高、低淋巴道转移能力小鼠肝癌细胞株抑制性消减杂交文库的构建

应用抑制性消减杂交（suppression subtracted hybridization,SSH）技术,分别构建2个不同淋巴道转移能力小鼠肝癌细胞株的SSH文库,高转移文库以高转移能力细胞株Hca-F为检测子（tester）,同源的低转移能力细胞株Hca-P为驱赶子（driver）;低转移文库则相反.随机筛选2个文库阳性克隆进行测序,并在GenBank数据库中进行同源性比较.成功构建高、低淋巴道转移能力小鼠肝癌细胞株SSH文库,高、低转移文库中分别包含995个及967个阳性克隆;其中,95%的阳性克隆含有300bp～1 000bp不等的插入片段;随机测序显示,文库中含有已知的基因、ESTs及与任何序列无同源性的新基因片段.     

肿瘤切除联合同期心脏手术18例临床分析

目的总结肿瘤切除联合同期心脏手术的经验。方法从2000年至2007年,我科共实施肿瘤切除联合同期心脏手术18例,其中根治性肾切除7例,肺癌根治4例,肺楔形切除3例,食管贲门癌根治2例,子宫及卵巢切除2例。同期心脏瓣膜置换1例,冠脉旁路移植(CABG)16例。体外循环3例,非体外循环15例。结果全组患者无院内死亡,1例术后发生膈下脓肿经引流痊愈。随访6～80个月,术后远期4例死亡,1例死于心肌梗死,3例死于癌扩散。本组术后1,5年生存率分别为86.6%和70.9%。结论肿瘤切除联合同期心脏手术安全可行,远期效果可能与肿瘤自身生物学行为相关。     

液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中二甲双胍和格列吡嗪

建立了快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中的二甲双胍和格列吡嗪。血浆样品经0.3%甲酸-乙腈(v/v)沉淀蛋白后，以乙腈-水-甲酸(70∶30∶0.3，v/v/v)为流动相，流速为0.50 mL·min^-1。Zorbax Extend C₁₈柱分离，采用大气压化学电离源；以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 130→m/z 60(二甲双胍)，m/z 446→m/z 321(格列吡嗪)和m/z 256→m/z 167(内标，苯海拉明)。测定血浆中二甲双胍的线性范围为2.00～2 000 ng·mL^-1， 定量下限为2.00 ng·mL^-1； 格列吡嗪的线性范围为1.00～1 000 ng·mL^-1， 定量下限为1.00 ng·mL^-1。该方法专属性好，灵敏度高，准确快捷，适用于二甲双胍和格列吡嗪的临床药代动力学研究。     

根治性膀胱全切术后正位可控膀胱术研究进展.

 正位膀胱替代术经过近20 年的临床实践，被越来越多的医学中心所采用。通过总结重要的文献阐述了正位可控膀胱术中患者的选择、输尿管抗反流、上尿路安全性、尿控的恢复、肿瘤治疗的安全性、特殊的并发症和患者生存生活质量等方面的最新进展和新观点。与其他方式的尿流改道相比，正位可控膀胱有可能成为根治性膀胱全切术后新的治疗标准     

胃管补液治疗秋季腹泻30例

世界卫生组织推荐的口服补液盐(ORS)已在临床应用多年。但是,我们在应用ORS的过程中感到对一些婴幼儿和重症腹泻患儿靠口服大量液体有一定困难,一方面患儿不合作,另一方面部份患儿伴有呕吐,致使治疗计划不能按时完成。为此,我们试用了胃管补液疗法,并取得了较好的效果。一般资料:取86年8月—12月收住院的30例秋季腹泻患儿。入院前病史平均3.5天,年龄在3月—1岁。入院时表现Ⅱ度脱水22例,Ⅲ度脱水8例(其中2例伴有低血容量     

