扩散成像在脑水肿研究中的价值

自 198 6年Ｌｉｂｅｎｈａｎ[1] 将扩散加权成像 (ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ ｗｅｉｇｈｔｅｄｉｍａｇｉｎｇ ,ＤＷＩ)应用于临床以来 ,经过 10多年的不断完善发展 ,并随着平面回波技术 (ＥＰＩ)的开展 ,ＤＷＩ在临床上的应用愈来愈广泛 ,特别是对脑缺血的研究最多、最为深入[2 ] 。     

缺血半暗带组织中水通道蛋白4表达的初步研究

背景：在组织学和细胞学上对半暗带的认识已取得了进展，而关于水通道蛋白(aquaporin-4，AQP4)与半暗带和磁共振成像相结合的报道不多。目的：探讨水通道蛋白-4(aquaporin-4，AQP4)在缺血半暗带(ischemic penumbra，IP)中的表达规律。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：健康Wistar大鼠35只，体质量300～400g，雌雄不拘，随机分为对照组和栓塞组；栓塞组又分为大脑中动脉栓塞(MCAO)后15，30min，1，3，6，24h组，每组各5只大鼠。干预：对照组的大脑中动脉不栓塞，其余操作同栓塞组。在对照组术后30min、各栓塞组于栓塞结束时行脑部T1WI，T2WI和DWI扫描。采用刘梅丽等方法界定影像半暗带，计算影像半暗带和中心梗死区的相对表观扩散系数(ADC1和ADC2)，将缺血脑组织进行红四氮唑(TTC)染色，并与DWI图像对比。取最大层面的影像半暗带组织进行病理观察、免疫组织化学及原位杂交实验，用图像分析检测AQP4蛋白、基因的表达量。并进行统计分析。主要观察指标：①影像半暗带组织病理观察结果。②影像半暗带和中心梗死区的相对表现扩散系数。③AQP4蛋白、基因的表达量。结果：对照组的DWI和T2WI未见异常，ADCR为(98．7&;#177;0．8)％，AQP4蛋白表达平均值为(7．9&;#177;0．5)％，基因表达平均值为0．5&;#177;0．06。栓塞后15min即在DWI上出现高信号；平均于栓塞后1．4h在T2WI显示高信号，ADC1在24h内始终呈下降趋势，在1h内迅速下降；而ADC2呈现先降后升的变化规律。在1h内AQP4表达迅速上调，1～24h仍缓慢增加，AQP4表达与ADC1呈显著负相关(r=-0．989，P&;lt;0．001)。影像半暗带与组织半暗带都具有相同的病理改变—细胞性水肿。结论：影像半暗带与组织半暗带是等值的，半暗带的病理基础之一是细胞内水肿，AQP4表达增强是缺血半暗带形成的重要原因，半暗带组织的ADC值下降可以间接反映AQP4表达上调的水平。     

硫酸软骨素蛋白多糖4细胞在成年大鼠中枢神经系统的定位分布及其异质性

目的:研究硫酸软骨素蛋白多糖4细胞(NG2细胞)在成年大鼠大脑与脊髓的定位分布及其异质性.方法:应用免疫组织化学、免疫荧光方法观察大脑与脊髓NG2阳性细胞分布及其形态特征.采用Image Pro Plus6.0图像分析软件对NG2阳性细胞胞体面积、突起个数、突起长度进行测量.应用SPSS17.0软件对结果进行统计学分析.结果:NG2细胞在成年大鼠中枢神经系统内广泛分布;在脑内NG2细胞突起数目较多,胞体较小;而在脊髓内NG2细胞突起较少,但其胞体却较大.结论:在脑和脊髓内NG2细胞的形态存在异质性,提示其在成年大鼠中枢神经系统两个部位具有不同的功能.     

