高糖通过血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1通路促进人近端肾小管上皮细胞合成纤连蛋白

目的 研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在高糖诱导人近端肾小 管上皮细胞(HKC)产生纤连蛋白(FN)中的作用,探讨SGK1在糖尿病肾病(DN)肾小管间质纤 维化中的作用机制。方法 将带有SGK1显性激活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-S422DSGK1 mutant, SD)和带有SGK1显性失活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-K127NSNSGK1 mutant,KN)分别瞬时转染 HKC;同时,设空质粒(pIRES2-EGFP,FP)转染组和未转染组(NT)为对照。分别用正常糖(NG, 5.5 mnlol／L D-葡萄糖)和高糖(HG,25 mmol/L D-葡萄糖)刺激8 h后,采用RT-PCR和Western 印迹来观察SGK1和FN的mRNA及蛋白的表达。结果 正常葡萄糖环境下转染SD和KN后, HKC合成的FN mRNA和蛋白的表达没有显著性改变。高糖环境下,转染SD的HKC与其它组 比较,其SGK1mRNA表达显著性增高(P<0.01),SGK1蛋白过度活化(P<0.01),其FN mRNA和 蛋白的表达显著增加(P<0.01)。转染KN的HKC与其它高糖组HKC比较,其活化的SGK1蛋 白显著减少(P<0.01),其合成FN mRNA和蛋白亦显著减少(P<0.01)。结论 高糖诱导HKC 的FN mRNA和蛋白的表达增加是依赖于SCK1的表达与活化,提示在DN中,高糖能通过SGK1 介导的信号通路来诱导人近端肾小管上皮细胞过度合成FN,促进肾小管间质纤维化。     

重组腺相关病毒介导的nm23H1载体的构建及鉴定

目的对载有肿瘤转移抑制基因nm23H1的重组腺相关病毒(AAV)载体进行构建及鉴定。方法用基因重组的方法构建含全长nm23H1的重组腺相关病毒骨架质粒，利用磷酸钙沉淀法将腺相关病毒载体系统共转染入病毒包装细胞293细胞中，分别合成AAV-nm23H1和AAV—Laz，经PCR，DNA测序，酶切鉴定，用斑点杂交法测定重组病毒的滴度。并用重组病毒感染卵巢癌细胞测定其转染效率。结果成功构建并鉴定nm23H1，梯度均为10^10病毒分子／ml，转染效率为70％。结论构建AAV—nm23H1为临床治疗肿瘤转移提供了新的手段。     

滋肾清热活血方治疗大鼠系膜增生性肾炎的实验研究

观察滋肾清热活血方对系膜增生性肾炎（MsPGN）的疗效,并探讨其机制。采用SD大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型,分正常对照组、模型对照组,治疗组对比研究。观察肾小球系膜区情况及各组大鼠肾小球培养上清中白细胞介素-1(IL-1)的活性等。结果：治疗组与模型对照组比较,肾小球系膜细胞（MC）的增生和系膜基质的积累明显受到抑制,系膜区致密电子物沉积显著减轻;肾小球培养上清中IL-1活性显著降低。提示：滋肾清热活血方能抑制MsPGN系膜区MC的增殖及基质的积累,其作用可能与抑制肾小球分泌的IL-1活性有关。     

良、恶性胃疾患时胃粘膜内胃腺囊的比较研究

近年来,国外一些学者注意到胃粘膜内胃腺的囊性扩张(以下简称胃腺囊)与胃癌有密切关系。国内尚未见此类报导。本文比较了60例良、恶性胃疾患中胃腺囊的情况,对其发生率、诊断标准、产生机制及其与胃癌的关系等进行了研究和探讨。     

胃腺囊—一个有助于胃癌诊断的病理变化

近年来,国外一些学者发现胃粘膜腺体囊性扩张(简称胃腺囊)与早期胃癌有密切关系。我们也曾比较过良、恶性胃疾患中的胃腺囊,发现恶性胃疾患中的胃腺囊明显多于良性胃疾患,癌旁粘膜中明显多于非癌旁粘膜。有些学者提出:胃粘膜活检标本中如发现胃腺囊,即使未见到恶性病变,也应将胃腺囊予以报告,以提示临床医师注意该患者可能隐匿有胃癌或有发生胃癌的可能。但胃腺囊也可存在于良性胃疾患中,因此,确定哪些胃腺囊与胃癌的关系更为密切,对于病理工作者有重要的现实意义。我们尚未见到国内外有此报道。本文比较了良,恶性胃疾患中胃腺囊的不同特征,并对此     

