bax和bcl-2基因在单纯和放射复合伤口中的表达及与细胞凋亡和愈合延迟的关系

目的研究bax、bcl-2基因在单纯和放射复合伤口愈合中的表达规律及与细胞凋亡和愈合延迟的关系.方法用TUNEL原位末端标记法检测细胞凋亡,用核酸原位杂交方法检测bax、bcl-2mRNA表达并进行定量分析.结果(1)照射后细胞凋亡出现的频度及延续的时间明显高于单伤组;(2)伤口愈合过程中bax、bcl-2表达随着细胞凋亡的增加呈规律性改变bax表达明显增强,且与细胞凋亡发生有良好的相应关系;而bcl-2呈明显下降趋势.结论bax和bcl-2在放射复合伤口愈合细胞凋亡的调控和愈合延迟中起着重要作用.     

中药敷脐治疗妊娠剧吐50例

妊娠早期出现恶心、呕吐、头晕倦卧，甚或恶闻食气，食入即吐者，中医称为“恶阻”，主要是由于胃失和降，冲脉之气上冲所致。笔者用中药敷脐治疗妊娠剧吐50例，效果满意，现报告如下。     

电磁脉冲对犬晶状体上皮细胞P21WAF1表达的影响

目的观察电磁脉冲(Electromagnetic pulse,EMP)对犬晶状体上皮细胞P21WAF1表达水平的影响.方法6×104V/m场强的EMP辐射家犬1～10次,应用免疫组化、原位杂交和图像分析技术对晶状体上皮细胞P21WAF1蛋白及mRNA表达水平进行检测.结果EMP辐射可抑制晶状体上皮细胞的正常分裂,抑制作用随照射次数的增加而加强.辐射10次组P21WAF1表达明显升高(P＜0.05),导致上皮细胞增殖延缓.P1WAF1蛋白与mRNA表达同步且一致.结论高场强大剂量的EMP辐射可抑制晶状体上皮细胞的正常增殖.     

中子及γ线照射小鼠肠道损伤的定量病理研究

目的 定量比较研究小鼠经中子及γ线照射后肠道损伤的病理特点。方法 350只二级雄性BALB/C小鼠,经不同剂量的中子和γ线照射,于照后6h、12h、1d、2d、3d、4d、5d、7d、10d、14d、21d及28d分批活杀,进行全肠长度及重量测量;全肠组织10%缓冲福尔马林固定,石蜡包埋制片, 潘氏细胞及HE染色,Leica图像分析仪检测隐窝细胞数密度和隐窝内潘氏细胞的面密度。结果 中子及γ线照射后全肠的长度缩短、重量减轻,且重量减轻先于长度缩短。2.5Gy中子照射后肠粘膜见明显损伤及损伤后恢复现象,4.0Gy以上照射未见明显恢复。g 射线5.5Gy照射未见粘膜剥脱,12Gy组隐窝再生能力介于中子4.0-5.5Gy之间。中子2.5Gy照后1d内,隐窝细胞数进行性减少,于照后3d增多,7d达高峰,而5.5Gy中子和12Gyγ线于照后3d内均明显进行性减少(p<0.01)。γ线5.5Gy隐窝细胞增加发生时间早,高峰提前。中子2.5Gy照后7d时潘氏细胞明显增加(p<0.05);而5.5Gy组于照后2d潘氏细胞相对增多(p<0.05)。5.5Gyγ线于照后5d增加(p<0.05)。结论 照射后肠隐窝细胞明显损伤,相同剂量照射后,中子对隐窝细胞损伤明显重于γ线;射线对潘氏细胞影响较小,相同剂量的中子及γ线照射后,潘氏细胞出现不同的变化规律。     