水通道蛋白4在小鼠嗅觉系统中的表达及功能

目的研究水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)在小鼠嗅觉系统中的表达及功能。方法应用免疫荧光和免疫印迹技术研究野生型和AQP4基因敲除小鼠嗅觉系统中AQP4的表达差异;采用埋藏食物小球实验、嗅觉迷宫实验两种嗅觉行为学方法以及气体刺激性嗅觉电位记录(electroolfactogram,EOG)检测两组小鼠嗅觉功能的差异。结果免疫荧光和免疫印迹结果均证实了AQP4基因敲除小鼠嗅觉系统中没有AQP4的表达。免疫荧光结果表明AQP4主要分布于嗅黏膜上皮层中支持细胞膜、Bowmann’s腺管上皮细胞膜以及基底细胞膜上,还分布于嗅黏膜固有层中Bowman’s腺上皮细胞膜、嗅神经束周围的嗅鞘细胞膜,以及嗅球的嗅神经层和小球层。行为学检测结果显示,埋藏食物小球实验和嗅觉迷宫实验中除对照实验外,野生型和AQP4基因敲除小鼠在所有测试时间点的差异具有统计学意义(P<0.05)。气体刺激性诱发电位结果发现,两组小鼠嗅黏膜在不同气压强度饱和三甲胺(trimethylamine)作用下的嗅觉电位波形相似,波幅均随气压的逐渐增加而增大;而在相同气压作用下,AQP4基因敲除小鼠嗅觉电位的波幅低于野生型小鼠,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 AQP4广泛分布于嗅觉系统包括嗅黏膜、嗅神经和嗅球的多个部位,其可能具有保护嗅神经束和促进神经信号传递的作用。     

水通道蛋白-4在大鼠创伤性脑水肿中的表达及其意义

目的探讨水通道蛋白-4(AQP4)在大鼠创伤性脑水肿形成过程中的表达变化及其意义。方法选择健康成年Wistar大鼠随机分为实验组(n=60)和对照组(n=15),实验组采用改进的Feeney氏法,造成大鼠右侧大脑半球局部脑损伤;对照组仅切开头皮,不造成大鼠脑损伤。分别进行脑组织形态学观察、脑含水量检测、免疫组织化学方法检测各组AQP4的表达水平。结果实验组72h病灶区域脑组织含水量百分率[(80.18±0.55)%较对照组(78.10±0.52)%]高(P<0.05)。实验组1、3h AQP4平均吸光度值(0.210 0±0.029 4、0.186 0±0.016 5)较对照组(0.143 3±0.053 8)高(P<0.05)。结论在脑创伤早期,AQP4强烈表达,可能与脑创伤后的应激反应有关。在脑创伤后期,由于AQP4表达呈下调趋势,其活性降低,出现混合性脑水肿。     

左膈下动脉及其分支的应用解剖学观察

目的丰富国内左膈下动脉(LIPA)的解剖学资料,为临床LIPA相关疾病的诊断治疗提供依据。方法在尸体上观察LIPA的起始部位,游离解剖LIPA,观察其分支及分布范围,并测量LIPA的起点处的外径和可游离长度。结果 LIPA起源于腹主动脉、腹腔动脉和胃左动脉分别占44.05%、52.38%和3.57%;LIPA和右膈下动脉共干占19.05%,共干长度0～5mm;LIPA起始端外径为(2.26±0.56)mm,可游离长度(109.33±24.63)mm,发出的分支肾上腺上、中动脉和胃上动脉比例分别为100.00%、27.38%和38.10%。结论掌握和了解LIPA及其分支等情况,对相关位置的介入和手术治疗具有重要的临床意义。     

新生大鼠持续缺氧条件下水通道蛋白4与脑水肿的关系

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在新生大鼠持续缺氧过程中与脑水肿的关系。方法健康10d龄SD大鼠,随机分为对照组和实验组。实验组结扎右侧颈总动脉,然后缺氧不同时间分为缺氧缺血(HI)2h组、HI 4h组、HI 8h组、HI 16h组4个亚组,对照组行假手术。观察每组动物神经行为学改变,各组实验取脑组织,行苏木精伊红(HE)染色、免疫组织化学染色、荧光定量PCR,观察新生大鼠海马CA1区形态变化和AQP4表达水平。结果实验组均出现不同程度的缺氧症状;实验组与对照组比较,有不同程度的水肿,且随着时间的延长,水肿加重,神经元呈现不可逆损伤;AQP4蛋白和RNA的表达水平呈下降趋势。结论 AQP4表达水平下降参与新生大鼠持续缺氧缺血条件下脑水肿的形成。     

