实验猪心脏传导系统的电生理特征

目的 阐明实验猪心脏电传导系统的解剖结构和电生理特征。方法 3头雄性健康成年猪,体重（79.0±9.5）kg,利用超高密度三维标测和CT三维重建技术,探究实验猪心脏电传导系统解剖结构及其毗邻组织位置关系,构建电解剖图、电压图及电激动图。利用HE染色及Bielschowsky神经组织染色法,进一步分析心脏传导系统细胞及神经纤维结构。结果 超高密度三维标测法构建的电激动图、电压图、心电传导参数与CT三维重建及组织病理学神经特殊染色结果相符,三维标测所示心脏传导系统位置与镜下P细胞及神经纤维富集部位一致。结论 本研究通过心脏三维标测方法获取的实验猪电传导系统解剖结构和电生理特征数据可靠,可为医疗器械研发和心血管疾病基础研究提供有效数据支持。     

卡维地洛对猪急性心肌梗死再灌注后无再流的影响

目的:评价卡维地洛防治猪急性心肌梗死(AMI)再灌注后无再流的作用.方法:将中华小型猪24只随机分成对照组、卡维地洛组1mg/(kg·d)和假手术组,每组8只.冠状动脉结扎3h,松解1h制备AMI再灌注模型.AMI前、后和再灌注后均行血流动力学测定和心肌声学造影(MCE)检查,最终行病理学分析.结果:①与AMI前相比,对照组AMI后3h主动脉收缩和舒张压(SBP和DBP)、左室收缩压(LVSP),心排量(CO)和左心室内压最大收缩和舒张变化速率(±dp/dtmax)均显著下降(P<0.05),肺毛细血管楔压(PCWP)和左室舒张末压(LVEDP)均显著升高(P<0.01);再灌注后1h仅LVSP显著恢复(P<0.05),±dp/dtmax继续显著下降(P<0.05);而卡维地洛组AMI后3h各项指标变化与对照组相同;但再灌注后1hLVSP,LVEDP,±dp/dtmax和CO均显著恢复(P<0.05)且比对照组更显著(P<0.05).②对照组MCE和病理染色所测的冠脉结扎区心肌范围(LA)高度一致,再灌注后无再流面积(ANR)分别为78.5%和82.3%,心肌坏死面积(NA)占LA的98.5%;而卡维地洛组%LA虽与对照组相当,但两方法所测ANR仅分别为24.9%和25.8%,NA仅为74.4%,均显著小于对照组(P<0.05).③对照组再灌注即刻和再灌注后1h冠脉血流量仅占AMI前的45.8%和50.6%(P<0.01),而卡维地洛组冠脉血流量分别提高到70.6%和74.1%,均比对照组显著增加(P<0.01).结论:卡维地洛能有效地防治AMI再灌注后无再流,改善其心功能,缩小梗死面积.     

国产室间隔缺损封堵器生物相容性的试验研究

目的观察国产室间隔缺损封堵器植入动物体内的组织学反应,研究其生物相容性.方法选7只实验用犬及3只小型猪非体外循环下通过外科方法建立创伤性室间隔缺损动物模型,直视下经导管植入CardiaCure(R)-ZH心血管异常通道闭合器(北京科迪凯尔医学技术有限公司).分别于术后1、3、6个月处死试验动物取封堵器标本行大体肉眼观察、光镜及扫描电镜检查.结果 1只实验犬因出血于术中死亡,另1只实验犬因术中气栓瘫痪,1周后死亡,余8只植入封堵器成功,均存活至各自试验终点.大体标本显示闭合器表面均见厚薄不等的、光滑的新生内膜爬生,网塞内的海绵内芯结构完整并与坚硬的结缔组织融合;光镜检查显示封堵器网塞上心脏内皮细胞爬生完整,邻近组织未见炎性反应及异物巨细胞聚集,周围心肌未见坏死.扫描电镜观察显示封堵器表面内皮细胞完全覆盖,细胞排列紧密,但封堵器的金属端头未能被心脏内皮细胞完全覆盖.结论实验结果表明,CardiaCure(R)-ZH心血管异常通道闭合器具有良好的生物相容性.     

