无功能胰腺内分泌肿瘤手术治疗方法的选择

胰腺内分泌肿瘤(pancreatic endocrine tumors， PET)起源于胰腺内分泌细胞，根据有无临床症状 及其所分泌的激素水平分为功能性胰腺内分泌肿 瘤和无功能性(non-functioning PET，NFPET)两类。 后者人群发病率约为百万分之一，尸检发病率约为 0． 1%～10． 0%。NFPET 的好发年龄为41～60岁，无 性别差异，多为散发，可发生于胰腺任何部位，但胰     

小鼠SLC基因真核表达载体的构建及其趋化活性鉴定

目的：克隆小鼠次级淋巴样组织趋化因子(secondary lymphoid-tissue chemokine，SLC)基因，并构建真核表达载体。在体内外检测该表达载体表达产物的免疫趋化功能。方法：用RT—PCR从C57BL／6小鼠胸腺组织中克隆小鼠SLC基因，构建真核表达载体pcDNA3．1—msLC。在体外，用基因枪转染小鼠黑色素瘤B16F10细胞；RT—PCR检测转染细胞有SLC的表达；利用趋化小室法，检测表达产物针对淋巴细胞的趋化活性。在体内，用基因枪通过小鼠皮肤局部转染SLC基因，观察转染局部淋巴细胞的浸润。结果：克隆的基因经测序证实，为小鼠SLC基因Scya21b型。转染SLC基因的B16F10细胞体外培养48h后，RT—PCR检测到SLC的表达，同时培养基上清具有针对淋巴细胞的趋化活性。通过基因枪局部转染小鼠皮肤，24h后皮肤病理检查显示，局部皮内有明显的淋巴细胞浸润。结论：从小鼠胸腺组织中克隆到小鼠SLC基因，构建的真核表达载体pcDNA3．1—mSLC在体内外均可以表达，并具有针对淋巴细胞的趋化活性。     

In vitro suppression of vascular smooth muscle cell proliferation using adenovirus-mediated transfer of the cd gene

RestenOSis after succesed pel'CUtanons 4sltalnalcorow balloon ~ (~) ~ a major~ to the long~term success Of this PmeedUle['].SOme studies have ~ shoWn that the efficiency ofadenovirus-mwhated gene ~ into vascular smoothmuscle cells ap~ to be siedCanily ~ than previous methods with either liposomes or .tIDtheses[2]. Wehave investigated the feasibility of talgeting neointilhalSMC with genes where PrDductS inhibit cellular PIDliferation. Sevend investigators have Previously demonstlatedth…     

大鼠脑干孤束核中神经激肽B受体神经元在内脏痛信息传递与整合中的作用

背景：脑干孤束核是内脏痛信息向高位脑中枢传递的一个关键的中继站。形态学证据表明，大鼠孤束核中分布有大量的神经激肽B受体(neurokinin B receptors，NKR)。然而，孤束核中表达NKR的神经元是否参与内脏痛信息的传入与整合目前仍不清楚。目的：阐明孤束核中表达NKR的神经元在脑肠通路中传递内脏痛信息中的作用。设计：随机的对照实验性研究。地点和对象：12只SD大鼠购自第四军医大学实验动物中心。大鼠均为雄性，体质量220～250g，用随机数字表法分为实验组和对照组，每组各6只。干预：6只雄性大鼠吸人麻醉后，将2mL50g/L的乙酸经导管注入大鼠升结肠内，20s后再注入5mL生理盐水冲洗结肠。对照组大鼠则注射等体积的磷酸缓冲液(0．01mol／L)。24h后大鼠开胸经心脏灌流40g／L的甲醛。灌注毕后取出鼠脑修块，然后将含有孤束核的脑块在300g／L的蔗糖溶液中浸泡过夜，冰冻切片机切片。用抗FOS抗体和抗NKR抗体行免疫组化双重标记染色。免疫组化由第一作者完成，动物模型构建由第二作者完成，第三及第四作者负责免疫组化结果评估。主要观察指标：孤束核中NKR和FOS蛋白的共表达。结果：孤束核各个亚核中均有大量的NKR免疫阳性的神经元，但在内侧亚核和联合亚核中尤其浓密。阳性产物分布在细胞膜和树突上；胃肠道给予甲醛刺激后，表达FOS蛋白的神经元主要分布在孤束核的内侧亚核和联合亚核。NKR和FOS蛋白双重标记神经元的胞核为黑色，而胞膜为棕黄色。在本研究中，双重标记神经元分别占所有NKR或FOS免疫阳性神经元的37％和42％。结论：在乙酸诱导的炎症性肠病大鼠孤束核中大约有1／3的NKR免疫阳性神经元表达FOS蛋白，提示这些神经元可能参与了内脏痛信息的传递与整合。     

胰腺癌相关免疫原性膜抗原的筛查和鉴定

目的 应用蛋白质组学技术筛查、鉴定胰腺癌相关免疫原性膜抗原.方法 培养、提取并纯化胰腺癌细胞株SW1990的膜蛋白,将膜蛋白通过双向凝胶电泳(2-DE)进行分离,平行的3块2-DE凝胶分别行考马斯亮蓝染色和免疫印迹杂交.收集并纯化临床上66例胰腺癌和24例慢性胰腺炎患者血清中的IgG,分别与膜蛋白2-DE平行凝胶进行免疫印迹杂交.应用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱分析杂交阳性蛋白位点,并经肽指纹库鉴定.应用RT-PCR、实时荧光定量PCR(real-time PCR)、Western blot方法对筛查出的膜抗原进行验证,并比较不同胰腺癌细胞株、正常胰腺组织中目的 膜抗原的基因及蛋白表达水平的差异.结果 胰腺癌细胞株SW1990膜蛋白与胰腺癌患者血清IgG免疫印迹杂交共出现9个阳性点,与同慢性胰腺炎IgG杂交所出现的2个阳性点无重复,经质谱分析鉴定出电压依赖性离子通道(VDAC)2可能是有潜力的候选膜抗原.经RT-PCR和real-time PCR验证,VDAC2基因在胰腺癌细胞株SW1990、AsPc、P3中均有表达.Western blot实验结果表明,VDAC2在胰腺癌细胞株中的蛋白表达明显高于正常胰腺组织.结论 胰腺癌细胞膜蛋白VDAC2可能是具有免疫原性的胰腺癌相关膜抗原,其基因在胰腺癌细胞株SW1990、AsPc、P3中均有表达,并且在胰腺癌细胞株中的蛋白表达水平明显高于正常胰腺组织.