核受体在肿瘤放疗增敏中作用机制的研究进展

放疗是肿瘤治疗的主要方法之一,但肿瘤存在辐射抗性,且正常组织存在辐射耐受剂量问题,两者严重影响肿瘤的放疗效果。因此,研究辐射增敏新策略以提高肿瘤细胞的辐射敏感性尤其重要。核受体是细胞内含量丰富的一类转录因子超家族,参与机体多种病理生理过程。近年来的研究结果表明,核受体及其相关配体可能参与肿瘤的放疗抵抗,因而核受体可能是肿瘤放疗增敏的新靶点。笔者总结了核受体及相关配体在肿瘤放疗增敏方面的研究进展。     

miR-212／132簇生物学功能研究进展

目的：总结miR-132和miR-212对肿瘤发生发展的作用及其在神经免疫等领域的生物学功能。方法：应用PubMed及万方数据库检索系统,以“miRNA、miR-212／132、miR-212及miR-132”为检索词,检索1990-2013年相关文献。共检索到中文文献305条,英文文献228条。纳入标准：1）miRNA的作用;2）miR-212／132基因簇结构;3）miR-212／132基因簇的生物学功能。根据纳入标准符合分析的文献55篇。结果：microRNAs是一类具有转录后调控功能的非编码小RNA,参与细胞增殖、凋亡和分化。miR-132和miR-212在脊椎动物中有着相似并且高度保守的序列,位于人染色体17p13．3,在基因组中呈现串联排列,称为miR-212／132基因簇。miR-132和miR212由miR-212／132基因簇共同转录剪切形成。miR-212／132簇不但与肿瘤的发生发展相关,而且在神经元的发育、成熟及功能中起到重要作用。它们还参与了生物钟形成并与免疫调节相关。结论：miR-212／132基因簇在肿瘤、神经及免疫等领域均发挥重要作用,因此对于miR-212／miR-132簇的深入研究必将给多种疾病的治疗带来希望。     

青蒿素联合^60Co γ射线对HeLa和SiHa细胞所致DNA损伤的研究

目的探讨青蒿素联合^60Coγ射线照射后对人宫颈癌HeLa和SiHa细胞的DNA损伤。方法采用甲基四唑蓝（MTT）法检测不同浓度青蒿素对人宫颈癌HeLa和SiHa细胞的抑制效应,确定青蒿素的最适实验浓度;采用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）检测照射后HeLa和SiHa细胞DNA的损伤情况。结果青蒿素对HeLa和SiHa细胞的抑制率存在剂量-效应关系;SCGE结果显示：两种细胞的单药组与对照组的彗星细胞检测指标（拖尾率、尾长、OLIVE尾矩和彗尾DNA%）无明显差异（P〉0.05）;在相同照射剂量下,青蒿素加照射组的HeLa细胞的彗星细胞检测指标高于单纯照射组（P〈0.05）,而SiHa细胞差异无统计学意义（P〉0.05）。结论青蒿素本身不能引起He-La和SiHa细胞DNA损伤,但辐照后可致HeLa细胞DNA损伤加重,增加了HeLa细胞的辐射敏感性,而对SiHa细胞没有辐射增敏作用。     

血红素氧化酶-1治疗放射性皮肤损伤的疗效观察

目的 探讨介导血红素氧化酶-1( heme oxygenase,HO-1)的腺病毒在治疗急性放射性皮肤损伤中的作用.方法 选取33只雄性SD大鼠,电脑数字表法随机分为3组,磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、介导绿色荧光蛋白基因的腺病毒(Ad-EGFP)组及介导HO-1基因的腺病毒(Ad-HO-1)组,每组11只.每组取3只大鼠,用于检测腺病毒目的基因的表达.用直线加速器产生的40 Gy负电子线照射各组余下大鼠臀部皮肤.照射后立即分别皮下注射PBS、Ad-EGFP或Ad-HO-1.采用半定量方法对皮肤损伤评分,每周评定2次,观察7周.结果 注射Ad-HO-1的皮肤真皮层内见HO-1表达强阳性.照射14 d后,Ad-HO-1组皮肤损伤明显低于PBS对照组和Ad-EGFP组(q=0.000 ～0.030,P＜0.05).结论 HO-1能显著减轻急性放射性皮肤损伤,表明Ad-HO-1可以用于治疗放射性皮肤损伤.     

