＮ-ＡＭＬ）中,Ｍ０、Ｍ６ 型的ＬＲＰ１５表达水平高于Ｍ１、Ｍ２、Ｍ４及Ｍ５型（Ｐ＝０.００３）。ＬＲＰ１５表达水平与白血病患者的预后呈正相关（Ｐ＝０.００９）,包括ＣＮ-ＡＭＬ（Ｐ＝０.０３０）。结论　ＬＲＰ１５基因的表达水平与白血病复发密切相关,与ＣＮ-ＡＭＬ的某些亚型可能具有一定的相关性,对白血病患者的预后具有重要意义。     

新的白血病相关基因LRP15真核表达载体构建及在K562细胞中的表达

 目的构建LRP15基因开放阅读框架(ORF)序列的真核表达载体,并观察其在K562细胞中的表达情况.方法采用RT-PCR方法自1例白血病患者中克隆LRP15cDNA片段,将目的基因LRP15克隆入pGEM-T载体中并进行酶切鉴定和DNA序列测定.将鉴定过的DNA片段插入真核质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA-LRP15.脂质体介导法将其转染K562细胞,72 h以RT-PCR方法检测转染细胞中LRP15基因的表达情况.结果酶切鉴定和序列分析证实,重组质粒含有人LRP15基因ORF序列;转染实验表明LR15基因能在K562细胞中表达.结论成功构建LRP15基因真核表达载体,并在K562细胞中获得表达,为进一步研究LRP15基因的功能奠定了基础.     

伴12三体的慢性淋巴细胞白血病并发皮肤癌1例

患者,女,82岁,2年前发现面部皮肤多发性、进展性、无痛性皮损.表现为溃疡结痂或结节样的皮肤损害.