内毒素性发热时大鼠脾细胞增殖反应及IL－1、IL－2活性测定

本实验用大鼠腹腔注射内毒素（ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ，ＥＴ）复制发热模型。动物注射ＥＴ后８０ｍｉｎ体温上升达高峰（０．９７±０．２１℃），立即处死动物，检测大鼠脾细胞增殖反应ＩＬ－１、ＩＬ－２活性。实验结果如下：（１）ＥＴ性发热时大鼠脾细胞在无丝裂原的作用下￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入的ｃｐｍ值明显高于对照组。（２）ＥＴ组大鼠脾细胞对刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ，ＣｏｎＡ）的反应性显著高于对照组。（３）ＥＴ组大鼠脾细胞产生ＩＬ－１，ＩＬ－２的能力显著高于对照组。     

梅花鹿免疫细胞生长因子样活性研究

目的:测定梅花鹿脾细胞培养上清的生长因子样活性.方法:采用MTT掺入法检测细胞增殖;采用细胞机械创伤模型,检测此上清促进创伤愈合作用.结果:梅花鹿脾细胞培养上清对正常小鼠NIH3T3细胞具有促增殖作用,对创伤的NIH3T3细胞具有促进愈合作用,并且在无血清培养液中此上清对正常NIH3T3细胞也具有促增殖作用.结论:推测梅花鹿脾细胞培养上清具有生长因子样活性,并在细胞培养基中代替血清的作用.     

人IL-11特异性引物RT-PCR产物分析

提取人骨髓细胞ｍＲＮＡ,应用人ＩＬ－１１特性异引物进行ＲＴ－ＰＣＲ,将全部ＲＴ－ＰＣＲ产物以ＴＡ克隆的方式克隆人ＰＣＲ＾ＴＭ１质粒。     

高迁移率族蛋白B1的致炎细胞因子作用研究进展

目前全身性炎症反应仍然是危重病人死亡的主要原因。近年来发现高迁移率族蛋白B1(HMGB1)这一传统DNA结合蛋白是强大的致炎细胞因子。HMGB1可由单核/巨噬细胞等固有免疫细胞在致炎细胞因子刺激下主动分泌,也可由坏死细胞被动释放。该分子刺激炎症细胞活化并向炎症部位聚集,促进炎症细胞因子分泌造成组织损伤。针对HMGB1的靶向治疗为临床救治感染危重病人拓展了治疗时机,因而具有很大的实际意义。HMGB1的致炎细胞因子作用是炎症损伤的研究热点之一。     

人参皂苷Rg3体外抗HSV-1活性与免疫调节效应

目的：研究人参皂苷Rg3体外对单纯疱疹病毒1型 (HSV-1)的抑制作用与免疫调节效应。方法：采用结晶紫染色法观察Rg3对HSV-1致细胞病变效应的抑制作用。用MTT比色法检测Rg3对Vero细胞和小鼠脾细胞增殖的影响。以Rg3诱导小鼠脾细胞,用鼠脾T淋巴母细胞增殖分析法测定上清中IL-2活性,细胞病变抑制法测定IFN-γ活性。结果：浓度在1.56～25 m g•L^-1的Rg3对HSV-1致细胞病变效应抑制作用显著高于病毒对照组 (P<0.05);浓度小于25 mg•L^-1的Rg3对传代Vero细胞及小鼠脾细胞的增殖作用与细胞对照组比较差异无显著性 (P>0.05); 3.13~6.25 mg•L^-1的Rg3体外诱生IL-2和IFN-γ分泌水平显著高于对照组( P<0.05)。结论：一定浓度的Rg3具有体外抗HSV-1活性,对传代Vero细胞及小鼠脾细胞无毒性,可显著促进IL-2和IFN-γ分泌,参与免疫调节效应。     

甘氨酸-钼磷酸盐体内外抗肿瘤作用的研究

目的 :观察甘氨酸 -钼磷酸盐 [( Gly H) 4 PMo12 O40 · 5 H2 O,GP]对肿瘤细胞生长的抑制作用及对荷瘤小鼠的抑瘤效应。方法 :采用 MTT法进行体外抑瘤效应测定 ,建立小鼠荷 S1 80腹水瘤模型 ,测定体重增长率、抑瘤率以及延命率。结果 :体外实验表明 ,实验浓度的 GP对正常组织细胞均无细胞毒性作用 ( P<0 .0 5 )。对宫颈癌 Hela细胞株、前列腺癌 PC- 3m细胞株、小鼠腹水瘤 S1 80细胞株、原代肺癌细胞等肿瘤细胞生长有明显抑制作用 ( P<0 .0 5 ) ,并呈一定的量效关系。其中对人前列腺癌 PC- 3m细胞株尤为明显。体内实验表明 ,给药组能够抑制 S1 80腹水瘤生长 ,明显延长小鼠生命期 ,延命率高于 CYT阳性对照组。急性毒性实验 LD50 为 2 735 .2 7mg·kg-1,LD50 95 %可信限为 :1 931 .97～ 3872 .5 8mg· kg-1。结论 :本研究表明 ,GP能抑制多种人癌细胞生长 ,延长荷瘤小鼠生存期 ;GP属低毒、高效抗癌药物     

