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目的 判定在机械分离纯化犬胰岛过程中,胰腺原位灌洗时应用乌司他丁(UTI)的保护作用,观察胰岛的获取产量。方法将20只犬随机分为两组,每组10只。HC-A组:胰腺经腹主动脉原位灌洗时用冷HC-A液2500ml;HC-A+UTI组:胰腺原位灌洗时,HC-A液中加用UTI 10000U/kg。两组均经主胰管用4℃胶原酶V控压灌注,在Ricordi Chamber系统中消化,用Ficoll连续梯度离心纯化。 相似文献
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[目的]定量比较血管内皮细胞生长因子(VEGF)与P53蛋白在卵巢上皮性肿瘤中的表达的差别和关系。[方法]用细胞图象分析技术和免疫组化法分别检测VEGF和P53蛋白在61例上皮性卵巢良恶性肿瘤组织中表达的积分吸光度(IA)和平均吸光度(MA)。[结果]良性、交界性及恶性肿瘤组织中VEGF和P53蛋白表达的IA与MA值依次增大,良性肿瘤、交界性肿瘤和恶性肿瘤分别两两相比,其IA和MA值差异有统计学意义(P﹤0.01)。VEGF表达与P53蛋白表达结果相互间有联系(P﹤0.05)。[结论]VEGF和P53蛋白在上皮性卵巢肿瘤的形成和发展中有重要影响,可以作为卵巢肿瘤生物学行为恶化的一项指标。 相似文献
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背景:以往的研究表明,胰岛细胞体外培养的时间不宜过长,否则会出现纤维组织过度增生,使胰岛大量死亡,而导致移植失败,所以改善胰岛细胞体外培养环境是非常重要的.目的:将大鼠胰岛种植在聚乙醇酸生物支架上,并进行胰岛与支架共培养,观察支架上胰岛细胞的生长状态、胰岛细胞的形态和胰岛细胞的分泌功能,以寻找胰岛细胞体外生存的良好环境.设计、时间及地点:体外培养,对比观察实验,于2005-06/2008-12在哈尔滨医科大学附属第一医院,卫生部细胞移植重点实验室完成.材料:聚乙醇酸支架纤维直径15 μ m,网孔100~150 μ m,空隙率为97%,厚度为1.0~2.0 mm.细胞培养前将支架浸泡入体积分数为75%乙醇溶液中 30 min,PBS冲洗3次,吹干后放入2 g/L多聚赖氨酸中浸泡30 min,消毒后备用.方法:采用胶原酶V分离和消化大鼠胰岛,对照组胰岛加入含体积分数20%胎牛血清、10 g/L肯霉索-链霉素-两性霉素、10 mmol/L Hepes的RPMI-1640培养液;支架组胰岛放在多聚赖氨酸包被的聚乙醇酸支架上,再加入同样的培养基,每个培养肌中细胞浓度为0.6×103,将两组细胞置于体积分数5%CO2、37℃的恒温培养箱中培养.主要观察指标:应用双硫腙胰岛特异性染色,计算胰岛的数量及检测胰岛的纯度;MTT法检测胰岛的成活率;放射免疫法测定胰岛细胞培养上清液中的胰岛素含量;并用扫描电镜对支架上胰岛的黏附生长进行观察.结果:分离和消化后的胰岛被双硫腙染成红色,胰岛外分泌腺不着色,胰岛纯度≥85%:MTT及胰岛功能检测结果显示,支架组的胰岛成活率及胰岛功能明显增高,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05);扫描电镜观察,胰岛紧密黏附存聚乙醇酸支架上,支架卜胰岛成三维立体生长.结论:聚乙醇酸支架与大鼠胰岛共培养可改善胰岛的成活率、胰岛的功能及形态,并使胰岛体外生存期延长. 相似文献