人关节软骨脱细胞基质制备实验

背景对天然的细胞外基质进行处理,剔除其抗原成分,保留了组织结构的完整性,这种材料具有良好的生物相容性,能为细胞创造尽可能接近体内的培养环境,因此应是组织工程中细胞培养支架的首选.目的制备人关节软骨脱细胞基质,为进一步研究关节软骨基质作为细胞外支架材料提供方法学资料.设计以骨组织标本为实验对象,单一样本研究.单位解放军总医院骨科研究所.材料实验于2004-01/05在解放军总医院骨科研究所完成.材料来自因股骨颈头下型骨折行关节置换而切除的股骨头.方法切取人关节软骨,剪裁成3.5 mm×4.5 mm×2.0mm大小共10块,冻干处理12h,采取化学去污剂Triton X-100及DNA酶和RNA酶等试剂制备脱细胞的人关节软骨.用苏木精-伊红、番红O及软骨蛋白聚糖免疫组化染色等方法进行关节软骨脱细胞定性检测.主要观察指标脱细胞关节软骨的组织学观察以及软骨蛋白聚糖免疫组织化学染色结果.结果①苏木精-伊红染色、番红O染色均显示细胞陷窝内已无细胞结构.②软骨蛋白聚糖免疫组织化学染色阳性,提示脱细胞关节软骨基质内仍存在软骨蛋白聚糖.结论人关节软骨冻干后,经去污剂-酶等处理方法可脱去软骨的细胞成分,成功制备人关节软骨脱细胞基质.其中保留的软骨蛋白聚糖可能仍存在原有的耐压特性.     

γ射线对肺成纤维细胞中Smad通路信号转导的影响及其意义

目的 检测不同剂量1射线照射对肺成纤维细胞中Smad通路信号转导的影响并探讨其意义。方法：进行大鼠肺成纤维细胞的原代分离培养，应用3，5和8Gy γ射线照射，通过免疫组织化学、免疫印迹和免疫共沉淀等方法检测照射后Smad3，4和7蛋白的表达部位和表达水平的变化及Smad3与Smad4相互作用的变化。结果：3，5和8Gy γ射线照射后，Smad3，4和7蛋白表达水平无显著改变，Smad3与Smad4复合物的形成增加，部分大鼠肺成纤维细胞中Smad3和Smad4主要表达于细胞核。结论：一定剂量的γ射线能促进大鼠肺成纤维细胞中Smad3与Smad4的相互结合及核转位。对Smad通路具有活化作用。     

茵陈蒿承气汤对急腹症异病同治的护理

茵陈蒿承气汤是通里攻下、清热解毒的方剂,它是取《伤寒论》中茵陈蒿汤和大承气汤的二个代表方剂拟成的合方。我院于1990年7月至1991年9月应用其中的六味药对急腹症异病同治226例,现介绍护理如下; 一、临床资料本组病例中,男129例、女97例。急性胰腺炎50例,急性胆囊炎并胆石症101例,急性肠梗阻42例,急性阑尾炎33例。本组226例四种常见急腹症用菌陈蒿承气汤异病同治的结果见附表。二、用药方法①拆方煎药:茵陈蒿承气汤由茵陈、栀子、厚     

大鼠皮肤伤口内VEGF基因表达的定量病理研究

定量研究正常和放射复合伤口中VEGF基因表达及其在血管再生中的作用.方法48只wistar二级大鼠背部皮肤制作圆形伤口后以25Gy60Coγ射线局部照射,于伤后2、5、10、15、2l和28 d活杀取材,采用免疫组化和图像分析技术研究VEGF基因表达及其意义.结果单创组于伤后2 d,新生血管内皮细胞浆内VEGF呈强阳性;5 d时毛细血管数明显增多,其内皮细胞浆内VEGF阳性;而于10 d后,VEGF逐渐减少.伤照组则于伤后5d呈弱阳性,10 d时阳性,15 d后呈弱阳性.定量结果表明单创组VEGF于伤后2-10 d平均光密度(MOD)逐渐减少(P＜0.05或P＜0.01),积分光密度(IOD)逐渐增加(P＜0.05或P＜0.01).15 d后其MOD和IOD均明显减少.伤照组VEGF的MOD和IOD(P＜0.01)于伤后10 d达高峰.照射组与单创组比,伤后5-10 d,其MOD和IOD均明显减少(P＜0.05或P＜0.01);伤后15 d,其IOD较单创组为多(P＜0.05).结论内源性VEGF基因表达参与创伤愈合中血管再生过程;辐射使血管内皮细胞表达VEGF减少,强度减弱,时间滞后.     

表皮细胞培养最佳条件的探索

目的：研究表皮细胞培养的最佳条件,为进一步将其作为皮肤组织工程种子细胞奠定基础。方法：以DMEM作为基础培养液,改变培养条件后,计数2周内克隆形成数,检测细胞增殖能力,确定最佳条件。结果：表皮细胞以分离酶分离可得到大多数基底细胞,在培养液pH值为7．0－7．2,钙离子浓度为0．4mmol/L,血清浓度为18％,温度为36℃,CO2浓度为6％时,表皮细胞克隆形成数量高。结论：在最佳培养条件下,表皮细胞生长状态良好,为人工表皮的构建奠定了基础。