LC-MS/MS同时测定小鼠脑组织中7种神经递质含量

目的: 建立一种同时测定小鼠脑组织中7种神经递质的LC-MS/MS分析方法。方法: 小鼠脑组织加入4倍量冰冷的0.2%甲酸-水超声匀浆,匀浆液加入0.2%甲酸-乙腈沉淀蛋白,离心,取上清液,加入内标,混匀后进LC-MS/MS分析。采用TSK Gel amide 80 (4.5 mm×150 mm,5 μm) 色谱柱,柱温35℃,流动相乙腈-6 mmol·L^-1甲酸铵水溶液(pH 5.5)(67.5:32.5),流速0.2 mL·min^-1,采用正离子多反应检测(MRM)模式进行扫描。通过动物试验验证LC-MS/MS的可靠性,并考察酸枣果肉对小鼠神经递质水平的影响。结果: 多巴胺(DA)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、乙酰胆碱(Ach)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)的最低检测限均<0.1 μg·L^-1,精密度RSD分别为0.52%,0.71%,0.98%,0.35%,0.32%,0.46%,0.94%,准确度RSD分别为0.67%,0.46%,0.53%,0.72%,0.48%,0.59%,0.82%,均符合生物样品的分析要求。动物试验显示与空白组相比,小鼠给予多奈哌齐后,海马和皮层中乙酰胆碱水平极显著升高;而东莨菪碱则作用相反,给药后会降低脑内乙酰胆碱含量,与空白组相比,具有极显著差异。小鼠口服酸枣果肉后,脑内多种神经递质明显发生改变,且变化规律与阳性药物舒乐安定相同。结论: 建立的LC-MS/MS分析方法可应用于神经精神类药物的药理作用机制研究。     

毛梗红毛五加的化学成分研究

从毛梗红毛五加茎皮中分得6种成分,经光谱数据分析,推定一新化合物为6-异次黄嘌呤核苷(6-isoinosine),其余成分鉴定为丁香树脂酚双葡萄糖甙,1-二十六碳烯,β-谷甾醇,d-芝麻素和C₂₂～C₂₈脂肪酸。     

鲜罗汉果中黄酮甙的分离及结构测定

A new flavonol glycoside named grosvenorine and a known compoundwere isolated from the fresh fruits of Siraitia grosvenori( swingle)C. By means of UV,FAB-MS,¹H-¹H COSY,¹³C-1H COSY and NOE difference ,spectra,the structure of grosvenorinewas established as kaempferol-3-O-α-L-rhafmnopyranoside-7-O[β-D-glucopyranosyl-(1-2)-α-L-rhamnopyranoside].The known compound was identified as kaempferol-3,7-α-L-dirhamnopyra-noside.     

从生产葛淀粉的废水液中回收葛根黄酮的研究──葛根黄酮生产新工艺

从生产葛淀粉的废水液中回收葛根黄酮的研究──葛根黄酮生产新工艺陈迪华，斯建勇，常琪，沈连钢（中国医学科学院，中国协和医科大学，北京药用植物研究所，北京１０００９４）葛根黄酮是中药葛根（ｐｕｅｒａｒｉａｌｏｂａｔａ）及其制剂愈风宁心片治疗心脑血管疾病的...     

葛根黄酮提高桑白皮降糖活性及其机制研究

目的:葛根黄酮(PF)对桑白皮提取物(ME)降糖活性的增效作用研究及其机制探讨.方法:4组大鼠(每组5只)分别灌胃给予含淀粉(2 g·kg-1)的桑白皮提取物(ME,34.5 mg·kg-1)、葛根黄酮(PF,211.5 mg·kg-1)、桑葛复方提取物(ME-PF,250 mg·kg-1)或蒸馏水,给药后于0～2h内取血测定其血糖水平;另取2组大鼠(每组5只)施行在体单向肠灌流实验,在ME的主要药效成分1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)相同浓度(10 μmol·L-1)下以ME或ME-PF进行灌流,以LC-MS/MS法测定灌流液中DNJ的浓度.结果:PF与ME联用时,可显著抑制大鼠餐后血糖水平的升高,与仅给淀粉组比较,2h内的总血糖血糖浓度-时间曲线下面积(AUC)水平从(8.71 ±2.26) h·mmol·L-1下降至(5.16 ±1.42) h·mmol·L-1,其下降幅度达40.8％,而单独使用ME和PF时血糖AUC的下降幅度较小,分别为13.6％[(7,52-±1.00) h·mmol·L-1]和11.8％(7.68±2.22 h·mmol·L-1).肠灌流结果表明,ME-PF中DNJ的平均有效渗透系数Peff值(3.5 ×10-3)cm·min-1,明显低于单独使用桑白皮的Peff值(7.5 ×10-3)cm·min-1,(P＜0.05);肠吸收率亦有显著差别(P＜0.01),分别为14.8％,31.6％.结论:葛根黄酮能显著提高桑白皮提取物降低餐后血糖的作用,这很可能与其抑制桑白皮提取物中DNJ的肠道吸收,从而提高具有α-糖苷酶抑制活性的DNJ的肠道浓度有关.     