水通道蛋白4与人星形胶质细胞瘤迁移的相关性

目的 探讨水通道蛋白4（aquaporin-4, AQP4）和星形胶质细胞瘤恶性程度和迁移能力的相关性。方法 收集临床组织标本,培养获得正常星形胶质细胞、低级别星形细胞瘤和高级别星形细胞瘤细胞,荧光定量PCR法检测细胞中AQP4基因相对表达量,免疫印迹法检测AQP4蛋白水平,Transwell法检测细胞迁移能力。结果 荧光定量PCR结果提示低级别组和高级别组内AQP4基因相对于对照组的扩增倍数分别为（1.65±0.052）和（2.04±0.196）,差异有统计学意义（P<0.05）;免疫迹检测结果提示AQP4/β-actin 灰度值比,对照组（0.103±0.012）,低级别组（0.185±0.100）,高级别组（0.248±0.028）,各组间差异有统计学意义（P<0.05）,AQP4蛋白表达水平随细胞恶性程度而增高（P<0.05）;Transwell法检测结果提示各组细胞脱色液吸光度值分别为对照组（0.408±0.010）,低级别组（0.590±0.033）,高级别组（0.986±0.026）,差异有统计学意义（P<0.05）,各组细胞迁移随AQP4表达的增高,细胞迁移能力也增强（P<0.05）。结论 星形胶质细胞瘤中水通道蛋白4的表达随恶性程度的增高而增高,随AQP4表达的上升,星形胶质细胞瘤的迁移能力也增强。     

自体骨髓间叶干细胞诱导分化移植重建窦房结起搏功能的实验研究

目的:探索应用骨髓干细胞治疗病态窦房结综合征的生物介入方法.方法:选取犬6只,随机分为实验组和对照组,每组3只.抽取犬自体骨髓,分离培养扩增骨髓间叶干细胞,并在体外应用5-氮胞苷进行诱导分化.应用射频技术损伤犬窦房结,建立动物病态窦房结综合征模型.将溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的且诱导分化的骨髓间叶干细胞自体移植到窦房结区,应用心电图、组织病理、免疫组化等技术观察干细胞移植治疗效果.结果:在动物病态窦房结综合征模型,自体移植骨髓干细胞后,心电图示窦房结功能明显改善;病理与免疫组化示移植的骨髓干细胞在窦房结区分化为拟窦房结细胞与血管内皮细胞,并与宿主细胞建立缝隙连接.结论:自体移植诱导分化的骨髓间叶干细胞可改善窦房结自律起搏功能.     

两种不同设计的国产VSD封堵器的生物相容性评价

目的：观察国产室间隔缺损封堵器植入动物体内后的组织学反应，评价比较两种不同设计国产室间隔缺损封堵器的生物相容性和安全性。方法：选用中华小型猪9只，非体外循环下通过外科方法建立创伤性肌部室间隔缺损动物模型，直视下经导管分别植入两种设计不同的室间隔缺损封堵器(有端头型和无端头型，实验样品由北京华医圣杰科技有限公司提供)，术后1、2、3个月分别处死动物进行大体解剖、     

细胞因子微球加强骨髓间充质干细胞移植对猪心肌梗死的疗效

目的 通过观察血管内皮生长因子(VEGF)缓释明胶微球与自体骨髓间充质干细胞(MSC)联合移植于猪心肌梗死模型梗死周边区3周后MSC的生存情况,结合磁共振成像(MRI),阐明改善局部微环境对自体MSC移植于缺血心肌后转归的影响,并直观评价MRI对移植MSC在体示踪及半定量分析的可靠性.方法 以乳化冷凝法制备VEGF缓释明胶微球并评价其缓释性能.成年中华小型猪12头,抽取髂骨骨髓并制备自体MSC,以顺磁性氧化铁颗粒(SPIO)和4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride,DAPI)标记细胞.按照随机化表将动物分为MSC移植组及MSC-VEGF缓释微球联合移植组.开胸结扎冠状动脉左前降支制备小型猪心肌梗死模型后第14天,直视下经心外膜于MSC组动物心肌梗死周边区注射MSC(9×107),于MSC-VEGF缓释微球组注射MSC(9×107)及VEGF缓释明胶微球(含9 μg人重组VEGF165).细胞和(或)微球移植后24 h及21 d,磁共振FGRE序列T2*像检测干细胞移植点低信号区的面积及信号强度.病理组织学检测细胞移植区域心肌组织毛细血管密度及干细胞存活情况.结果 明胶微球平均粒径为(104.0±22.6)μm,体内、外缓释VEGF均可达到10 d以上.小型猪心肌梗死模型建立后第14天,梗死区面积为33.6%±8.9%.细胞移植后24 h,MSC注射点于MRI显示为边界清晰的卵圆形T2*低信号区,细胞移植3周后,两组注射点T2*低信号区面积均减小(P<0.05),其与正常心肌组织间的信号对比度均减低(P<0.05).MSC-VEGF缓释微球组移植点毛细血管密度高于MSC组[(15.2±5.4)个/高倍视野比(10.2±5.0)个/高倍视野,t=2.43,P<0.05].MSC-VEGF缓释微球组MSC注射点移植细胞数多于MSC组[(354±83)个/高倍视野比(278±97)个/高倍视野,t=3.14,P<0.05],而MSC凋亡率则小于MSC-VEGF缓释微球组[(6.4±4.1)%比(11.9±4.8)%,t=2.97,P<0.05].结论 VEGF缓释明胶微球可以改善移植于缺血心肌区3周后MSC的生存情况.移植干细胞所生存的微环境是影响其转归的重要因素.MRI对于移植干细胞位置的在体示踪是可靠的,但不能作为对移植细胞定量或半定量分析的依据.     

