胰淀素诱导人肾小球系膜细胞凋亡

目的:研究胰淀素（amylin) 对人系膜细胞的毒性作用。方法：采用电镜、TUNEL、DNA凝胶电泳和碘化丙啶染色（PI）流式细胞仪分析技术及免疫组化技术，观察amylin对人系膜细胞的作用。结果：光镜和电镜下见细胞体积缩小、梁色质浓梁、致密、边移和凋亡小体形成；TUNEL细胞染色阳性，DNA凝胶电泳出现DNA“梯形”片断；amylin处理48h后，均可见亚二倍体细胞凋亡峰。定量分析示：系膜细胞的凋亡数量与amylin浓度呈剂量依赖性（P＜0．01）。amylin治疗组和对照组乳酸脱氢酶活性细胞释放率无显著性差异（P＞0．05）。结论：amylin对人系膜细胞具有细胞毒性作用，并可诱导系膜细胞的凋亡。amylin诱导人肾小球系膜细胞的凋亡可能是糖尿病肾病患者进行性肾小球硬化和系膜细胞逐渐消失的机制之一。     

RhoA/ROCK/ERK-MAPK通路在高磷环境调节内皮细胞凋亡的机制

目的 研究高磷环境下内皮细胞凋亡的可能调控机制和信号通路。方法 人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）在正常磷（1.0 mmol/L）、高磷（3.0 mmol/L）、正常磷+辛伐他汀（simvastatin,SV,1.0 mmol /L+SV）及高磷+SV (3.0 mmol /L+SV）培养基中培养24 h,Western Blot评价Ras同源物基因家族成员A（ Ras homolog gene family, member A, RhoA）,Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1/2 ( rho-associated coiled coil forming protein kinase 1/2, ROCK1/2 ),细胞外信号调控激酶-丝裂原活化蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase-mitogen activated protein kinase, ERK-MAPK）、磷酸化细胞外信号调控激酶-丝裂原活化蛋白激酶（ phosphorylated-ERK-MAPK, p-ERK-MAPK）、p38丝裂原活化蛋白激酶 ( p38-Mitogen Activated Protein Kinase , p38-MAPK)、磷酸化 p38-丝裂原活化蛋白激酶 （phosphorylated-p38-MAPK, p-p38-MAPK ）、以及精氨酸酶1（arginase1,ARG1）和一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase, NOS ）蛋白的表达,比色法和膜联蛋白V/碘化丙啶双染法 ( Annexin V-FITC/ propidium iodide, Annexin V-FITC/PI ) 检测ARG活性和细胞凋亡率。结果 高磷组RhoA,ROCK1/2,p-ERK MAPK,ARG1表达均上调, ARG活性升高,NOS表达下调,细胞凋亡增加;RhoA抑制剂SV能抑制高磷环境下p-ERK MAPK的活化和ARG1 的表达,降低ARG1活性,促进NOS表达,减少内皮细胞凋亡。结论 高磷环境HUVECs可通过RhoA/ROCK途径激活p-ERK MAPK的表达, 增加ARG活性,抑制NOS表达,引起内皮细胞凋亡;SV可以通过抑制RhoA/ROCK/ERK-MAPK通路,改善内皮细胞凋亡。     

肾移植患者尿液足细胞排泄的特征

目的观察肾移植患者尿液足细胞排泄的临床特征.方法(1)入选肾移植患者17例,其中男性13例,女性4例,平均年龄(34.8±9.1)岁,将患者分为肾移植排斥组(5例均经肾活检病理证实)、肺部感染组(4例)、非排斥非感染组(9例),10例健康志愿者为正常对照.(2)用podocalyxin单克隆抗体免疫组化染色鉴定足细胞;足细胞排泄的定量采用免疫组化染色直接计数.(3)尿沉渣其他成份采用巴氏染色并用计数板进行显微镜镜下计数.结果肾移植排斥组、肺部感染.组、非排斥非感染组和正常对照组足细胞尿的发生率分别是80%、100%、67%和10%;足细胞排泄水平(个/ml)为9.2±7.3、4.0±1.9、5.4±3.9和0.44±1.33.肾移植患者各组足细胞尿发生率和足细胞排泄水平无显著性差异(P＞0.05),但均较正常对照组显著增高(P＜0.05).以外,肾移植排斥组患者尿液有形成份,包括总细胞数、小管上皮细胞计数以及小管上皮细胞计数/尿肌酐值、白细胞、管型和黏液丝等与肺部感染组和非排斥非感染组患者比较均显著增加(P＜0.05),而后两组间比较均无显著性差异(P＞0.05).肾移植患者在移植后数小时会出现尿液中性粒细胞排泄增加,肾移植排斥时表现为尿单个核细胞排泄增加,而非排斥非感染患者无明显的细胞成份.结论尿液足细胞排泄不是肾移植排斥的鉴别指标.尿液细胞和管型等有形成份的显著增加是肾移植排斥的临床特征.肾移植不同时期其尿液排泄成分的特征不同.     

