利用2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）测定细胞活力的方法与应用

目的：利用细胞内脱氢酶对2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）的催化作用建立比目前常用的3-（4,5-二甲基-2-噻唑）-2,5-二苯基溴化四氮唑（噻唑蓝,MTT）法更可靠的测定细胞活力的方法。方法使用不同浓度的TTC溶液测定细胞活力,并确定TTC的有效浓度范围。在计算所测定值与细胞数量函数关系的基础上,通过与传统测定细胞活力的MTT法进行比较,分析该方法的可行性。结果0．5％～1．0％浓度范围内的TTC溶液可用来测定细胞活力,测定值与细胞数量之间存在线性关系,与MTT法得到的结果基本一致,可避免MTT法测定过程中来自于细胞培养体系中其他抗氧化物质的非特异性干扰。结论 TTC可用于测定细胞活力,可替代常规的MTT法,具有操作简便,费用经济,结果可靠等优点。     

秀丽线虫野生株系和缺氧敏感株系的差异蛋白质组学研究

目的 研究秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)野生株系N2和缺氧敏感株系(ia04)的差异蛋白质,为进行线虫在缺氧环境下的应答机制研究奠定基础.方法 同步化培养2种株系的线虫,培养至L4期时,常规方法提取总蛋白,采用双向电泳分离和串联质谱分析,搜索Swiss-Prot线虫数据库,鉴定蛋白种类并根据基因本体论(gene ontology,GO)进行分析.结果 质谱成功鉴定了其中的25个差异显著蛋白(ratio＞ 2.0,P＜0.05),其中N2株系检测到的表达量比ia04株系高的主要是热休克蛋白(HSP-70,HSP-60)、GTP结合蛋白(TAG-210)、乙酰辅酶A脱氢酶中链(GN=T);ia04株系检测到的表达量比N2高的是延伸因子(EFT-3)和铁硫蛋白-1 (ISP-1),在ia04株系中,HSP的含量明显低于N2株系,说明这可能是ia04株系对缺氧敏感的原因之一.根据GO注释结果发现,鉴定到的这些差异蛋白与线虫的DNA合成及生长发育的相关性较大.结论 蛋白质组学的方法为线虫缺氧的研究提供了有参考价值的数据,不同株系差异蛋白的发现可促进对缺氧应答机制的了解,且可从蛋白质水平揭示重要表型的基因表达机制.     

高功率微波辐射对小鼠学习记忆能力的影响

高功率微波（hish power microwave，HPM）是一种峰值功率很高的特殊类型微波，在民用和军事领域有着广泛的应用前景。已有的微波辐射生物学效应数据大都是建立在中低功率微波的研究基础之上，而HPM辐射效应尚无定论，因此亟需进行系统研究和评估。学习记忆属于脑的高级功能，学习记忆任务模型则是评价环境因素危害的经典方法之一。在机体整体出现损伤之前，脑的学习记忆活动可能已出现功能上的障碍。本实验中我们分别使用被动回避及方形水迷宫两个实验方法，以研究HPM对小鼠学习记忆能力的影响，为HPM生物学效应研究提供基础资料。     

N-甲基-D-天冬氨酸致(癎)乳鼠行为学与脑内脑红蛋白表达的研究

本文利用未成熟大脑对N-甲基-D-天冬氨酸(N-meth-yl-D-aspartate,NMDA)高度敏感,诱导大鼠乳鼠出现特异的屈曲样痉挛的癫癎发作,建立婴儿痉挛的动物模型,运用免疫组化(IHC)技术及Image J图象分析软件,半定量分析致癎乳鼠大脑额叶皮层组织癫癎发作时脑红蛋白(NGB)的表达规律。1材料和方法实验动物:Wistar雄性乳鼠(生后18d)49只,由军事医学科学院动物中心提供。主要试剂:N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)(美国Sigma公司),小鼠抗大鼠NGB单克隆抗体(军事医学科学院制备)[2],免疫组织化学染色ABC-SPTM试剂盒(美国ZYMED公司)。NMDA致癎乳…     