聚乳酸聚羟基乙酸共聚物涂层雷帕霉素洗脱支架对小型猪冠状动脉内膜增生的影响

目的:评价生物可降解的聚乳酸聚羟基乙酸共聚物(PLGA)涂层雷帕霉素洗脱支架对健康小型猪冠状动脉内膜增生的影响.方法:26只健康小型猪随机分入316L不锈钢裸金属支架组(316 L组)、L605钴铬合金裸金属支架组(L605组)、PLGA涂层L605支架组(PLGA组)和PLGA涂层雷帕霉素洗脱支架组(雷帕霉素组).各组均包括1周观察终点的猪1只和4周观察终点的猪5只.雷帕霉素组还包括12周观察终点的猪2只.每只猪于左前降支和右冠状动脉各置入同种支架1枚.至观察终点时复查冠状动脉造影并处死取材,通过形态学方法观察内膜增生情况.结果:4周时反映内膜增生的各项指标雷帕霉素组均显著优于其它3组,而其它3组之间没有显著性差异.雷帕霉素组与316L组相比支架上内膜厚度少73%(0.11 mm对0.41 mm),支架间内膜厚度少79%(0.06 mm对0.29 mm),新生内膜面积少69%(0.64 mm2对2.09 mm2),面积狭窄百分比少6l%(18.53%对47.27%).316L组有4例、L605组有3例发生支架内狭窄,而雷帕霉素组无支架内狭窄发生.12周时雷帕霉素组内膜增生有所加重,但较4周时相比除了支架间内膜厚度外其他反映内膜增生的各项指标差异均无统计学意义.结论:采用可降解的PLGA涂层雷帕霉素洗脱支架可以显著抑制健康小型猪冠状动脉支架置入术后4周和12周的内膜增生.     

用结扎法建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型

目的用结扎法建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型,为研究干细胞移植对小型猪心肌缺血再灌注损伤后的治疗作用提供基础。方法选用中国小型猪25头,结扎冠状动脉左前降支中远1/3处,90 min后松开。在结扎前后及松开时分别进行冠状动脉造影和描记心电图,4周后处死, 进行心肌TTC染色、HE染色和PTAH染色。结果造模成功率为92％(23/25),结扎法阻断冠状动脉血流及重新开放血流血管再通的成功率均为100％。模型猪心肌经病理显微镜检查有坏死心肌。结论结扎法阻断冠状动脉血流及血管再通的成功率均为100％,此法是建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型的较好方法。     

精制血府胶囊对犬急性心肌缺血心脏血流动力学和心肌耗氧量的影响

目的：探讨精制血府胶囊对犬急性心肌缺血心脏血流动力学和心肌耗氧量的作用机理。方法：采用结扎犬冠状动脉的方法造成急性心肌缺血模型，十二指肠给药，观察其对缺血心脏冠状动脉血流量、心输出量及心脏收缩舒张功能等的影响。结果：结扎犬冠状动脉造成急性心肌缺血后，空白对照组心脏收缩舒张功能减退、冠状动脉血流量及心输出量降低，而精制血府胶囊组各项指标均有一定改善，大剂量组更为显著，并可降低心肌耗氧量。结论：精制血府胶囊可保护火急性心肌缺血心脏的泵血功能，其机理可能与降低心肌耗氧量、增加心肌供血有关。