硫氰酸胍抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶Ⅰ

硫氰酸胍抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶Ⅰ孙月庭，刘斌剑，曲菁华（中国人民解放军第一六一中心医院，武汉４３００１０）现已证实心肌梗塞的早期在胸痛发作８～１２ｈ后，血清中ＬＤ１浓度开始升高，２４～４８ｈ达到高峰，其敏感性达１００％，特异性达９５％以上。测定Ｌ...     

脂蛋白脂酶与肝甘油三酯酶

脂蛋白脂酶(LPL)和肝甘油三酯酶(H—TGL)在脂蛋白代谢中具有重要作用。它们的活性受许多因素的影响,其活性的改变与某些疾病有关。本文对这两种酶的特性及其在糖、脂代谢中的作用和某些激素、运动、饮食对该两酶的影响,作简要介绍。LPL、H—TGL 的特性与生物学作用LPL 存在于肝外组织,哺乳动物中以脂肪、哺乳期乳腺、心肌中活性最高,在骨骼肌、肺、脑及胎盘中也都有该酶。该酶在以上组织的实质细胞中合成后,通过细胞的分泌,并转移到毛细血管内皮细胞管腔的表面。载脂蛋白 C—Ⅱ(apoc—Ⅱ)为其辅助因子,具有激活 LPL 的作用。Schreher 和 Green 报道,apoc—Ⅱ能使肝素的人血浆 LPL对 TG 的 km 值下降6倍。Fielding 也得到了使大鼠心脏 LPL 的 km 值下降3倍的结果,但反应的最大速度不变。km 值降低的原因可能是使结合于脂蛋白接触面的酶量增加,或者酶对     

高剂量HBeAg引起e系统双阳模式

乙肝标志物检测中出现e系统双阳模式(即在同一份HBV感染者血清中同时检出HBeAg和HBeAb的现象)的机制,一直缺乏基于实验依据的定论。作者研究发现,高浓度钩状效应是引起e系统双阳模式的根本原因,而不是HBeAg的血清转换。材料与方法1材料1·1试剂HBeAg夹心法和HBeAb竞争法ELISA试     

聚合酶链反应技术应用进展

全血不需分离细胞，将红细胞低渗溶解，直接取细胞胞溶物进行PCR基因分型，结果可靠；血管紧张素转换酶（ACE)等位基因缺失在缺血性心肌病中有重要意义，而ACE基因插入/缺失（I/D)多态性检测由Ferenc Somogy Vari提出的迅速PCR,在Light cycler仪器上采用荧光标记的寡核苷酸杂交探针能准确快速的进行基因分型;DNA模板无需变性，进行HBV DNA扩增。     

对氨基苯甲酸甘氨酸结合代谢率定量检测试验对白兔肝功能的研究

目的 评估急性肝坏死兔甘氨酸结合对氨基苯甲酸（PABA）转变成马尿酸的代谢能力。方法 30只雄性大耳白兔随机分组成实验组（20只）用D－氨基半乳糖致大耳白兔急性肝坏死,对照组（10只）注射生理盐水。采用高效液相色谱法测定血清中不同时间的对乙酰氨基马尿酸（PAAHA）、对氨基马尿酸（PAHA）和对乙酰氨基苯甲酸（PAABA）的含量。结果 实验组与对照组比较,马尿酸的形成明显减少。在不同时间分析马尿酸的代谢率,显示与肝损伤的程度相关,而PABA的乙酰化程度与肝损伤程度无明显相关,在严重急性肝损伤时PAHA的浓度为零。结论 甘氨酸结合PABA的代谢率的测定可作为肝功能定量试验和急性肝坏死的灵敏指标。     

HOOK效应的特别形式：HBV e系统双阳模式

[目的]探讨ELISA一步法在同一份血清中同时检出乙肝e抗原和e抗体的原因。[方法]以正常的ELISA一步法筛选出13例e抗原和e抗体同时阳性的病人血清，用两步法ELISA对筛选出的血清进行复检，以夹心ELISA检测HBcAg，以荧光定量PCR检测HBV DNA。[结果]13例e抗原和e抗体同时阳性的病人血清，用两步法ELISA复检。结果全部为“大三阳”，HBcAg阳性及HBV DNA也全部阳性，e系统双阳模式中HBeAb的阳性为误判。[结论]“HOOK”效应可能是引起HBeAb假阳性的原因。     

环胞霉素A、亲合素和钙调磷酸酶复合物的结构特性与免疫抑制及其毒理作用机理

钙调磷酸酶（calcineurin，CN）是亲免素（immunophilin）-免疫抑制药物（immunosuppressant）复合物-环胞霉素A（cyclosporin A，CsA）、环胞霉素A亲合素（cyclophilin，CyP）和FK506结合蛋白（FK506-bindingprotein，FK BP-506）、FK506的共同靶目标。这些药物蛋白的复合物都能特异地抑制CN的生物活性，但是两种结构完全不同的亲免素-免疫抑制药物复合物为何能够作用同一靶目标目前仍不清楚。     

铜绿假单胞菌外毒素A基因DNA片段的克隆及序列测定

目的 建立含有铜绿假单胞菌外毒素A基因DNA片段的克隆株。方法 根据已报道的序列设计铜绿假单胞菌外毒素A基因的特异引物,用PCR方法从标本扩增出预期大小的DNA片段,并将该片段纯化后与T载体连接,转化到大肠埃希菌,筛选出含有插入片段的克隆。结果 阳性克隆株经DNA序列测定,证实与已报道的铜绿假单胞菌外毒素A基因DNA序列,在399个碱基中仅有3个碱基不同,但编码的氨基酸完全一致。结论 成功构建含有铜绿假单胞菌外毒素A基因的克隆,为大量制备探针和用PCR方法检测铜绿假单胞菌提供了基础。     

环孢霉素A的免疫抑制作用及血管内皮细胞氧化应激反应和毒性作用的分子生物学机制

免疫抑制药物环孢霉素A通过与胞浆内的环孢霉素A受体及钙调磷酸酶形成三元复合物,进而阻断T细胞活化,达到免疫抑制的目的。但同时可以诱导细胞内活性氧簇和活性氮簇等氧化应激物质产生,从而对细胞形成毒性作用。另外,环孢霉素A结合线粒体膜间腔的环孢霉素受体D后,可引起迟发的溶酶体损伤,激活组织蛋白酶D,导致DNA操作和细胞坏死。环孢霉素A的不良反应可以通过调整其用药剂量及与其他药物配合使用来降低甚至消除。