低氧对大鼠大脑皮层细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA的影响

目的:观察不同氧浓度环境下不同时间处理对大鼠大脑皮层细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA的影响。方法:原代培养新生SD大鼠大脑皮层细胞,设1%、4%两个低氧浓度和3、6 h两个低氧处理时间,处理结束后收集各组细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-QPCR)方法检测各组细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA情况。结果:与相应的常氧对照组相比,1%和4%氧浓度环境处理细胞3 h和6 h时,IL-1β和TNF-αmRNA表达量均无明显变化(P>0.05);处理细胞3 h时,IL-6 mRNA表达量均无明显变化(P>0.05),但有上升的趋势,处理细胞6 h时IL-6 mRNA表达量均显著升高(P<0.05)。结论:1%和4%氧浓度环境虽均对大脑皮层细胞表达IL-1β和TNF-α mRNA无影响,但可诱导细胞表达IL-6 mRNA,且具有时间依赖性。     

高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制

目的：分析高钾离子（Ｋ＾＋）引起ＰＣ１２细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高的可能机制。方法：利用ＭｉｒａＣａｌ Ｉｍｉａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ检测［Ｃａ＾２＋］ｉ，Ｃａ＾２＋荧光探针为Ｆｕｒａ－２／ＡＭ。结果：（１）ＫＣ１浓度为３０￣１００ｍｍｏｌ／Ｌ时，可剂量依赖性地诱导ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ升高；（２）在细胞外无Ｃａ＾２＋时，高Ｋ＾＋对ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ无影响；（３）Ｌ－     

骨髓基质细胞条件培养液对中脑神经干细胞分化的影响

目的 :探讨骨髓基质细胞条件培养液诱导中脑神经干细胞分化为高比例神经元的机制。 方法 :采用骨髓基质细胞条件培养液培养中脑神经干细胞 7d ,通过免疫细胞化学染色方法鉴别和计数神经元的数量 ,并与自然分化组、骨髓基质细胞膜片段组、骨髓基质细胞固定组以及骨髓基质细胞共培养组相比较。 结果 :用成年大鼠骨髓基质细胞的条件培养液体外培养新生大鼠中脑神经干细胞 ,神经干细胞分化为神经元比例 [(40 .5± 14 .5 ) % ]明显高于自然分化组 [(16 .6± 10 .5 ) % ]、骨髓基质细胞膜片段组 [(2 0 .8± 12 .5 ) % ]以及骨髓基质细胞固定组 ,但与骨髓基质细胞共培养组 [(36 .1± 9.7) % ]相比无统计学差异 (P >0 .0 5 )。 结论 :骨髓基质细胞条件培养液可明显提高神经干细胞分化为神经元的比例     

氯化钴和跑台运动对大鼠海马神经发生及低氧诱导因子-1水平的影响

目的:比较氯化钴(CoCl2)所致机体低氧和跑台运动对大鼠海马齿状回新生细胞数量和低氧诱导因子-1(HIF-1)水平的影响.方法:腹腔注射CoCl2和BrdU于动物,运动方式为跑台运动,大鼠海马齿状回新生细胞和HIF-1采用免疫荧光显色显示.结果:小强度跑台运动组大鼠海马齿状回内BrdU免疫阳性(BrdU+)细胞数量显...     

皮质酮对TNF—α致海马神经元细胞内钙变化的作用

应用荧光影像系统检测了原代培养海马神经元内钙离子的变化情况，并分析了皮质酮、肿瘤坏死因子（TNF－α）对谷氨酸引起的海马神经元内钙升高的调节作用及其皮质酮对TNF－α作用的调节。结果显示：（1）使用不同浓度的皮质酮处理海马神经元48h后，观察到10^-6mol/L和10^-7mol／L的皮质酮可诱导海马神经元静息钙浓度升高，但10^-8mol/L和10^-9mol/L的皮质酮对海马神经元内钙无影响。（2）10^-6mol/L皮质酮处理海马神经元48h后，对谷氨酸诱导的海马神经元内钙升高无调节作用。（3）使用100ngTNF－α处理海马神经元48h后，既可诱导海马神经元静息钙升高，也可抑制谷氨酸引起的海马神经元内钙升高。（4）皮质酮可逆转TNF－α对海马神经元静息钙浓度的调节作用，但对TNF－α抑制谷氨酸升钙效应无影响。     