司维拉姆对慢性肾脏病血管钙化及病死率的影响

尽管透析技术有了很大进展,而终末期肾病(end-stage renal disease, ESRD)患者血磷的控制仍面临很大挑战。为了控制血磷水平,不恰当的饮食控制可能会导致更高的病死率,因此合理应用磷结合剂非常必要。传统的磷结合剂由于其副作用逐渐被淘汰。作为非含钙非含铝磷结合剂的代表药物,司维拉姆能在降磷的同时降低血低密度脂蛋白(low tehsith lipoprotein, LDL)水平及高钙血症的风险。此外,司维拉姆对冠状动脉钙化积分(coronary artery calcification, CAC)的进展可能也有保护作用,可以降低慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)患者心血管事件发生率。对65岁以上的血液透析患者,司维拉姆或许会显著降低全因病死率。磷结合剂的选用应确立个体化治疗方案,对于患有严重血管及其他软组织钙化、高钙血症、高脂血症的CKD患者,应优先选择司维拉姆来降低血磷水平。     

2型糖尿病肾病患者生存质量影响因素的研究

目的 研究2型糖尿病肾病患者生命质量现状及其影响因素。方法 采用世界卫生组织生命质量简表(WHOQOL-BREF)及焦虑自评量表(SAS)回顾性调查50例糖尿病肾病及59例单纯糖尿病患者的生存质量及焦虑情况,然后采用单因素分析、Spearman相关分析及Logistic回归逐步分析各因素对糖尿病肾病患者生存质量的影响。结果 单因素分析发现影响各维度得分及生存质量总分的因素有: 糖尿病病程、疾病分组、焦虑评分、胰岛素不良反应频率。多因素logistics回归分析发现糖尿病肾病患者生存质量的独立危险因素为糖尿病病程和吸烟量。结论 糖尿病肾病患者的生存质量受多种因素影响,尤其是糖尿病病程和吸烟量。应当及早发现并且采取针对性措施,注重临床治疗的同时提高患者的综合管理能力,延缓疾病进展,提高患者生存质量。     

前列腺素E1序贯疗法治疗糖尿病肾损伤疗效研究

目的观察前列腺素E1(PGE1)序贯疗法治疗糖尿病肾损伤(DKD)的临床疗效。方法选取2010年6月至2012年6月同济大学附属第十人民医院收治的糖尿病肾损伤患者82例,将其随机分为治疗组和对照组。治疗组予PGE1序贯给药(每日2次,每次10μg,每个月7～10 d,共6个月),对照组予PGE1单疗程给药(每日2次,每次10μg,连续用药14 d)。观察两组治疗前后24 h尿蛋白等指标的变化。结果 (1)PGE1序贯治疗和单疗程给药治疗,与其治疗前基础值比较患者24 h尿蛋白定量、尿24 h微量白蛋白定量、尿NAG、尿RBP和尿β2-MG均显著降低(P<0.05);(2)随访3个月和6个月,与单疗程治疗组患者比较,序贯治疗组24 h尿蛋白定量、尿24 h微量白蛋白定量、尿NAG、尿RBP和尿β2-MG均显著降低(P<0.05),同时伴有eGFR的显著升高。结论 PGE1序贯疗法和单疗程给药均能减轻糖尿病患者肾损伤的进展;PGE1序贯疗法较单疗程给药具有更好的糖尿病肾保护作用。PGE1序贯给药安全可靠。     

无菌水清洗法减低中段尿培养假阴性的效果观察

目的比较高锰酸钾溶液清洗消毒法与无菌水清洗法对中段尿培养结果的影响。方法采集2002年1月-2006年12月符合留取中段尿培养指征的住院患者的尿标本．将采用1：5000高锰酸钾溶液清洗、消毒法留取的尿样本列为消毒组（n=1572）;将采用无菌反渗水（血透用）清洗法采集的尿标本列为清洗组（n=544）;观察2组标本微生物培养阳性率及污染率的变化;培养出2种以上细菌定义为污染。结果5年共入选830例尿路感染患者,收集中段尿标本2116例,共检出病原体531株;消毒组和清洗组尿标本的微生物阳性检出率分别为20．04％和39．71％．2组比较差异显著;消毒组同一患者2次培养检出相同致病微生物的百分比为0．012％,清洗组则为0．105％,二者比较差异显著。但是同一患者2次培养检出不同和仅单次致病微生物的发生率比较差异不显著。消毒组的污染率（0．028％）显著高于清洗组（0．007％）。结论无菌水清洗留取中段尿在没有增加污染率的情况下,可显著提高尿培养致病微生物的阳性率;高锰酸钾溶液消毒法可能是导致培养高假阴性的原因。     