大鼠骨髓MSCs表面分子检测及诱导分化研究

目的通过建立大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）的体外分离培养方法，探讨大鼠MSCs表型特征以及多向分化潜能。方法利用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化SD大鼠骨髓MSCs，传代扩增，进行形态学观察，测定生长曲线。免疫细胞组织化学及流式细胞分析检测细胞表面分子的表达。定向诱导MSCs向脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞分化。结果原代分离的MSCs在接种后48h贴壁，细胞形态为椭圆形，多角形及短梭形，12天时细胞呈长梭形并达到90％单层融合。经传代扩增，细胞进一步纯化，细胞形态为均一的长梭形并呈漩涡状排列，而且生长速率加快，Pl代细胞群体倍增时间为20．3h。细胞免疫组化结果显示P2代细胞表面分子CD44、FN表达阳性，而CD14、CD34阴性，流式细胞检测CD44、FN阳性率分别为92．09％和90．55％。不同诱导剂定向诱导2周，经油红O、阿新兰及茜素红S染色鉴定，P3代MSCs分别向脂肪细胞，软骨细胞及成骨细胞分化。结论通过密度梯度离心结合贴壁筛选方法，体外分离培养的大鼠骨髓MSCs具有很强的增殖能力，并保持稳定的表型特征及多向分化潜能。     

梅花鹿组织细胞培养上清促小鼠免疫细胞增殖效应

梅花鹿是吉林省的特产 ,具有奇特的药用价值 ,鹿茸、鹿胎等被作为药用制剂而广泛利用 ,但对于鹿组织细胞培养上清的研究很少。本研究拟通过免疫细胞增殖试验探讨鹿组织细胞培养上清液对小鼠脾细胞、胸腺细胞、骨髓细胞增殖的影响作用 ,并进一步研究这些培养上清液中的活性因子 ,以便开发梅花鹿的新产品。1　材料与方法1.1　实验动物　 18～ 2 0 g雌性昆明小鼠 ;双阳型梅花鹿。1.2　试剂　肝素钠注射液 ,购自山东莱阳生物化学制药厂 ;淋巴细胞分离液 ,购自上海试剂二厂 ;IMDM,购自美国GIBCO公司 ;小牛血清 ,购自大连生物试剂厂 ;MTT(Th…     

I型成纤维细胞生长因子受体基因在肿瘤组织中的异常变化

成纤维细胞生长因子受体（ＦＧＦＲ） 包括４ 种类型。它们都是免疫球蛋白基因超家族的成员, 同时又是受体酪氨酸激酶, 可参与胚胎发育、损伤修复、血管发生和神经再生等多种重要的生理和病理生理过程。本实验对人胚胎和多种癌组织中的Ｉ型成纤维细胞生长因子受体（ＦＧＦＲ１） 基因组ＤＮＡ 进行了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 印迹分析,发现多种肿瘤的ＦＧＦＲ１ 基因组ＤＮＡ的杂交结果不同, 而与胚胎期ＦＧＦＲ１ 基因组ＤＮＡ 的杂交结果相似。以上结果提示, 恶性肿瘤细胞似乎获得了胚胎细胞的某些特点, 具有超常生长增殖的能力; 肿瘤细胞中的ＦＧＦＲ１ 可能也有胚胎化倾向, 从而使ＦＧＦＦＧＦＲ 系统在肿瘤的发生、发展中发挥异常功能。     

079 CD45分子对Src家族蛋白酪氨酸激酶活性的调节

CD45分子发挥磷酸酶活性使Src家族蛋白酪氨酸激酶的抑制位点磷酸化,激酶区内自磷酸化位点去磷酸化,而Src家族蛋白酪氨酸激酶的这两个主要的磷酸化位点的磷酸化状态决定了激酶的活性.因此,CD45分子既可对Src家族蛋白酪氨酸进行正向调节.又可对其进行负向调节;在TCR相关信号传递过程中,CD45分子对Src家族激酶起正向调节作用;在整合素介导粘附过程中,CD45分子对Src家族激酶起负向调节作用.这是因为细胞内的微环境不同,CD45分子对于Src家族激酶活性的调节功能也就不同,本文拟就有关内容作一综述.