浅谈糖尿病门诊健康教育的几点体会

糖尿病门诊健康教育能够改善门诊糖尿病患者及家属对糖尿病知识的匮乏,提高治疗的依从性和遵医行为,对维持糖尿病长期稳定有重要作用;同时也提高了医务人员的自身素质推动了服务质量,减少了医疗纠纷,降低了医疗费用,提高了患者满意度,有助于建立和谐的医患关系。     

卵巢癌自杀基因治疗的旁观者效应及其与间隙连接蛋白43表达的关系

目的 探讨单纯疱疹病毒－胸苷激酶／更昔洛韦（HSV－TK／GCV）在卵巢癌治疗中的旁观者效应及其与间隙连接蛋白（Cx)43表达的关系,同时观察全反式维甲酸（RA）对两者关系的影响。方法 四甲基偶氮唑蓝（MTT）法比较经HSV－TK／GCV治疗及RA作用前后卵巢癌细胞株OVCAR3、CAOV3细胞旁观者效应的强弱;采用流式细胞仪,蛋白质免疫印迹法（Western Blot)、间接免疫荧光染色检测两卵巢癌细胞株RA作用前后Cx43的表达,Cx43的表达以平均荧光强度表示。结果 （1）HSV－TK／GCV对OVCAR3细胞产生较明显的旁观者效应,而对CAOV3细胞旁观者效应弱,两者比较,差异有显著性（P＜0．05）。（2）RA对OVCAR3细胞的旁观者效应有增强作用（P＜0．05）,但不影响CAOV3细胞的旁观者效应（P＞0．05）。（3）流式细胞仪检测提示,OVCAR3细胞中Cx43的表达为4．45,而CAOV3细胞中Cx43的表达为0．89,两者比较,差异有显著性（P＜0．05）;Western Blot、间接免疫荧光染色检测结果也表明,OVCAR3细胞有Cx43的表达,且定位于细胞膜,而CAOV3细胞中无Cx43的表达。（4）RA作用后,Western Blot、间接免疫荧光染色检测均显示,两卵巢癌细胞株的Cx43表达增加;流式细胞仪检测提示,细胞中Cx43表达均明显增加,OVCAR3细胞由4．45增至9．83,CAOV3细胞由0．89增至3．15（P均＜0．05）,Cx43仍定位于OVCAR3的细胞膜和CAOV3的细胞浆。结论 卵巢癌HSV－TK／GCV治疗的旁观者效应与其Cx43表达以及定位有关,增强细胞膜Cx43表达,将增强卵巢癌HSV－TK／GCV的旁观者效应,提高其疗效。     

细胞迁移调控因子Rho与肿瘤转移

细胞迁移是肿瘤转移过程中的重要步骤 ,RhoGTPases作为细胞迁移启动调节的关键分子 ,参与细胞头部伪足的延伸、新的粘附建立、细胞体尾部收缩等过程 ,并通过启动Rho下游效应分子调控细胞迁移全过程。Rho效应点有望作为抗肿瘤转移的理想靶点     

转化生长因子-β_1协同转录因子Snail促进乳腺癌转移

目的研究表明转录因子Snail是肿瘤转移重要的调节因子,但关于影响Snail调节作用的因素及相应的信号转导通路研究较少。该研究探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)与转录因子Snail调节乳腺癌细胞转移潜能及可能机制。方法选用乳腺上皮性癌细胞株MCF-7为研究对象,构建正义与反义Snail的腺病毒载体,应用相差显微镜观察细胞形态的变化;应用Boyden小室体外侵袭实验检测癌细胞体外转移潜能;应用Western蛋白印迹检测细胞免疫表型的改变及TGF-β1调节转录因子Snail表达过程中对MAPK、PI3K信号通路的影响。结果TGF-β1、Snail均能使MCF-7细胞伪足增多、增长,细胞体外侵袭力增强,且两者有协同作用;TGF-β1可以刺激Snail及间质标记基因FN、MMP-2、RhoA蛋白表达,同时活化ERK、Akt且其活化有一定的时间依赖性;反义Snail能抑制TGF-β1对ERK、Akt信号通路的活化。结论TGF-β1通过增加Snail、FN、MMP-2、RhoA蛋白的表达和活化ERK、Akt信号通路而促进乳腺癌细胞转移潜能的增强;并且TGF-β1的这种作用能被反义Snail所拮抗。     

老年肺心病加强夜间护理的体会

为了减少老年肺病的复发,提治高治愈率,通过适宜的护理措施和得力的治疗方案,特别是加强了对肺病病人的夜间护理。在68例病人中,除3例因年高、病情重抢救无效死亡外,均告治愈或好转出院。因此适宜的护理措施,对提高肺心病病人的治愈率、降低死亡率具有重要的意义。