绝经前后女性压力性尿失禁尿动力学比较分析

目的比较绝经前后成年女性压力性尿失禁(SUI)的尿动力学特点,探讨绝经前后压力性尿失禁发生机制的差异.方法对116例经临床确诊的成年女性压力性尿失禁患者行腹压漏尿点压测定(ALPP)以及尿道压力图测定,按是否绝经分为未绝经组66例和绝经组50例,比较两组尿动力学特点.结果未绝经组的ALPP值、最大尿道关闭压(MUCP)较绝经组高,控制面积(CA)较绝经组大(P<.05);而两组功能尿道长度(FUL)的差异无显著性(P＞0.05).结论绝经前后女性压力性尿失禁有不同的尿动力学特点,提示女性压力性尿失禁的发生机制在绝经前后存在一定差异.     

膀胱出口梗阻体外细胞生物力学模型的建立的研究

目的建立一种全新的膀胱出口梗阻(BOO)体外细胞水平的生物力学模型,为BOO的研究提供一个更为稳定科学的实验平台.方法应用负压发生装置对贴壁生长在BioFlex培养皿内的正常膀胱平滑肌细胞施加不同程度的周期性张力,使其硅胶底部分别发生10%、20%、30%的形变,利用免疫细胞化学检测收缩表型标志物α-actin,RT-PCR检测增殖指标PCNA的mRNA表达以及Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、cdk2 kinase蛋白表达,观察它们的动态变化,利用MTT法观察细胞增殖性的变化.结果随着形变量的增大,免疫细胞化学发现α-actin先代偿增加后失代偿降低;RT-PCR和Western blotting发现PCNA的mRNA表达量逐渐增加,PCNA、cdk2 kinase的蛋白表达量逐渐增加,30%形变组显著高于正常对照组(P<0.01);MTT实验发现与正常对照组比,细胞的增殖活性显著增加(P<0.01).结论①对培养逼尿肌细胞施加周期性张力负荷作用的方法建立了一种全新的体外细胞水平的BOO模型;②随周期性张力增加,逼尿肌细胞由"收缩型"逐渐转化为"分泌型".     

高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞间抑制性消减杂交文库的建立

目的:以抑制性消减杂交技术分离高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞HcaF和HcaP间差异表达的基因。方法:采用抑制性消减杂交技术,以高低转移力小鼠肝癌细胞HcaF为检测子,以低转移力HcaP细胞为驱赶子,分离高转移力癌细胞中高表达的基因的cDNA片段。将差异表达基因的cDNA片段插入T/A克隆载体,并通过热转化的方法转化大肠埃希菌DH5α,建立了高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞间抑制性消减杂交文库。以菌液PCR的方法检测随机挑选的白色菌落中插入片段的出现频率。提取14个重组质粒进行序列分析。结果:在消减文库中共获800个白色菌落,对随机挑选的160个白色菌落进行菌液PCR扩增,发现95%的白色菌落中含有100～700bp的插入片段。对重组质粒的序列分析和同源性比对发现,所获的14个序列中3个为已知基因,分别来自小鼠热休克蛋白、ribosomalproteinS13、ethanolinduced6基因;4个可能来源于新基因;3个与3个不同的EST同源。结论:成功构建了高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞间抑制性消减杂交文库,为今后高通量筛选癌淋巴道转移相关基因,奠定了坚实的基础。     

"膜系统"学说

目的:通过对“膜系统”学说的提出、建立及认识,探求其在人体医学中的研究价值及为经络的物质研究提供依据。     

针灸治疗腰椎间盘突出症30例疗效观察

腰椎间盘突出症是临床常见病、多发病,是指因腰椎问盘退变破裂后突出,压迫脊髓或神经根所致的综合症[1]。近3年来,笔者应用针灸治疗腰椎间盘突出症30例,取得一定疗效,现报道如下。1临床资料1．1病例选择共收治腰椎间盘突出症引发腰腿痛患者60例,随机分为2组,针灸组和牵引推拿组,每组30例,针灸组