胰头与十二指肠的血供关系及其临床意义

目的　了解胰头及十二指肠的血管走行,为在DPPHR术中如何保护十二指肠的血供及是否行Kocher操作提供更多的形态学资料。 方法　随机选取40具尸体,充分解剖暴露肠系膜上动脉、胃十二指肠动脉及胰十二指肠前后动脉弓,对供应十二指肠的动脉及伴行的静脉行径进行仔细观察和记录。 结果　在97.5%的标本中（n=39）, 胰十二指肠后动脉弓及伴行的静脉均位于胰后筋膜内;在90%的标本中（n=36）, 胰十二指肠下前动脉及伴行的静脉走行于胰十二指肠沟内,易于保留;在个别标本中（10%, n=4）, 没有完整的胰十二指肠前动脉弓;其中1例标本（2.5%,n=1）,没有完整的胰十二指肠后动脉弓,但供应十二指肠的动脉及其伴行静脉仍位于胰后筋膜内。 结论　DPPHR手术的关键在于保留胰十二指肠后动脉弓,同时尽可能地保留部分胰十二指肠前动脉弓,而Kocher操作有利于保护胰十二指肠后动脉弓;在个别标本中,没有完整的胰十二指肠前动脉弓,此时施行DPPHR可能伤及十二指肠血供,导致手术失败。     

低渗状态下星形胶质细胞AQP8的表达变化

目的 探讨低渗透压作用下,星形胶质细胞水通道蛋白8(aquaporin8,AQP8)的表达变化规律.方法 原代培养大鼠星形胶质细胞,随机分为对照组(常规培养液)和低渗组(268、254、240 mmol/L),每组分别作用1、3、6、12、24 h,共5个时间点.通过MTT比色法检测细胞活力,免疫细胞化学、免疫荧光、Real time-PCR研究AQP8及其mRNA的表达变化.结果 对照组星形胶质细胞的细胞形态、细胞活性、AQP8及其mRNA的表达在各时间点均无明显变化(P>0.05).低渗组中,星形胶质细胞水肿,细胞活性下降;AQP8及其mRNA的表达水平随低渗程度的下调和低渗作用时间的延长而增强.低渗液(268、254、240 mmol/L)作用后,免疫细胞化学显示星形胶质细胞的AQP8表达从低渗作用1 h的(0.258 3±0.009 8, 0.280 0±0.010 9, 0.281 7±0.007 5) 到低渗作用24 h的(0.385 0±0.010 9, 0.406 7±0.007 0, 0.425 0±0.010 4) (P<0.05);Real time PCR显示:AQP8与beta-actin 的mRNA水平比从低渗作用1 h的(0.127 5±0.011 8,0.134 4±0.032 4, 0.167 5±0.007 8)上升到(3.278 0±0.121 2,5.410 4±0.104 1,8.351 0±0.288 0).结论 低渗作用下,AQP8介导的水分子运输可导致星形胶质细胞肿胀,继而引发细胞结构、功能的损伤; AQP8的表达上调可能是导致星形胶质细胞水肿形成和发展的重要分子机制之一.     

c-myc、MMP-9在受压静脉管壁的表达

目的:研究c-myc蛋白和MMP-9在受压静脉管壁的表达,初步探讨静脉受压后血管重塑的分子机制.方法:42只SD大鼠随机分为对照组(21只)和实验组(每时间点各3只,共21只),用5#注射针头辅助作部分髂静脉结扎造模.分别在0.5、12、24、48、72h、7和14d取材,明胶液包埋后冰冻切片,用免疫组化SP法检测c-myc蛋白和MMP-9的表达,采用计算机图像分析系统测定切片的平均积分光密度(IOD).结果:对照组和正常静脉管壁均未见c-myc蛋白、MMP-9表达,实验组c-myc蛋白从12 h开始表达,MMP-9从24 h开始表达上调,并逐渐增强,IOD逐渐升高,与对照组比较,差异具有显著性(P<0.05).7 d时两者表达同时达到高峰.c-myc蛋白与MMP-9在受压静脉管壁的表达呈正相关(r=0.7532,P<0.05)结论:c-myc基因产物和MMP-9在受压静脉管壁表达增强,两者在受压静脉管壁重塑过程起着重要作用;c-myc基因和MMP-9的表达具有相关性.