以Caco-2细胞模型研究远志皂苷水解物的肠吸收特性

目的 通过研究远志皂苷水解物主要活性成分3,4,5-三甲氧基肉桂酸(TMCA)、对甲氧基肉桂酸(PMCA)和细叶远志皂苷(TF)的肠转运特性,预测其口服生物利用度.方法 利用Caco-2细胞模型,以及所建立的LC-MS/MS分析方法,研究上述3个成分在不同浓度下从顶侧(AP)到基底侧(BL)以及从BL到AP2个方向的转运特性.结果 TMCA和PMCA 2个酚酸化合物具有较好的膜通透性,在不同浓度下从AP到BL的表观渗透系数(Papp)均＞10×10-6cm·s-1,而三萜皂苷TF的通透性较差,Papp值均＜1×10-6cm· s-1.3个化合物的转运量均随浓度的增加而增加,但Papp值保持基本一致,且各自2个方向的Papp值无明显差异.结论 TMCA和PMCA具有良好的肠通透性,属吸收较好的化合物,而TF则通透性较差,口服吸收可能很有限;3个化合物均以被动扩散形式转运,且无外排转运机制.     

HPLC法同时测定附子中6种单酯和双酯型生物碱

目的 建立附子中单酯及双酯型生物碱成分的高效液相色谱定量方法。方法 附子干燥粉末用氨水浸润后,以异丙醇-醋酸乙酯(1∶1)超声提取30 min,提取液蒸干后溶于0.01%盐酸甲醇中,经微孔滤膜滤过后,20 μL进行HPLC分析。HPLC分析采用Zorbax Extend-C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-40 mmol/L醋酸铵缓冲液(氨水调pH 10.0)为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长230 nm。结果 6种被测生物碱成分,包括乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰新乌头原碱分离良好,各成分质量浓度与峰面积在测定范围内均呈良好的线性关系(r>0.999),重现性好,6种成分的RSD(n=5)均小于1.50%;平均加样回收率(n=5)为98.20%～100.47%;最低检测限分别为0.26、0.36、0.92、0.30、0.52、0.82 ng。结论 本研究所建立的HPLC方法稳定可靠、简便易行,可用于附子类药材中单酯型和双酯型生物碱的同时定量分析,为附子药材及其炮制品的质量评价和质量控制奠定了基础。     

胶原 - 松质骨载体复合成骨细胞异体肌腱移植实验研究

目的探讨胶原修饰松质骨载体表面 , 与成骨细胞复合进行异体肌腱移植的效果及其临床应用价值 . 方法新鲜牛松质骨经脱脂、 H2O2浸渍及部分脱钙处理 , 制成去抗原块型牛松质骨载体 ( Antigen- extracted Massive Bovine Cancellous Bone Carrer,MBC) . 载体表面经胶原处理后 , 与兔骨膜成骨细胞复合后体外共同培养 , 4周后将复合材料进行异体肌腱移植 , 并分别于 2、 4周后取材 , 行组织学 HE染色观察 . 结果 2周后 , 复合材料表面及孔内有了成骨组织细胞粘附生长 , 材料周围可见大量软骨细胞分化 , 同时有大量的间充质细胞聚集 ; 4周时可见有新骨小梁成熟 , 成小岛状分布 ; MBC部分降解 , 但在新骨中仍能见到残留体 . 结论 MBC载体表面经胶原处理后与成骨细胞的生物相容性更强 , 显示出了良好的骨诱导性和成骨活性及生物可降解性 .     

鲜罗汉果中黄酮甙的分离及结构测定

鲜罗汉果中黄酮甙的分离及结构测定斯建勇，陈迪华，常琪，沈连钢（北京中国医学科学院药用植物资源开发研究所１０００９４）中药罗汉果是葫芦科罗汉果属植物［Ｓｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉ（Ｓｗｉｎｇｌｅ）Ｃ．Ｊｅｆｆｅｒｙ］的成熟果实，性凉味甘，有清热...