转录因子Yin Yang 1(YY1)在食管癌中的表达及其对食管癌细胞功能的影响

目的:探讨转录因子Yin Yang 1(YY1)在正常食管组织和食管鳞癌组织中的表达及其在食管癌发生发展中的作用?方法:免疫组化染色检测15例正常食管组织,39例食管癌旁组织和88例食管癌组织样品中YY1蛋白表达水平;噻唑蓝(MTT)和克隆实验检测食管鳞癌细胞(TE-1细胞)增殖和生长变化;蛋白质印迹(Western blot)技术检测转染后转录因子YY1和p21表达水平;细胞划痕实验和Transwell实验检测TE-1细胞迁移?侵袭能力的变化?结果:与正常食管组织和食管癌旁组织相比,YY1 蛋白在食管鳞癌组织样品中的表达显著提高?此外,转染了YY1过表达载体后明显抑制TE-1细胞生长,而干扰YY1表达则可促进细胞的生长;同时伴随着YY1靶基因p21(也称p21WAF1/Cip1)的变化?TE-1细胞转染YY1过表达载体后,细胞的侵袭?迁移能力增强?结论:食管鳞癌组织中YY1表达显著上调,YY1可调节细胞的生长和转移侵袭能力?因此,YY1有望成为食管癌诊断和发展的分子标志物,也有可能是食管癌基因治疗的一个潜在靶点?     

X射线照射后小鼠血清、小肠和心脏组织中游离泛素水平的变化

目的 研究X射线照射对C57 BL/6N小鼠血清、小肠和心脏组织中游离泛素（free UB）水平的影响。方法 应用ELISA法定量检测受照小鼠血清、小肠、心脏组织匀浆中free UB的含量;Western blot法检测小鼠组织中free UB蛋白的表达;RT-PCR法检测小鼠组织中free UB编码基因UBB的mRNA水平。结果 与未照射组相比,照射后24和48 h,小鼠血清中free UB水平随照射剂量的增加而增加（F=183.1、435.3,P<0.01）;5和10 Gy照射后,血清中free UB随照射后时间的延长而增加（F=131.4、442.9,P<0.01）。与未照射组相比,10 Gy X射线照射后24 h,小肠中free UB蛋白表达水平和free UB编码基因UBB的mRNA表达水平均明显增加（t=-18.7、-10.1,P<0.01）;而心脏组织中free UB蛋白表达水平和UBB的mRNA表达水平均无明显改变（t=-2.0、3.1,P > 0.05）。结论 通过诱导辐射敏感组织小肠中free UB蛋白表达水平增加,电离辐射能够增加小鼠血清中free UB的表达量;free UB水平可能与组织的辐射敏感性和组织受损程度有关。     

血管内皮生长因子C通过调控神经系统黏附分子-1促进食管癌发展的研究

目的 探讨血管内皮生长因子C (VEGF-C)在食管癌发展中的作用,并研究VEGF-C与神经系统黏附分子-1(CNTN-1)的关系.方法 运用实时定量PCR分析食管癌标本和相应的癌旁组织中VEGF-C/VEGFR的mRNA的表达水平,并构建VEGF-C过表达和基因沉默载体,转染食管癌细胞株TE-1,检测转染前后CNTN-1的表达差异,并运用染色质免疫沉淀(ChIP)法测定细胞转染前后转录因子C/EBP与CNTN-1启动子的相对结合量,以研究VEGF-C是否通过调控CNTN-1基因转录参与食管癌进展.结果 VEGF-C及VEGFR mRNA、CNTN-1 mRNA在肿瘤组织中高表达,且二者之间存在明显相关性.转染VEGF-C过表达载体的TE-1细胞中CNTN-1 mRNA表达显著增强,而转染了两种shRNA载体的细胞,CNTN-1 mRNA水平均降低(P＜0.01).ChIP测定结果发现在CNTN-1上有C/EBP的结合位点,转染VEGF-C过表达载体后,TE-1细胞中C/EBP与CNTN-1启动子的相对结合量显著增高(P＜0.05).结论 食管癌组织中VEGF-C及其受体呈高表达,与食管癌发展相关；VEGF-C可通过影响C/EBP对CNTN-1的转录活性来影响肿瘤细胞TE-1的生长和转移.