实验性充血性心力衰竭AVP系统和AQP_2的变化及黄芪的作用

目的　利用腹主动脉 下腔静脉瘘所致的慢性充血性心衰大鼠 ,研究心衰时心钠潴留的机制 ,观察精氨酸血管加压素 (AVP)和其V1a、V2 受体与AVP依赖性水通道水孔蛋白 2 (AQP2 )在其中的作用 ,以及黄芪对此的影响。方法　对腹主动脉 下腔静脉瘘所致的心衰大鼠在造瘘后的第一天起给予腹腔注射黄芪 0 .5g/ (kg·d) ,观察 5周后大鼠的心功能、肾功能指标的变化 ,并分别以斑点杂交与以GAPDH相对定量的RT PCR方法检测下丘脑AVP、主动脉与肾脏AVPV1a受体、肾脏AVPV2 受体与AQP2 mRNA的表达。结果　动静脉造瘘心衰大鼠心、肾功能较之假手术对照组明显下降 ,表现为右心房压力 (RAP)、左室舒张末压 (LVEDP)增高、左室 dP/dtmax、GFR、RPF、尿量、尿钠排泄量与自由水清除率降低 ,黄芪可显著改善上述异常。斑点杂交检测表明下丘脑AVPmRNA表达在心衰大鼠上调 ;半定量RT PCR检测显示心衰大鼠主动脉与肾皮质AVPV1a受体mRNA表达减弱 ,在肾髓质表达增强 ;肾皮质V2 受体与AQP2 mRNA表达增强 ,髓质减弱。黄芪可明显改善心衰大鼠的心、肾功能指标 ,并能完全或部分纠正这些基因的异常表达。结论　在腹主动脉 下腔静脉造瘘所致的充血性心力衰竭大鼠中存在有AVP系统和AQP2 表达的异常 ,中药黄芪对心衰的治疗作用部分与改善大鼠     

糖尿病肾损伤患者的尿足细胞排泄特点

我们以往的研究发现糖尿病(DM)和非DM患者在肾功能正常的情况下亦可检测到足细胞尿[1-2],据此我们认为足细胞尿的检测亦可作为DM伴肾损伤的早期诊断和动态检测指标.为此,我们观察了DM伴不同程度肾损伤患者的尿足细胞排泄特点.     

尿沉渣定量分析方法的评价及影响因素研究

目的　探讨尿沉渣定量分析方法及其影响因素。方法　选择经肾活检确诊的肾脏病患者以及肾移植患者共 10例 ,比较显微镜尿沉渣镜检染色定量计数板和尿沉渣自动定量测定仪 (UF 10 0 )对同一样本中管型和上皮细胞的检测结果 ;细胞染色采用改良巴氏染色 ;尿液细胞碎片采用流式碘化丙啶 (PI)染色检测。结果　流式细胞仪检测尿沉渣中的管型和上皮细胞较显微镜镜检结果分别增高 8.83倍和 5 .83倍 (P <0 .0 5 )。对患者同一尿沉渣分别用HDF液、正常人尿液和患者尿液进行悬浮并置 4℃保存 ,随着留置时间的延长 ,其上皮细胞数均逐渐减少 (P <0 .0 5 ) ,同时均伴有细胞碎片率逐渐增加。在 8h和 16h ,用患者尿液处置的尿沉渣细胞碎片率均明显高于HDF组 (P <0 .0 5 )。在 8h时 ,用正常人尿液处置的尿沉渣细胞碎片率明显低于患者尿液处置组(P <0 .0 5 )。而各组患者尿沉渣管型计数的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。患者尿沉渣 (3例 )分别用HDF、丙酮、乙醇和多聚甲醛固定、置 - 2 0℃保存 1周后进行PI染色 ,其细胞碎片率分别为 (31.6± 6 .4 ) %、(6 6 .4± 2 .7) %、(4 9.6± 1.4 5 ) %和 (6 5 .9± 3.4 ) % ,HDF和乙醇组细胞碎片率低于丙酮和多聚甲醛组 (P <0 .0 5 )。结论　应用荧光流式细胞仪和显微镜镜检定量计数对