应用PCR法对孕妇HSV-Ⅱ型感染的调查

单纯疱疹病毒(HSV）感染是主要性传播疾病之一，尤其对妇女儿童的危害很大。HSV虽可以引起感染症状，但多数感染无症状或症状轻微，属隐性或亚临床感染。为调查大连市妇女的感染水平以及其感染与妊娠结局的关系，我们应用PCR法对800名孕妇和200名已婚妇女(非妊娠期)HSV-Ⅱ型感染情况进行了调查，现报道如下。     

孕妇单纯疱疹病毒Ⅱ型感染的分子流行病学调查

采用ＤＮＡ聚合酶链反应即ＰＣＲ法调查了大连市８００名孕妇和２００名已婚非妊娠期妇女（作对照组）宫颈ＨＳＶ－Ⅱ型感染情况。结果表明孕妇组感染率为１８．０％，对照组感染率为６．０％，总感染率为１５．６％，两组比较有差别（Ｐ＜０．０５），即孕妇的感染率高于对照组。孕妇感染阳性者的异常妊娠结局占１２．５％，感染阴性的异常妊娠结局占０．７６％，两组比较有非常显著差别（Ｐ＜０．０１）。     

孕妇单纯疱疹病毒Ⅱ型的检测

单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）感染是性传播疾病之一，尤其对妇女儿童的危害很大。为调查大连市妇女的感染水平以及感染后对妊娠的影响，我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）［１－３］对８００例孕妇和２００例已婚妇女（非妊娠期）ＨＳＶⅡ型感染情况进行调查，现报道如下。材料...     

汉坦病毒S基因在原核细胞中高效表达的研究

目的通过基因工程的方法从鼠肺中扩增出汉坦病毒的S基因，并实现其蛋白的体外表达。方法应用RT—PCR方法扩增汉坦病毒汉城型（SEO）的YZG-Changchun株S基因，然后克隆到pMD18-T载体中，经序列分析后，定向克隆入原核表达载体pET-28a中，转化大肠埃希菌Rosetta用IPTG诱导表达后，将全菌裂解，用SDS-PAGE和Westem—blot检测重组菌中外源蛋白的表达情况和免疫反应性的分析。结果S基因在原核细胞中得到了高效表达，表达的蛋白占菌体蛋白总量的37％，且具有良好的免疫反应性。结论汉坦病毒S基因蛋白可通过基因工程手段获得体外高效表达，这将对其功能的研究及为汉坦病毒疫苗的研究提供基础。     

上颌窦癌肉瘤1例

患者,男,４８岁。因鼻出血、鼻塞３月伴右面部肿胀１月于１９９８年１０月２２日收住我院。检查：Ｔ３７℃,Ｐ８８次／ｍｉｎ,ＢＰ１６／１ｋＰａ,自动体位,神志清,查体合作。右面部膨隆伴压痛,右鼻腔流出少许血性分泌物,右鼻腔内被新生物堵塞,口腔右上腭见３ｃｍ×４ｃｍ隆起伴粘膜溃烂,副鼻窦ＣＴ片示：右上颌骨占位伴骨质破坏。上颌窦新生物活检,病理报告为上颌窦内癌肉瘤复发,浸润生长,破坏骨质伴大量坏死。病理免疫组化染色结果示：肿瘤细胞的耐药基因（ＧＳＴＰｉ）阳性率８０％,显色（）。入院后先行化疗,方案：（…     

狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗中间试验生物安全评价

目的　本试验应用狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗- pVGN免疫4 0条无狂犬病疫苗免疫史的家犬,共免疫3次。通过观察受试犬的临床表现,监测抗性基因的转移,检测质粒及其主要元件在主要脏器和注射组织的分布、存留及整合,观察主要脏器组织病理学变化,分析疫苗对妊娠母犬及其子代的影响,来评价该疫苗的生物安全性。结果表明,该DNA疫苗可在动物体内诱导良好的体液免疫反应。同时,受试犬未出现任何异常临床表现;DNA疫苗中的卡那霉素抗性基因未在免疫犬肠道正常菌群中发生转移,DNA质粒也未经肠道菌群、尿液和唾液排放到体外;在心、脾、肾和注射部位均能检测到质粒的存在,并分别能存留约18、14 - 18、14和2 6周以上,但质粒DNA未与上述组织的基因组DNA发生整合;在主要代谢器官肝脏中始终未检测到质粒DNA或其主要元件;上述各主要脏器未出现组织病理学变化;对妊娠母犬和其子代无不良影响。说明本狂犬病“二价”DNA疫苗不仅具有良好的免疫原性,而且具有很好的安全性。     

人C-myc乳腺定位表达转基因小鼠模型的建立

以ｐＣＡＴ ＷＡＰ和ｐＷＭ为原始质粒 ,构建ＷＡＰ启动子调控ｃ ｍｙｃ的乳腺组织特异性表达载体ｐＷＣＳ。载体用Ｂｇ1Ⅱ +ＢａｍＨⅠ酶切 ,回收基因片段 3 5ｋｂ的ＷＡＰ ｃ ｍｙｃｌ ＳＶ4 0 ＰｏｌｙＡ ,通过显微注射方法导入Ｃ57ＢＬ 6Ｊ×ＤＢＡ 2ＪＦ1 代小鼠受精卵的雄原核内。共注射 10 0 0枚卵 ,将存活的约 6 0 0枚卵分别移植至 2 9只假孕母鼠输卵管内 ,获得仔鼠 4 5只。ＰＣＲ检测 ,阳性鼠 9只 ,Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测 ,阳性鼠 3只 ,其中 1只母鼠 ,2只公鼠 ,在饲养过程中 ,1只母鼠意外死亡。对 2只转基因公鼠的Ｆ1代ＰＣ…     

重组逆转录病毒介导的转蚓激酶基因兔

目的通过重组逆转录病毒介导获得转蚓激酶基因家兔。方法将含有蚓激酶基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了蚓激酶重组逆转录病毒载体,利用脂质体转染PA317包装细胞,G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后病毒上清直接注射雄性兔的睾丸组织转染精原干细胞。结果病毒上清经NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×104CFU/mL。病毒注射3月龄兔睾丸组织,过1.5个月取其睾丸、肾、脾、肝、肺进行组织切片观察,结果正常。提取交配所得F0、F1代仔兔基因组,经PCR、Southern检测,转基因阳性率F0代为6.3%(2/32)、F1代为15.3%(2/13)。结论通过重组逆转录病毒直接注射3月龄兔睾丸组织可获得转基因兔,病毒对兔的脏器无损害。     

抗狂犬病病毒CVS-11株单克隆抗体的制备及鉴定

目的 制备抗狂犬病毒单克隆抗体,为建立快速准确的狂犬病毒抗原检测方法奠定基础.方法 将狂犬病病毒CVS-11株纯化浓缩后免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经细胞克隆和间接ELISA筛选,获得稳定分泌抗狂犬病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株.小鼠腹腔注射法制备大量单克隆抗体并测定腹水效价,用G蛋白亲和层析柱进行纯化,间接ELISA法和间接荧光法鉴定单克隆抗体的类型、特异性及敏感性.结果 细胞融合率达100%,经克隆筛选获4株稳定分泌抗狂犬病病毒抗体的杂交瘤细胞株,其腹水效价分别为1×104,1×105,1×104和1×105;4株单抗均为IgG类型且特异性好.结论 制备的单抗具有良好特异性和敏感性.     

对抗洪抢险官兵中暑的防治

1998年夏季以来,长江中下游洪水泛滥,抗洪形势严峻,我部奉命由福建开赴九江地区抗洪抢险。先后出动官兵56,868人(次),在九江城区4～5号闸口决堤处连续奋战了5昼夜加固决口,筑起了第三道围堰。现将有关中暑情况报告如下: 1 中暑发生的原因 1.1 环境因素气温、气湿、太阳辐射和气流4个气象因素与中暑的发生有密切的关系,在正常情况下,人