用免疫组织化学方法研究NOV原癌基因在大鼠中枢神经系统中的表达

用免疫组织化学方法研究ＮＯＶ原癌基因在大鼠中枢神经系统中的表达张成岗蔡文琴苏炳银Ｂ．Ｐｅｒｂａｌ＊（第三军医大学组胚教研室＊ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｅＰａｒｉｓＶＩ，Ｐａｒｉｓ，Ｆｒａｎｃｅ）肾母细胞瘤过度表达基因（ＮｅｐｈｒｏｂｌａｓｔｏｍａＯｖｅｒｅｘ...     

指数和几何曲线中k值的线性寻优算法

本文根据指数曲线和几何曲线经对数直线化后回归平方和SSR与k值的函数关系，通过对SSR求导和用迭代算法解出使SSR达到极大值的k值，并编制了通用的计算程序。该方法应用简单，其拟合优度不亚于其他曲线拟合的寻优算法。     

神经突起生长导向因子（netrin）受体家族研究进展

神经突起生长导向因子netrin是一种分泌蛋白 ,在神经发育所需的轴突导向及细胞迁移中发挥双重导向功能———吸引或排斥 ,主要依赖于生长锥所表达的不同受体结肠癌缺失蛋白 (DCC)或UNC5同源物 (UNC5H) ,从而传递不同信息。同时 ,dcc和unc5h也是肿瘤抑制基因 ,近年来的研究显示这种双重导向功能可能归因于它们属于配体依赖性受体家族。依赖性受体的重要特征是缺乏相应配体时将诱导细胞凋亡 ,因此推测DCC和UNC5H不仅为神经元传递信号所必需 ,同时也是细胞生存因子 ,与细胞存活及正常功能的发挥密切相关。     

用图像分析作交点计数的尝试

目的;探讨如何利用图像分析仪定量测量血管表面神经纤维密度。方法：对相同视野中的神经纤维分别采用灰度法和交点计数法进行测量,然后分析二者之间的函数关系,为进行统计学分析。结果：建立了测量血管表面神经纤维密度的灰度法和交点计数法之间的对数关系进行验证。结论：在图像分析仪上可以利用灰度法测量进行神经纤维密度的定量分析。     

Na^＋，K^＋—ATPase研究进展

Na+ ,K+ ATPase广泛分布于多种细胞的细胞膜上 ,是维持细胞内外Na+ ,K+ 浓度梯度的关键酶。Na+ ,K+ ATPase由α,β和γ亚基组成 ,在不同组织 ,不同发育阶段表达不同的亚型。激素等通过蛋白激酶A、蛋白激酶C、酪氨酸激酶等调节Na+ ,K+ ATPase的活性。小的跨膜蛋白结合Na+ ,K+ ATPase的特异亚基 ,调节其活性。Na+ ,K+ ATPase不仅参与离子转运、蛋白转运、维持离子自稳平衡 ,而且在脊椎动物胚胎发育、神经元导向、中枢神经系统发育、细胞形态维持、细胞粘附等方面发挥作用 ,甚至可作为喹巴因的受体 ,参与信号传递。     

反义nov基因对培养神经元神经递质分泌的影响

目的：研究nov基因在神经元功能分化和神经递质分泌中的作用。方法：利用反义核酸技术构建成反义nov基因真核表达载体pBK-nov。采用脂质体转染技术,交坂义表达载体导入培养的大鼠大脑皮质神经元和纹状体神经元,经G418筛选出被转染的神经元继续培养,RT－PCR检测围染后nov mRNA的表达量。采用高效氨基酸分析仪和高效液相色说 ,检测抑制表达后氨基酸类递质和多巴胺类递质的变化。结果：谷氨酸和肾上腺素的分泌量明显下降,γ－氨基酸上升,而对多巴胺的分泌没有显著的影响。结论以上结果提示,nov基因在中枢神经系统神经递质的生成释放和代谢中起作用,可能籍此调节神经系统的功能。