脑缺血再灌注模型大鼠跑台运动后海马神经再生和血管内皮生长因子mRNA的变化

背景：研究表明跑台运动能促进健康大鼠海马的神经细胞再生。 目的：观察跑台运动对脑缺血再灌注模型大鼠海马神经再生和血管内皮生长因子mRNA表达的影响。 方法：用线栓法阻塞大脑中动脉以建立单侧脑缺血再灌注模型大鼠,将建模成功大鼠随机分为跑台运动组和安静对照组,另设假手术组。安静对照组和假手术组大鼠安静饲养,跑台运动组进行7 d跑台运动。跑台运动组和安静对照组大鼠在每天跑台运动前腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷溶液。 结果与结论：免疫组织化学染色结果显示,跑台运动组大鼠双侧海马及齿状回5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性表达细胞数量显著多于安静对照组(P < 0.01)。实时荧光定量PCR检测结果显示,跑台运动组大鼠海马血管内皮生长因子mRNA表达水平显著高于安静对照组和假手术组(P < 0.05)。结果证实,跑台运动能够明显促进脑缺血再灌注大鼠海马神经细胞的再生并上调海马组织血管内皮生长因子的表达。     

VEGF在运动诱导大鼠海马神经发生中可能的信号转导通路

目的分析血管内皮生长因子(VEGF)在运动诱导的神经发生中可能的信号转导途径。方法通过预先埋管方式,向动物侧脑室内分别注射Flk-1、ERK和PI3-K的对应抑制剂SU5416、PD98059和Wortmannin,采用免疫组织荧光染色技术检测海马齿状回内新生细胞数量。结果Wortmannin和SU5416的使用可导致大鼠海马齿状回内新生细胞和新生神经元数量明显减少(P<0.05),PD98059的使用则没有导致大鼠海马齿状回内新生细胞和新生神经元数量明显减少(P>0.05)。结论VEGF可能通过受体Flk-1主要激活PI3-K所在的信号通路诱导海马的神经发生。     

二甲亚砜对运动诱导的大鼠海马神经发生的影响

目的:探讨DMSO对运动诱导的大鼠海马神经发生的影响。方法:将30只雄性5周龄SD大鼠随机分为对照组、运动组、DMSO+运动组,通过预先埋管方式,向DMSO+运动组动物侧脑室内注射DMSO,注射1小时后,运动组和DMSO+运动组动物进行跑台运动30min,运动方案为:5m/min,5min;8m/min,5min;11m/min,20min。1周后所有动物取材,采用免疫荧光染色技术和荧光显微镜,检测各组大鼠海马齿状回内新生细胞的数量。结果:各组动物每个脑切片海马齿状回内BrdU免疫阳性细胞数平均为:对照组89.92±12.77个,运动组119.19±19.94个,DMSO+运动组73.94±17.36个。DMSO+运动组的BrdU+细胞数量较运动组减少了37.96%,BrdU++NeuN+细胞数量减少了40.56%。结论:DMSO对运动诱导的大鼠海马神经发生有显著的抑制作用。     

小鼠腹腔巨噬细胞内的游离钙离子浓度 及PMA、fMLP反应性的不均一性

目的 :巨噬细胞 (Ｍ)的反应性是炎症过程中的重要问题。迄今为止绝大多数的工作是以细胞群作为研究对象。我们推测在细胞群中各个细胞的反应可能是不一样的 ,因此有必要在单细胞水平上对白细胞的反应性进行研究。本实验以细胞内游离钙离子浓度 ( [Ｃａ2 ]ｉ)为指标 ,测定了静息状态下单个腹腔Ｍ内 [Ｃａ2 ]ｉ水平及其对ＰＭＡ、ｆＭＬＰ的反应性。方法 :用生理盐水灌洗昆明小鼠腹腔获得Ｍ ,在铺有鼠尾胶的盖玻片上贴壁 30～ 90ｍｉｎ后用 2 μｍｏｌ/ＬＦｕｒａ - 2 /ＡＭ及 0 0 4 %Ｆ - 1 2 7负载 ,利用荧光显微镜成像系统检测并…